论文摘要
目的:初步探讨癌基因Bmi-1的siRNA调控效应及下游靶基因。方法:针对Bmi-1 mRNA编码区设计3条siRNA,采用体外化学合成Bmi-1 siRNA,经LipofectamineTM2000脂质体分别转染具有完整Bmi-1-INK4a基因调控通路的K562细胞和缺失INK4a基因的A549细胞,荧光显微镜观察检测转染效率,MTT法检测Bmi-1 siRNA转染后2种细胞的增殖情况,计算有效Bmi-1 siRNA作用下2种细胞的IC50,流式细胞仪检测细胞周期分布,RT-PCR半定量检测Bmi-1 mRNA表达,Western Blot检测Bmi-1、P16和hTERT蛋白表达。结果:（1）转染6h后,荧光检测提示2种细胞中转染效率高达85%;（2）在设计的3条siRNA中,仅Bmi-1 siRNA1对2种细胞增殖的抑制作用呈较好的浓度依赖性,但无细胞特异性;（3） Bmi-1 siRNA1作用于A549和K562细胞的IC50分别为83.69 nmol/l和87.69 nmol/l;（4）转染Bmi-1 siRNA1后K562细胞中G1期比例明显增加而A549细胞中G1期比例变化不明显;（5）转染Bmi-1 siRNA1后2种细胞倍增时间均显著延长;（6）转染24h时,A549和K562细胞中Bmi-1 mRNA表达明显减弱,抑制效率分别为53.88%和58.94%;（7）转染48h时,A549和K562细胞中Bmi-1蛋白表达均明显降低,抑制效率分别达到68.86%和70.24%;（8） Bmi-1 siRNA1通过上调P16蛋白表达抑制K562细胞体外增殖;（9）在A549细胞中Bmi-1 siRNA1可下调hTERT蛋白表达。结论:（1） LipofectamineTM2000脂质体介导Bmi-1 siRNA转染A549和K562细胞具有转染效率高、方法简便等优点;（2）Bmi-1 siRNA1能显著抑制A549和K562细胞体外增殖,但无细胞特异性;（3）Bmi-1 siRNA1可有效抑制A549和K562细胞中Bmi-1基因表达;（4）Bmi-1 siRNA1显著阻滞K562细胞周期进程而在A549细胞中不明显;（5）在K562细胞中存在Bmi-1-INK4a基因调控通路;（6）在缺失INK4a基因的A549细胞中可能存在Bmi-1-hTERT基因调控通路。
论文目录
相关论文文献
- [1].Bmi-1及E-钙黏蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义[J]. 癌症进展 2020(02)
- [2].BMI-1在胆囊癌中的表达情况及其机制研究[J]. 世界复合医学 2020(07)
- [3].Bmi-1在乳腺癌组织中的表达及临床意义[J]. 临床医药文献电子杂志 2017(24)
- [4].多梳基因Bmi-1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义[J]. 浙江医学 2015(04)
- [5].沉默Bmi-1基因表达对乳腺癌干细胞生物学特性的影响研究[J]. 社区医学杂志 2014(20)
- [6].胃癌组织中Bmi-1表达与胃癌分化、转移及临床预后的关系[J]. 现代消化及介入诊疗 2015(03)
- [7].Bmi-1在结直肠癌中的表达及其意义[J]. 临床医学 2014(05)
- [8].Bmi-1基因表达与浸润性乳腺导管癌临床病理特征的关系[J]. 国际检验医学杂志 2014(15)
- [9].Bmi-1在胆管细胞癌中的表达及统计分析[J]. 数理医药学杂志 2013(01)
- [10].宫颈鳞状细胞癌组织中Bmi-1的表达[J]. 郑州大学学报(医学版) 2013(01)
- [11].Bmi-1基因与大肠癌术后相关性研究进展[J]. 局解手术学杂志 2013(03)
- [12].乳腺癌组织中Bmi-1蛋白表达与病理学特征的相关性研究[J]. 成都医学院学报 2013(02)
- [13].多蜂房蛋白BMI-1在子宫内膜癌中的表达及意义[J]. 中国实验诊断学 2012(03)
- [14].联合培养体系中对骨髓间充质干细胞Bmi-1表达的影响[J]. 中国组织工程研究 2012(14)
- [15].Bmi-1在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义[J]. 青岛医药卫生 2012(02)
- [16].Bmi-1在子宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 局解手术学杂志 2011(04)
- [17].乳腺浸润性导管癌组织Bmi-1的表达及其临床意义[J]. 中华肿瘤防治杂志 2011(17)
- [18].Bmi-1基因在子宫内膜癌中的表达及意义[J]. 江苏医药 2011(23)
- [19].Bmi-1在舌鳞状细胞癌中的表达及其临床意义[J]. 实用口腔医学杂志 2013(05)
- [20].Bmi-1在结直肠癌中的表达及其意义[J]. 中国现代药物应用 2014(06)
- [21].Bmi-1、端粒酶在大肠癌中的研究进展[J]. 承德医学院学报 2014(03)
- [22].BMI-1基因在骨肉瘤中的表达及其临床意义[J]. 中国骨与关节外科 2013(03)
- [23].BMI-1基因和蛋白在子宫颈癌中的表达和临床意义[J]. 中国医科大学学报 2011(08)
- [24].胃癌组织中Bmi-1蛋白的表达与胃癌患者病理因素及预后的相关性[J]. 大家健康(学术版) 2016(07)
- [25].胃癌组织中Bmi-1蛋白表达与胃癌患者病理因素及预后的关系[J]. 中外医疗 2013(10)
- [26].Bmi-1在结直肠癌中的表达及其意义[J]. 中国实用医药 2013(15)
- [27].Bmi-1在非小细胞肺癌组织中的表达和意义[J]. 当代医学 2012(02)
- [28].Bmi-1蛋白过表达促进大肠癌发病过程[J]. 当代医学 2011(13)
- [29].Bmi-1、Ki-67在黑色素瘤中的表达及其意义[J]. 现代肿瘤医学 2010(10)
- [30].Bmi-1基因在结肠癌中的过度表达及其临床意义[J]. 中国老年学杂志 2008(22)
标签：小干扰论文;