论文摘要
前言2型糖尿病（T2DM）是一种常见的多基因复杂性疾病,其发病的2个主旋律是胰岛素分泌缺陷和胰岛素抵抗。Deeb等首次报道了Pro 12 Ala基因多态性与T2DM的相关性,发现糖耐量正常人群中A等位基因突变率为9.3%,糖耐量降低者为4%,而T2DM人群中仅为2.2%。也有学者发现,Pro12Ala多态性与T2DM发病危险性增加有关,A等位基因可能可以预示IGT向T2DM的发展。但是,Stefanski及印尼爪哇人群和中国人群研究认为,Pro12Ala多态性与T2DM没有关联。胰岛素抵抗是T2DM患者的常见特征,它可以预测糖尿病的发病。T2DM患者骨骼肌胰岛素抵抗的特征包括胰岛素介导的葡萄糖摄取和利用不充分及脂肪氧化抑制效应减弱,需要机体分泌较多的胰岛素方能代偿此种缺陷。在大量研究中,值得关注的是非糖尿病者携带A基因者有更强的胰岛素敏感性。随机选取非糖尿病人群检测其胰岛素分泌和敏感性,携带P等位基因和携带A等位基因的两组人群中胰岛素分泌的各阶段没有明显不同,但后组的胰岛素敏感性明显增加。所以推断A等位基因减少糖尿病的发生与增加胰岛素敏感性有关。脂质代谢紊乱是动脉粥样硬化的重要危险因素。近年来研究表明PPARγ在调节体内脂质代谢和能量平衡中具有重要作用。PPARγ激活可以促进白色脂肪细胞分化,增加小脂肪细胞的数量而减少大脂肪细胞的数量。小脂肪细胞对胰岛素的反应性更强,有利于促进葡萄糖摄取。PPARγ在前脂肪细胞中的激活可以增加胰岛素及胰岛素样生长因子（IGF-1）刺激的脂肪细胞分化过程,增加一些脂肪组织特异性的基因表达。脂肪细胞分裂期间PPARγ诱导多种与脂肪酸代谢相关的基因表达,如脂酰辅酶A合成酶、脂蛋白脂酶（LPL）和脂肪酸转运蛋白等。Pro 12 Ala突变使LPL活性降低影响TG清除,在肥胖个体中尤为突出。可能是因为肥胖者脂肪细胞数目增多及体积增大,含有较多异构体的脂肪组织,所以突变对血脂的影响仅在肥胖状态下显现,表现为TG增高,高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）降低。对于非肥胖的健康人群来讲,多项研究认为Pro12Ala与脂肪代谢异常有关,Meirhaeghe等报道,携带A等位基因者血总胆固醇（TC）升高,LDL-C升高。有学者研究认为A等位基因者血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯增高。上述结果可能与Pro12Ala突变下调PPARγ2的转录活性有关。Montagnana M等研究认为携带A等位基因者甘油三酯降低。最近RadhaV,及国内研究认为Pro 12 Ala多态性与血脂没有相关性。并且有研究认为,Pro 12 Ala突变对血脂影响与性别也有关系。PPARγ2基因Pro 12 Ala多态性是目前研究的热点,其对2型糖尿病、胰岛素抵抗、脂质代谢、肥胖及其他许多疾病具有重要的作用。本研究通过在辽宁地区对汉族人正常人群和2型糖尿病人群的基因检测来探讨该基因在其中的表达及对2型糖尿病患者脂代谢水平的影响,为2型糖尿病的治疗提供有力依据。方法一、实验对象及分组（一）实验分组1、实验组331例,按WH01999年2型糖尿病诊断标准,随机选取临床诊断为2型糖尿病的住院患者（男178例,女153例）。其中排除标准：用过调脂药物；酗酒史和（或）嗜烟者；冠心病（CHD）、高血压、脑血管病、肾脏疾病及外周血管病变；糖尿病及高血压家族史；用过降糖药物或使用过胰岛素按下列条件分为亚组（1）将所有2型糖尿病患者分为PPARγ2基因Pro 12 Ala突变组和非突变组（2）按体重指数肥胖组（BMI>25kg、m2）和非肥胖组（BMI<25kg、m2）分层后每层再分为PPARγ2基因Pro 12 Ala突变组和非突变组（3）按性分层后每层再分为PPARγ2基因Pro12Ala突变组和非突变组2、对照组254例（男133例,女121例）来自健康体检者,排除：糖尿病；冠心病；高血压：脑血管病；糖尿病及高血压家族史。二、各项指标检测1、采用多聚酶链式反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测不同组别PPARγ2基因Pro12Ala多态性2、应用全自动生化分析仪测定血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、空腹血糖,放免法测定空腹胰岛素水平3、身高、体重由专人测量并计算体重指数（BMI）=体质量[kg/身高（m）2]；按HOMA模型计算胰岛素抵抗指标（HOMA-IR）=[FIN（mU/L）×FPG（mmol/L）/22.5].三、统计学处理直接判读样本基因型并计算组内基因型及等位基因型频率,统计学处理使用SPSS17.0软件完成,分析各组患者基因型频率是否符合Hardy-Weinberg平衡来估测样本的代表性。计数资料间的比较用x2检验,计量资料间的比较用t检验,组间计量资料均以均数±标准差（x±s）表示,P<0.05为差别有统计学意义。结果1、PPARγ2基因Pro/Pro、Pro/Ala及Ala/Ala基因型频率分别为0.949、0.051及0，等位基因Pro、Ala的频率分别为0.974、0.026。实验组与对照组、实验组中肥胖亚组和非肥胖亚组、验组中女性亚组和男性亚组间基因频率机等位基因频率分布均无明显差异（p>0.05）。2、实验组与对照组临床资料比较：实验组FPG、HOMA-IR高于对照组,HDL-C低于对照组,差异具有统计学意义（p<0.05）。3、在对照组中PPARγ2基因Pro12Ala突变组的FPG低于非突变组,差异具有统计学意义（p<0.05）。BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、HDL-C、TG、TC、LDL-C等均无统计学意义。4、在实验组中（1）所有患者中PPARγ2基因Pro12Ala突变组和非突变组间TC和LDL-C差异具有统计学意义（p<0.05）,腰围、腰臀比、BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG和HDL-C差异无统计学意义（p>0.05）。（2）按体重指数分层后肥胖患者中PPARy2基因Pro 12 Ala突变组和非突变组间TG、TC和LDL-C差异具有统计学意义（p<0.05）,非肥胖组中PPARy2基因Pro12Ala突变组和非突变组间各指标差异均无统计学意义（p>0.05）。（3）按性别分层后两组间PPARγ2基因Pro12Ala突变率差异无统计学意义,各层中PPARγ2基因Pro12Ala突变组和非突变组间各脂代谢指标均无统计学意义（p>0.05）。结论1、PPARγ2基因Pro12Ala多态性与2型糖尿病得发生无明显相关性,但Pro12Ala变异者有较低的空腹血糖水平。2、PPARγ2基因Pro12Ala多态性对2型糖尿病脂代谢各指标存在影响且在肥胖个体中更为显著。3、PPARγ2基因Pro12Ala多态性对脂代谢各指标的影响在性别间没有统计学差异。