板蓝根多糖对无初乳仔鼠免疫功能的影响

论文摘要

本文从中草药板蓝根中提取板蓝根多糖（RIP）,将不同浓度的RIP分别灌胃于不同组别的无初乳SD仔鼠中（0d仔鼠随机分为A-E组：初乳组,常乳组,常乳+低RIP组,常乳+中RIP组,常乳+高RIP组）,运用大体解剖学、流式细胞术、组织化学技术、免疫组化技术测定0-28d各组仔鼠免疫器官指数、外周血T细胞亚群、小肠形态发育、小肠黏膜中杯状细胞、肥大细胞、SIgA、IgG阳性细胞数量,来研究RIP对无乳仔鼠免疫器官、系统免疫和黏膜免疫功能的影响,为开发绿色、无副作用、无残留的RIP提供理论基础。结果显不：（1）RIP是非营养性多糖,对无初乳仔鼠体重的影响不明显,对无初乳仔鼠小肠重量0-21d影响不显著,28d可以显著增加无初乳仔鼠的小肠重量。（2）RIP可以增加无初乳仔鼠胸腺指数和脾脏指数。对胸腺指数和脾脏指数效果最好的RIP剂量随日龄增大而减小。胸腺指数在21d时A组与其他组差异显著（P<0.05）。脾脏指数在7d时C与其他各组之间差异显著（P<0.05）。（3）RIP可以增加无初乳仔鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量,促进CD3+CD4+T细胞发育的最佳剂量是中剂量的RIP,对CD8+T细胞早期发育效果最好的RIP剂量随日龄增大而增加。CD3+和CD4+T淋巴细胞含量7-21 d时C、D、E三组与A组差异显著（P<0.05）。CD8+T淋巴细胞在7d、21d、28d时C、D、E三组显著高于A、B组（P<0.05）。（4）RIP可以促进无初乳仔鼠小肠形态发育,增加小肠绒毛高度,降低小肠隐窝深度,增大V/C值,对小肠绒毛高度、隐窝深度、V/C值影响的最佳剂量随仔鼠日龄增加而增大（5）RIP可以增加无初乳仔鼠肠道杯状细胞的数量。各组仔鼠杯状细胞数量从十二指肠到回肠逐渐增加。RIP对小肠各段杯状细胞数量影响效果最明显的剂量随日龄增加而增大十二指肠中杯状细胞数量在7d时C组与A、B组之间差异显著（P<0.05）。空肠杯状细胞数量在7d时D组与其他组之间差异显著（P<0.05）,28d时C、D、E组与B组之间差异显著（P<0.05）。回肠杯状细胞数量分别在14d、21d时C、D组显著高于其他组（P<0.05）。（6）RIP可以增加无初乳仔鼠肠道肥大细胞的数量,十二指肠到空肠到同肠肥大细胞数量逐渐减少。RIP对小肠各段肥大细胞数量影响效果最明显的剂量随日龄增加而增大。十指肠肥大细胞数量在7d、21d、28d分别是E组,D、E组,D组高于B组（P<0.05）。仔鼠空肠肥大细胞数量在分别在7d、28d时E组数量显著高于B组（P<0.05）。回肠肥大细胞数量在14、21d时C组显著高于其他组（P<0.05）。（7）0d仔鼠小肠固有层出现零星的IgG弱阳性细胞,无SIgA阳性细胞。7-14d仔鼠小肠IgG、SIgA阳性细胞先出现在固有层腺体周围,接着绒毛固有层也有阳性细胞散在分布。21-28d时IgG、SIgA阳性细胞大量分布于固有层腺体周围和绒毛固有层。RIP可以促进无初乳仔鼠肠道黏膜IgG、SIgA阳性淋巴细胞的分泌,对小肠各段黏膜IgG、SIgA阳性淋巴细胞数量影响效果最明显的剂量随日龄增加而减小。综上所述,RIP是非营养性多糖,对仔鼠体重影响不显著,可增加仔鼠小肠重量,可以促进免疫器官发育,增加外周血中T淋巴细胞亚群数量,促进小肠形态发育,增加小肠黏膜杯状细胞、肥大细胞的数量,提高小肠黏膜IgG、SIgA阳性细胞的水平,对无初乳仔鼠具有免疫增强功能。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• 1 文献综述
• 1.1 初乳的营养物质和免疫活性物质
• 1.2 仔畜无初乳状况及解决方法
• 1.3 植物多糖的理化性质及生物学活性
• 1.4 板蓝根多糖的研究进展
• 1.4.1 板蓝根的理化性质及药理活性
• 1.4.2 板蓝根多糖的理化性质及生物学活性
• 1.5 免疫器官
• 1.6 T淋巴细胞亚群
• 1.7 黏膜免疫系统
• 1.7.1 肠道上皮细胞和肠道上皮内淋巴细胞
• 1.7.2 肠道杯状细胞
• 1.7.3 肠道肥大细胞
• 1.7.4 分泌型SIgA阳性细胞
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 材料
• 3.1.1 药物
• 3.1.2 动物
• 3.1.3 试剂
• 3.1.4 主要试剂的配制
• 3.1.5 主要仪器设备
• 3.2 方法
• 3.2.1 动物的分组与饲喂
• 3.2.2 抗凝血的采集
• 3.2.3 免疫器官的采集
• 3.2.4 小肠组织的采集
• 3.2.5 板蓝根多糖的提取和测定
• 3.2.6 T淋巴细胞亚群的检测
• 3.2.7 石蜡切片制作科序
• 3.2.8 常规HE染色
• 3.2.9 PAS染色
• 3.2.10 甲苯胺蓝染色步骤
• 3.2.11 免疫组化染色
• 3.2.12 观察与测量
• 4 结果
• 4.1 RIP对仔鼠体重和小肠重量的影响
• 4.2 RIP对免疫器官指数的影响
• 4.2.1 胸腺指数
• 4.2.2 脾脏指数
• 4.3 RIP对T淋巴细胞亚群的影响
• +T淋巴细胞'>4.3.1 CD3⁺T淋巴细胞
• +T淋巴细胞'>4.3.2 CD4⁺T淋巴细胞
• +T淋巴细胞'>4.3.3 CD8⁺T淋巴细胞
• 4.4 RIP对肠道形态学的影响
• 4.4.1 肠绒毛高度
• 4.4.2 隐窝深度
• 4.4.3 V/C值
• 4.5 RIP对杯状细胞的影响
• 4.6 RIP对肥大细胞的影响
• 4.7 RIP对肠道IgG阳性细胞的影响
• 4.8 RIP对肠道SIgA阳性细胞的影响
• 5 讨论与小结
• 5.1 RIP对无初乳仔鼠体重及肠道重量的影响
• 5.2 RIP对无初乳仔鼠免疫器官指数的影响
• 5.2.1 RIP对胸腺指数的影响
• 5.2.2 RIP对脾脏指数的影响
• 5.3 RIP对无初乳仔鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响
• 5.4 RIP对无初乳仔鼠肠道形态学的影响
• 5.5 RIP对无初乳仔鼠肠道杯状细胞的影响
• 5.6 RIP对无初乳仔鼠肠道肥大细胞的影响
• 5.7 RIP对无初乳仔鼠肠道黏膜IgG、SIgA阳性淋巴细胞的影响
• 5.8 小结
• 参考文献
• 英文摘要
• 图版