漏斗形杯伞发酵物化学成分及抑菌活性研究

漏斗形杯伞发酵物化学成分及抑菌活性研究

论文摘要

高等真菌中含有丰富的活性物质,以其液体发酵物为资源寻找能开发成药品或农药的新的生物活性物质,已成为研究热点。漏斗形杯伞[Clitocybe infundibuliformis (Schaeff.ex Fr.)Quél.],是伞菌目,口蘑科,杯蕈属真菌,本论文以其液体发酵产物——菌丝体和发酵液为研究对象,对其进行生物活性检测,并采用现代分离技术手段对活性部位的化学成分进行分离纯化研究,主要得出以下结论:1.对发酵物各部分进行抗细菌作用试验,结果表明:发酵液和菌丝的乙酸乙酯提取物对细菌的抑制作用明显优于正丁醇提取物。发酵液乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌和北京棒状杆菌的抑制作用很显著;菌丝乙酸乙酯提取物对马铃薯芽孢杆菌表现出很强的抑制作用。2.测定发酵物各部分对细菌的最小抑制浓度,结果发现发酵液乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)均为0.79 mg/mL;而菌丝乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、和蜡状芽胞杆菌的最小抑制浓度也达到0.79 mg/mL;发酵液正丁醇萃取物对巨大芽孢杆菌和大肠杆菌的最小抑制浓度为1.57 mg/mL;菌丝正丁醇萃取物对巨大芽孢杆菌的最小抑制浓度为1.57 mg/mL。3.测定发酵物各部分对病原菌的抑制作用,结果发现随着各样品浓度的增加,其对各种植物病原菌的抑制作用显著加强。发酵液乙酸乙酯萃取物对参试的五种植物病原菌均有不同程度的抑制效果,其浓度为6.25mg/mL时对小麦赤霉病菌的抑菌率为97.46%,对棉花枯萎病菌的抑菌率为93.96%;菌丝正丁醇萃取物浓度为6.25 mg/mL时对白菜黑斑病菌和小麦赤霉病菌的抑菌率分别达到93.93%和96.45%。4.对菌丝体的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,得到四个单体化合物,确定化合物I为4, 6, 8 (14), 22 (23)-四烯-3-酮-麦角甾烷(4,6,8(14),22(23)-tetraen-3-one-ergostane),化合物II为麦角甾醇过氧化物5α,8-epidioxy-22E,24R-ergosta-6,22-dien-3β-ol。确定化合物III为alternariol monomethyl ether(3,7-dihydroxy-9-methoxy-1-methyl-6H-benzo[c] chromen-6- one ),化合物IV鉴定为alternariol ( 3,4’,5-trihydroxy-6’- methyldibenzo-α-pyrone)。对发酵液的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化得到化合物V和化合物VI,由于量少未做图谱鉴定。化合物III与化合物IV为首次在高等真菌中发现。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 高等真菌代谢产物研究进展
  • 1.1.1 高等真菌液体发酵培养的研究概况
  • 1.1.2 高等真菌化学成分的研究进展
  • 1.1.3 高等真菌代谢物的活性研究概况
  • 1.2 口蘑科杯蕈属真菌的研究概况
  • 1.2.1 口蘑科真菌简介
  • 1.2.2 杯蕈属真菌的国内外研究现状
  • 1.3 漏斗形杯伞的研究概况
  • 1.3.1 漏斗形杯伞的特性及分布
  • 1.3.2 漏斗形杯伞国内外研究现状
  • 1.4 研究的依据及思路
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 实验材料和仪器
  • 2.1.1 试验材料
  • 2.1.2 供试菌株
  • 2.1.3 试剂
  • 2.1.4 仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 漏斗形杯伞的培养基及培养条件的初步筛选
  • 2.2.2 菌种的培养
  • 2.2.3 漏斗形杯伞发酵物的提取分离
  • 2.2.4 漏斗形杯伞发酵物生物活性的测定
  • 第三章 结果与分析
  • 3.1 漏斗形杯伞的培养基和培养条件
  • 3.2 漏斗形杯伞发酵物的提取分离
  • 3.3 漏斗形杯伞发酵物生物活性的测定
  • 3.3.1 漏斗形杯伞发酵提取物对细菌的抑制作用
  • 3.3.2 漏斗形杯伞发酵提取物对植物病原菌的抑制作用
  • 3.4 发酵物化学成分的分离纯化
  • 3.5 化合物纯度检测
  • 3.6 化合物的结构解析
  • 3.6.1 化合物I
  • 3.6.2 化合物II
  • 3.6.3 化合物III
  • 3.6.4 化合物IV
  • 3.6.5 化合物V 与化合物VI
  • 第四章 讨论
  • 4.1 菌种的培养与发酵
  • 4.2 抑菌活性的测定
  • 4.3 化合物的分离纯化
  • 4.4 化合物的结构鉴定
  • 4.5 真菌液体发酵研究的展望
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 作者简介
  • 相关论文文献

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