抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素原核表达载体的构建及其对虫体的杀灭作用

抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素原核表达载体的构建及其对虫体的杀灭作用

论文摘要

隐孢子虫病是一种以腹泻为主要症状的人畜共患寄生虫病。该病危害很大,但至今尚无特效治疗药物。导向药物的发展为治疗提供了新方法。隐孢子虫的表膜具有稳定的抗原表型,在哺乳动物宿主体内的生活周期都有细胞外时期,可以用特异性抗体与细胞毒剂的结合物即免疫毒素来攻击它们,达到治疗目的。本研究以含抗隐孢子虫ScFv-PE40 重组毒素的菌株为模板,利用设计合成的一对引物扩增出ScFv-PE40 片段,将目的片段及原核表达载体PMAL经双酶切后,进行连接、转化、筛选及鉴定,得到阳性重组子,测序后读框正确。构建的重组毒素在大肠杆菌中得到高效表达,表达量占菌体蛋白总量的21%,免疫印迹表明所表达的蛋白是特异的。将表达后的重组毒素纯化后治疗感染隐孢子虫的小鼠,结果治疗组比对照组肠滞留物中卵囊计数(P<0.05)与肠道平均累积感染积分明显减少(P<0.01),病理组织学切片表明重组毒素对隐孢子虫具有明显的杀灭作用。本研究试验方法与结果为隐孢子虫病的治疗提供了实验依据和理论基础。

论文目录

  • 引言
  • 第一章 隐孢子虫病的治疗研究进展
  • 1 化学合成药物
  • 2 免疫治疗
  • 3 中草药治疗
  • 第二章 抗隐孢子虫ScFv-PE 重组毒素原核表达载体的构建
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 第三章 抗隐孢子虫重组毒素ScFv-PE 在大肠杆菌中的表达
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 第四章 抗隐孢子虫ScFv-PE 重组毒素对隐孢子虫病治疗效果观察
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 英文缩写词表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 致谢
  • 导师及作者简介
  • 相关论文文献

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