人参皂苷降解及其产物化学成分的研究

论文摘要

为制备抗癌活性成分20（S）-原人参二醇和20（S）-人参皂苷Rh2,选择二醇组皂苷含量较多的西洋参叶作为提取的原材料,建立了采用AB-8型极性大孔吸附树脂的方法提取西洋参叶中总人参皂苷的最佳提取条件。按此提取条件,二醇组人参皂苷和总人参皂苷的提取率均较高。分别利用强酸（HCl）、弱酸（HAc）、强碱（NaOH）水溶液和强碱（NaOH）甘油溶液对西洋参叶总人参皂苷进行降解,确定了各方法的最佳降解条件。其中利用盐酸、醋酸及氢氧化钠水溶液降解均能得到少量的20（S）-人参皂苷Rh2和20（S）-原人参二醇,但它们的转化率都远低于强碱甘油溶液。通过正交试验,最终确立了NaOH甘油溶液的最佳降解条件。利用色谱及重结晶等方法,从两种条件[制备20（S）-原人参二醇和20（S）-人参皂苷Rh2最佳条件]下氢氧化钠甘油溶液降解物中分离到10种化合物,经1H-NMR、13C-NMR、MS、UV、IR等方法鉴定了它们的结构分别为20（S）-人参皂苷Rg3、20（S）-人参皂苷Rh1、20（S）-人参皂苷Rh2、20（S）-人参皂苷Rh3、20（S）-原人参二醇、25-烯-20（S）-原人参二醇、20（S）-原人参三醇、20（S）,24（R）-原人参三醇环氧化物、20（S）-24-甲基-23-烯-24-羰基-原人参二醇和25-羟基-23-烯-20（S）-原人参二醇。其中25-烯-20（S）-原人参二醇、20（S）-24-甲基-23-烯-24-羰基-原人参二醇和25-羟基-23-烯-20（S）-原人参二醇为首次从人参皂苷碱降解物中得到的化合物,而20（S）-24-甲基-23-烯-24-羰基-原人参二醇和25-羟基-23-烯-20（S）-原人参二醇是未见报道过的新化合物。此外分别从盐酸溶液和醋酸溶液降解物中各鉴定了1种化合物,分别为2（0R）原人参二醇和20（R）-

论文目录

• 第一章 绪言
• 1.1 人参
• 1.2 人参属植物的分类及分布
• 1.2.1 三七
• 1.2.2 西洋参
• 1.2.3 人参
• 1.2.4 假人参
• 1.2.5 姜状三七
• 1.2.6 竹节参
• 1.2.6.1 狭叶竹节参
• 1.2.6.2 珠子参
• 1.2.7 屏边三七
• 1.2.8 三小叶参
• 1.3 人参皂苷
• 1.3.1 人参皂苷的分类
• 1.3.1.1 原人参二醇型皂苷
• 1.3.1.2 原人参三醇型皂苷
• 1.3.1.3 齐墩果酸性皂苷
• 1.3.1.4 其它人参皂苷
• 1.3.2 不同种类人参中人参皂苷的含量分布
• 1.3.3 人参皂苷的化学结构
• 1.4 人参皂苷的提取和分离技术
• 1.4.1 人参总皂苷的提取方法
• 1.4.1.1 一般提取方法
• 1.4.1.2 大孔吸附树脂法
• 1.4.2 单一人参皂苷的分离和纯化方法
• 1.4.2.1 柱色谱法
• 1.4.2.2 其它分离方法
• 1.4.3 次级人参皂苷及苷元的制备与分离方法
• 1.4.3.1 酸降解法
• 1.4.3.2 酶微生物降解法
• 1.4.3.3 碱降解法
• 1.5 人参皂苷的测定
• 1.5.1 比色法
• 1.5.2 薄层及薄层扫描法
• 1.5.3 紫外分光光度法
• 1.5.4 高效液相色谱法
• 1.5.4.1 HPLC-UV 法
• 1.5.4.2 HPLC-ELSD 法
• 1.5.4.3 HPLC-MS 法
• 1.5.5 其它方法
• 1.6 人参皂苷的药理活性
• 1.6.1 抗肿瘤活性
• 1.6.1.1 人参总皂苷的抗肿瘤作用
• 1.6.1.2 人参皂苷及次级人参皂苷的抗肿瘤作用
• 1.6.1.3 人参皂苷元的抗肿瘤作用
• 1.6.2 人参皂苷的其它药理作用
• 1.7 人参皂苷的代谢
• 1.7.1 人参皂苷的体外代谢
• 1.7.2 人参皂苷的体内代谢
• 1.7.2.1 二醇组人参皂苷的体内代谢
• 1.7.2.2 三醇组人参皂苷的体内代谢
• 1.8 本文研究的意义及主要内容
• 1.9 参考文献
• 第二章 人参皂苷的提取和测定
• 2.1 前言
• 2.2 人参皂苷的测定
• 2.2.1 实验部分
• 2.2.1.1 仪器和设备
• 2.2.1.2 试剂和材料
• 2.2.1.3 实验方法
• 2.2.2 结果与讨论
• 2.2.2.1 西洋参叶皂苷色谱图
• 2.2.2.2 人参皂苷的测定
• 2.3 人参皂苷的提取
• 2.3.1 实验部分
• 2.3.1.1 仪器和设备
• 2.3.1.2 试剂和材料
• 2.3.1.3 实验方法
• 2.3.2 结果与讨论
• 2.3.2.1 AB-8 吸附树脂容量
• 2.3.2.2 水提液流速
• 2.3.2.3 提取水量、次数和时间、洗脱液乙醇浓度和吸附温度
• 2.2.2.4 乙醇洗脱剂用量
• 2.2.2.5 人参总皂苷提取率
• 2.4 结论
• 2.5 参考文献
• 第三章 人参皂苷的降解
• 3.1 前言
• 3.2 弱酸水溶液降解
• 3.2.1 实验部分
• 3.2.1.1 仪器和设备
• 3.2.1.2 试剂和材料
• 3.2.1.3 实验方法
• 3.2.2 结果与讨论
• 3.2.2.1 人参皂苷降解产率的理论计算
• 3.2.2.2 HAc 浓度的影响
• 3.2.2.3 降解时间的影响
• 3.2.2.4 降解温度的影响
• 3.3 强酸水解的影响
• 3.3.1 实验部分
• 3.3.1.1 仪器和设备
• 3.3.1.2 试剂和材料
• 3.3.1.3 实验方法
• 3.3.2 结果与讨论
• 3.3.2.1 盐酸浓度的影响
• 3.3.2.2 降解时间的影响
• 3.3.2.3 降解温度的影响
• 3.4 强碱水溶液降解
• 3.4.1 实验部分
• 3.4.1.1 仪器和设备
• 3.4.1.2 试剂和材料
• 3.4.1.3 实验方法
• 3.4.2 结果与讨论
• 3.4.2.1 降解温度的影响
• 3.4.2.2 NaOH 浓度的影响
• 3.4.2.3 降解时间的影响
• 3.5 强碱高沸点有机溶剂降解
• 3.5.1 实验部分
• 3.5.1.1 仪器和设备
• 3.5.1.2 试剂和材料
• 3.5.1.3 实验方法
• 3.5.2 结果与讨论
• 3.5.2.1 降解温度的影响
• 3.5.2.2 NaOH 浓度的影响
• 3.5.2.3 降解时间的影响
• 3.6 正交实验确定最佳降解条件
• 3.6.1 实验部分
• 3.6.1.1 仪器和设备
• 3.6.1.2 试剂和材料
• 3.6.1.3 实验方法
• 3.6.2 结果与讨论
• 3.6.2.1 制备20（S）-人参皂苷Rh2
• 3.5.2.2 制备20（S）-原人参二醇
• 3.5.2.3 最佳降解条件验证
• 3.7 结论
• 3.8 参考文献
• 第四章 人参皂苷降解物化学成分分离与结构分析
• 4.1 前言
• 4.2 人参皂苷降解物化学成分分离
• 4.2.1 实验部分
• 4.2.1.1 仪器和设备
• 4.2.1.2 试剂和材料
• 4.2.1.3 实验方法
• 4.2.2 结果与讨论
• 4.2.2.1 降解物Ⅰ中主要成分分离
• 4.2.2.2 降解物Ⅱ中主要成分分离结果及纯度检验
• 4.3 人参皂苷碱降解物化学成分结构分析
• 4.3.1 实验部分
• 4.3.1.1 仪器和设备
• 4.3.1.2 试剂和材料
• 4.3.1.3 实验方法
• 4.3.2 结果与讨论
• 4.3.2.1 化合物IG 的结构分析
• 4.3.2.2 化合物IE 的结构分析
• 4.3.2.3 化合物IF 的结构分析
• 4.3.2.4 化合物IIA 的结构分析
• 4.3.2.5 化合物IIB 的结构分析
• 4.3.2.6 化合物IIC 的结构分析
• 4.3.2.7 化合物IID 的结构分析
• 4.3.2.8 化合物IIE 的结构分析
• 4.3.2.9 化合物IIF 的结构分析
• 4.3.2.10 碱降解机理分析
• 4.4 人参皂苷盐酸降解物化学成分分离与结构分析
• 4.4.1 实验部分
• 4.4.1.1 仪器和设备
• 4.4.1.2 试剂和材料
• 4.4.1.3 实验方法
• 4.4.2 结果与讨论
• 4.4.2.1 化合物纯度检验
• 4.4.2.2 化合物III 的结构分析
• 4.4.2.3 盐酸降解机理分析
• 4.5 人参皂苷盐酸降解物化学成分分离与结构分析
• 4.5.1 实验部分
• 4.5.1.1 仪器和设备
• 4.5.1.2 试剂和材料
• 4.5.1.3 实验方法
• 4.5.2 结果与讨论
• 4.5.2.1 化合物的纯度检验
• 4.5.2.2 化合物IV 的结构分析
• 4.5.2.3 醋酸降解机理分析
• 4.6 结论
• 4.7 参考文献
• 第五章 人参皂苷主要降解产物的定量分析
• 5.1 前言
• 5.2 20（S）-人参皂苷Rh2 和20（S）-原人参二醇的纯化
• 5.2.1 实验部分
• 5.2.1.1 仪器和设备
• 5.2.1.2 试剂和材料
• 5.2.1.3 实验方法
• 5.2.2 结果与讨论
• 5.2.2.1 20（S）-人参皂苷Rh2 的纯化结果
• 5.2.2.2 20（S）-原人参二醇的纯化结果
• 5.3 20（S）-人参皂苷Rh2 的测定
• 5.3.1 实验方法
• 5.3.2 结果与讨论
• 5.3.2.1 最大吸收波长的选择
• 5.3.2.2 流动相的选择
• 5.3.2.3 检测限
• 5.3.2.4 线性关系
• 5.3.2.5 精密度
• 5.3.2.6 重现性
• 5.3.2.7 稳定性
• 5.3.2.8 回收率
• 5.3.2.9 20（S）-人参皂苷Rh2 晶体的测定结果
• 5.4 20（S）-原人参二醇的测定
• 5.4.1 实验方法
• 5.4.2 结果与讨论
• 5.4.2.1 最大吸收波长的选择
• 5.4.2.2 流动相的选择
• 5.4.2.3 检测限
• 5.4.2.4 线性关系
• 5.4.2.5 精密度
• 5.4.2.6 重现性
• 5.4.2.7 稳定性
• 5.4.2.8 回收率
• 5.4.2.9 20（S）-原人参二醇晶体的测定结果
• 5.5 人参皂苷将降解物中20（S）-人参皂苷Rh2 和20（S）-原人参二醇的含量测定
• 5.5.1 实验部分
• 5.5.1.1 仪器和设备
• 5.5.1.2 试剂和材料
• 5.5.1.3 实验方法
• 5.5.2 结果与讨论
• 5.5.2.1 降解物I 中20（S）-人参皂苷Rh2 的测定
• 5.5.2.2 降解物II 中20（S）-原人参二醇的测定
• 5.6 结论
• 5.7 参考文献
• 第六章 人参皂苷主要降解物的抗肿瘤作用
• 6.1 前言
• 6.2 20（S）-原人参二醇的体内抗肿瘤作用研究
• 6.2.1 实验部分
• 6.2.1.1 试剂和药物
• 6.2.1.2 实验动物
• 6.2.1.3 细胞株
• 6.2.1.4 实验方法
• 6.2.2 结果与讨论
• 6.2.2.1 20（S）-原人参二醇对小鼠肝癌H22 的生长抑制作用
• 6.2.2.2 20（S）-原人参二醇对小鼠Lewis 肺癌的生长抑制作用
• 6.2.2.3 20（S）-原人参二醇对小鼠黑色素瘤816 的生长抑制作用
• 6.3 20（S）-人参皂苷Rh2 的体外抗小鼠胃癌Hep-A22 细胞作用
• 6.3.1 实验部分
• 6.3.1.1 试剂和药物
• 6.3.1.2 细胞株
• 6.3.1.3 实验方法
• 6.3.2 结果与讨论
• 6.3.2.1 20（S）-人参皂苷 Rh2 降低 Hep-A-22 细胞存活率的剂量效应关
• 6.3.2.2 20（S）-人参皂苷 Rh2 诱发 Hep-A-22 细胞凋亡
• 6.3.2.3 20（S）-人参皂苷 Rh2 在 Hep-A-22 细胞质中调节 Bax 表达
• 6.4 结论
• 6.5 参考文献
• 作者简历
• 攻读博士论文期间发表的论文
• 攻读博士论文期间承担和参加的科研课题
• 攻读博士论文期间专利发表情况
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