论文摘要
植物源农药因其低毒、低残留、与环境和谐、符合现代环保和人们健康的要求而越来越引起世界各国高度重视,从中草药中寻找杀菌抑菌活性物质是目前研究开发杀菌剂的重要途径之一。本论文首先采用生长速率法测定了黄连,川楝子,青蒿,雷公藤微波乙醇提取物对番茄灰霉病菌,番茄早疫病菌,桃褐腐病菌和辣椒炭疽病菌的生物活性。研究结果表明：在质量浓度为1g/ml下,黄连提取物对桃褐腐病菌的抑制率高达100.0%,对番茄灰霉的抑菌率高于65%。黄连和雷公藤提取物对番茄早疫病原菌在不同时间的抑菌率都在60%以上；川楝子,青蒿乙醇提取物对辣椒炭疽病原菌有强的抑菌效果。为了进一步研究黄连和川楝子提取物对有明显作用病原菌抑菌作用的大小,分别测定了它们对三种病菌的毒力,两种中草药提取物在0～100mg/ml范围内,随着药剂浓度的提高,对供试病菌生长的抑制作用增强,菌落扩展速度减慢,黄连对番茄灰霉有效中浓度EC50为14.09mg/ml；对桃褐腐有效中浓度仅为EC50为0.91mg/ml。川楝子对辣椒炭疽的有效中浓度为8.21mg/ml；对番茄早疫有效中浓度EC50为20.02mg/ml。通过分析,小檗碱为黄连的主要有效杀菌成分,小檗碱对四种常见植物病原菌都有不同抑菌效果,尤其对桃褐腐的杀菌效果更明显,测定小檗碱对桃褐腐病原菌的的最小抑制浓度为2.8125/6mg/ml,并且抑制桃褐腐孢子萌发。鉴于小檗碱和壳聚糖具有抗真菌活性,同时壳聚糖诱导植物产生抗病性,故用比较成熟的乳化化学交联法制备了负载小檗碱的壳聚糖微球。通过预实验,得到制备均一粒径的最佳油相为大豆油,适合的交联剂为50%的戊二醛溶液,最佳制备温度为45℃,PH值为6.8,交联时间为3h。在上述实验的基础上,通过正交实验,对多项指标进行了优化,从形态、粒径、药物包封率和载药率等指标进行了筛选,获得适宜制备工艺条件,即壳聚糖质量0.2g,小檗碱0.02g,70ml大豆油,10ml2%醋酸溶液,1.2ml50%戊二醛。在显微镜和电镜下观察,发现微球球型良好,表面光滑,平均粒径约15μm,包封率为78.98%,载药率为4.78%。FT-IR测定结果表明小檗碱与壳聚糖之间没有化学键合。持续30天的药物释放试验，小檗碱可从微球中缓慢释放80%。利用生长速率法测定了微球对4种重要植物病原真菌的抑制作用,其中对桃褐腐病菌的抑菌率100%,对番茄早疫病菌抑制率也达到65%。上述结果表明,小檗碱壳聚糖微球有望开发为防治果蔬真菌病害的缓释型杀菌剂。