陈杰周芸郭佳馥宁晓文白淑萍
（丹东市疾病预防控制中心118000）
【摘要】人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）抗体检测筛查实验室（以下简称HIV筛查实验室），是艾滋病防控工作的重要组成部分。建立一整套严谨高效的HIV实验室的质量管理体系，使整个检测过程从样品接收到检测结果报出的人、机、料、法、环各方面均处于可控制状态并形成可操作的长效机制，同时通过参加实验室间比对，对实验室检测的组织、实施进行评价，是保证实验室检测结果质量的有效手段和措施。
【关键词】HIV筛查试验室质量管理体系
【中图分类号】R446.62【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）15-0074-02
HIVscreeninglaboratoryqualitymanagementsystemestablishmentandimplementation
ChenJieZhouYunGuoJiafuNingXiaowenBaiShuping
ThecentersfordiseasecontrolandpreventionofDandong
Kayword:HIVscreeninglaboratoryqualitymanagementsystem
【Abstract】Thehumanimmunodeficiencyvirus(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)antibodyscreeninglaboratory(hereinafterreferredtoastheHIVscreeninglaboratory),isHIV/AIDSpreventionandcontroloftheimportantpart.ToestablishacompletesetofrigorousandefficientHIVlaboratoryqualitymanagementsystem,makethewholedetectionprocessfromsampletoreceivetestresultsreported,handlers,machine,material,method,environment,ringinallaspectscanbecontrolledconditionandtheformationofoperationalmechanism.Andatthesametime,throughparticipatinginthelaboratory,thelaboratorytestthanbetweentheorganization,implementation,evaluationistoguaranteethequalityofthelaboratorytestresultseffectivemeansandmeasures.
人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）抗体检测筛查实验室（以下简称HIV筛查实验室），是艾滋病防控工作的重要组成部分。我国HIV抗体检测网络主要由各级各类医疗、疾病预防控制、检验检疫、采供血及卫生保健等机构组成。近几年，因临床主动检测工作的顺利开展，医疗及卫生保健机构在阳性检出中所占比例越来越大。然而，由于大部分医疗、采供血及卫生保健等机构未进行实验室计量认证评审工作，对人员的检测操作、实验室的环境条件、检测试剂批间差异以及检测设备灵敏度等缺乏有效的控制手段，是造成基层筛查实验室检测结果复核率偏低的主要因素。因此，建立一整套严谨高效的HIV实验室的质量管理体系，使整个检测过程从样品接收到检测结果报出的人、机、料、法、环各方面均处于可控制状态并形成可操作的长效机制，同时通过参加实验室间比对，对实验室检测的组织、实施进行评价，是保证实验室检测结果质量的有效手段和措施。
一、建立质量管理的文件体系
HIV筛查实验室质量管理的文件体系，应由SOP、规章制度和质量记录三种类型的文件组成，内容涵盖实验室人员、设备、样品和检测试剂、方法、操作环境及检测过程六个方面，从样品的接收、唯一性编号登记到检测结果报出，对检测全过程的每一环节进行可操作控制。其中，规章制度及SOP至少应包括：（1）样品的接收、暂存及处理；（2）检测方法及结果解释与报告；（3）试剂接收、使用和保存；（4）仪器的使用、维护和清理；（5）检测结果的质量保证；（6）实验室生物安全及防护；（7）实验室数据、相关文件记录与保存；（8）待检样品唯一编码制度；（9）检测结果的保密制度；（10）检毕样品及废弃物处理规定；仪器设备检定制度等项内容。质量记录应至少包括：（11）对样品的编号、检测时间、检测者及结果的记录；（12）对检测设备的使用、维护及检定记录；（13）对人员培训的记录；（14）因检测方法的变更、废止而产生的记录等方面的内容。
二、人员的选择、宣贯与培训
人，是检测环节中的决定因素，所有的制度、SOP及质量记录，均需实验操作人员在检测过程中遵守和填写。3名以上（医技）人员，技术负责人有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，中级以上职称人员数至少1名是建立HIV筛查实验室的必备条件。岗前和持续培训的内容，除检测技术、实验室生物安全外，制度的宣贯、SOP的学习及质量记录填写的及时、准确也同样是必不可少的。
三、设备及实验室环境保障
1、设定专人，依据质量管理体系文件中的相关规定，向专业部门申报、实施对国家标准中列入强制检定的设备以及涉及检测数据完整、真实性的设备进行定期的、有计划地专业检定、校准，是HIV筛查实验室检测结果真实有效的重要保障。
2、每次检测完毕及外送检定校准前，操作人员依据相应的SOP，使用70%的酒精，对检测设备、工作台面及操作环境进行清理消毒，是避免检测环节样品污染导致检测数据失真以及可能的职业暴露的重要措施。
3、环境条件的记录与控制：实验室必须安装恒温设施，并于每次检测前、中、后，对检测环境进行实时监测、记录，保证符合检测所用试剂要求，确保检测数据无因环境温度影响而产生偏离。
四、样品、检测试剂的管理及实验室生物安全
1、所有样品需首先进行样品量、是否溶血等合格性检查，确保进入检测环节样品质量。必须依照一个固定的格式对进入检测环节的样品进行序号登记，并保证每一编号直至样品销毁的持续使用和唯一性。
2、实验室应设立专门的、适宜的样品存放处，不仅要保证适应检测样品单独放置，检前与检毕样品分开放置，还要考虑适应阳性样品上送复检前的暂存。
3、实验室的筛查试剂必须选用经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内、经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。
4、保持基本的警惕性是保证实验室生物安全、防止职业HIV感染的最有效的可行的方法,这要求对所有血液和体液标本,不论其来源如何,都将其视作有潜在HIV感染危险,严格按照规范的要求操作。①按实验室分区制度，将感染性操作尽量限制并隔离在污染区内。实验操作全过程应穿隔离服,带双层防护手套，必要时应该戴口罩和防护镜，且不得将防护装备穿出实验室外。②实验室所有垃圾（用过的手套、废纸、吸头、96孔板等）、废液（洗液）、器材（吸管、试管、瓶塞、离心管等）和工作服应消毒处理后再分别焚烧、倒掉。③所有从事HIV检验人员应在上岗之前和工作后定期检测HIV抗体，并保留本底血清。发生事故接触后应立即检测HIV抗体,并随防至少一年。有明确阳性暴露史的需及时服用抗病毒药物预防感染。
五、实验室内部质控及实验室间比对
检测质量控制是检测结果可行与否的关键保障。一般情况下，将质控分为内部质控和实验室间比对两个方面，而内部质控又分为试剂盒对照和外部质控品对照。
内部对照质控血清指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内对照质量控制是质量控制的基础，每次检测必须严格按照试剂盒说明书设立，而且不同批号的内对照质控血清不能交叉使用。
外部对照质控品的作用为了监控检测的重复性和稳定性以及试剂盒批间和孔间差异，而由实验室设置一套对照血清，也可以只设一个弱阳性对照，以该试剂盒临界值(cutoff值)的2～3倍为宜。
外部对照质控血清可用HIV抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体阳性血清标定后得到。一般按一年使用量配置，用0.2μm滤膜过滤除菌，按实验室一周用量分装、分类、标记；-20℃冻存于非自动除霜冰箱中；外部对照血清不可反复冻融，一旦融化后应存放于2～8℃，供一周内使用。质控物的管间差异必须小于监测系统预期变异（cv＜20％），每次实验都要按试剂盒要求使用内部对照质控血清和外部对照质控血清及空白孔，严格按SOP进行检测过程。及时准确填写实验原始记录并请相关人员及时现场复核签字。
外部质控品对照是以绘制质控图并正确判断检测状态为最终目的。同一批次的试剂与质控血清前20次用“即刻法”进行统计，20次后以S/CO值作纵坐标(Y轴)，每一次试验作横坐标(X轴)，绘制质控图。其质控规则为：当阴性质控样本为阳性时,不管阳性率测定比值如何，均为失控，所有阳性标本须重新测定，并增加1倍阴性质控样本。如果阴性质控样本为阴性，某次测定阳性比值超出+2s，则为失控。本次结果阴性结果根据阳性质控样本的情况，决定是否可以发出，所有阳性样本结果不能发出，需查找出现阳性率增高的原因，并在增加1倍阴性质控样本的情况下重新检测。
实验室外部的质量控制主要依靠参加实验室之间的室间比对和参与国家及省、市疾控中心发放的各种盲样考核。室间质量控制是检验实验室对未知样品获得正确结果的能力，是在统一盲样、实验试剂、实验方法的条件下客观公正地比较实验室之间测定结果的差异。因此在日常工作中注意质量控制体系的建设，定期分析质控图，对失控情况必须查明原因，找出解决的方法，并加以纠正，防止将来出现同样的问题。
参考文献
[1]中国疾病预防控制中心全国艾滋病检测技术规范(2009年修订版)[S].2009:50.