论文摘要
目的：探讨血管内皮因子-C（VEGF-C）对肝门部胆管癌细胞侵袭和增殖能力的影响。方法：培养肝门部胆管癌细胞系（FRH-0201）细胞，应用不同浓度（1ng／ml、5ng／ml、10ng／ml、50ng／ml、100ng／ml）的VEGF-C刺激FRH-0201细胞，以无血清的RPMI-1640培养液为空白对照，分别培养24、48、72小时后，采用MTT法检测VEGF-C对FRH-0201细胞增殖的影响；再取浓度分别为1ng／ml、5ng／ml、50ng／ml的VEGF-C条件培养液，培养的FRH-0201细胞，制成1×106／ml的细胞悬液，应用流式细胞仪检测细胞周期；3H-TdR（5μCi／ml）标记的RPMI-1640培养液，并制备成1×105／ml浓度的细胞悬液，接种于以Matrigel和Fn包被的96孔板，设空白对照组，不同浓度的VEGF-C刺激后，分别培养60min、90min、120min，收集细胞至醋酸纤维滤纸上，烤干后置于闪烁液中，BACKMAN-L600闪烁仪测定脉冲数，测定VEGF-C对FRH-0201细胞同质黏附作用；并利用Boyden趋化小室观察上述浓度的VEGF-C对肝门部胆管癌细胞转移的影响。结果：MTT法示VEGF-C能显著提高FRH-0201的增殖活性，VEGF-C浓度在1ng／ml、5ng／ml时，细胞增值明显，超过10ng／ml时，增值作用逐渐变缓，在100ng／ml浓度范围内未出现抑制现象。VEGF-C促FRH-0201的增殖活性的效应随其剂量以及时间增加而增加，并显著抑制细胞凋亡。在Boyden小室培养的FRH-0201细胞中分别加入1ng／ml、5ng／ml、10ng／ml的VEGF-C刺激培养后，Boyden小室碳酸酯滤膜下层浸润的胆管癌细胞数均高于对照组。分别用上述浓度的VEGF-C诱导FRH-0201 60min、90min、120min后，1ng／mlVEGF-C作用于人肝门部胆管癌细胞120min后，同质粘附作用降低有显著性（P＜0.01）；5ng／ml、10ng／ml VEGF-C作用于人肝门部胆管癌细胞60、90min后，对细胞同质粘附作用降低有显著性（P＜0.05），作用120min后，同质粘附作用的降低非常显著（P＜0.01）。结论：VEGF-C可以促进胆管癌细胞增殖，抑制其凋亡，增强细胞侵袭能力，并且与降低细胞的同质粘附作用密切相关。
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标签：血管内皮生长因子论文; 胆管细胞癌论文; 增殖论文; 转移同质黏附作用论文;