冀亚路:金黄色葡萄球菌噬菌体VB-SavM-JYL01的生物学特性及其对兔坏死性肺炎实验治疗的研究论文

冀亚路:金黄色葡萄球菌噬菌体VB-SavM-JYL01的生物学特性及其对兔坏死性肺炎实验治疗的研究论文

本文主要研究内容

作者冀亚路(2019)在《金黄色葡萄球菌噬菌体VB-SavM-JYL01的生物学特性及其对兔坏死性肺炎实验治疗的研究》一文中研究指出:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种人畜共患病原菌,该菌引起的兔坏死性肺炎,常常导致兔急性呼吸窘迫,伴胸腔积液、咯血并快速致死,给兔养殖业造成巨大的经济损失。尽管一些抗生素对兔坏死性肺炎具有一定的治疗效果,但是金黄色葡萄球菌耐药菌株的出现以及抗生素药物残留问题,使得抗生素疗法受到了限制。因此,急需寻找一种既能够有效防治金黄色葡萄球菌感染引起的兔坏死性肺炎,又能在生产过程中提供无药残和安全健康的肉质品的生物治疗药物。噬菌体是一类能够感染细菌的病毒,它能够侵入细菌细胞内,特异性杀死细菌,为防控金黄色葡萄球菌感染引起的疾病提供了一种有前景的替代疗法。多项研究表明,噬菌体针对一些细菌感染具有很好的治疗效果,反映了噬菌体用于治疗的潜力。然而,目前噬菌体尚未用于预防和治疗由金黄色葡萄球菌引起的兔坏死性肺炎感染。为了研究噬菌体是否对金黄色葡萄球菌引起的兔坏死性肺炎具有治疗作用,本文进行了一系列的研究。首先,从临床获得的患有坏死性肺炎的兔肺中分离鉴定了多株金黄色葡萄球菌。药敏试验结果表明这些菌株具有多重耐药性,主要对青霉素,红霉素,氯霉素和氟喹诺酮类等抗生素具有抗性,但所有这些菌株对抗生素利奈唑胺敏感。随后,利用其中一株金黄色葡萄球菌分离株S6作为宿主菌,从污水样品中分离筛选出一株新的金黄色葡萄球菌噬菌体并将其命名为VB-Sav M-JYL01,并进一步研究了噬菌体VB-Sav M-JYL01的主要生物学特性。噬菌体VB-Sav M-JYL01在TSB固体平板上形成圆形透明噬斑,直径约为1-2 mm。透射电镜下观察噬菌体VB-Sav M-JYL01的形态,结果显示该噬菌体具有正二十面体的头部和可伸缩的尾部,表明该噬菌体属于肌尾噬菌体科。当感染复数为0.01时,噬菌体的效价达到最大值,约为9.8×109 PFU/m L。一步生长曲线测定结果显示,噬菌体VB-Sav M-JYL01的潜伏期约为20 min,爆发量约为100 PFU/cell,表明该噬菌体具有高效的裂解活性。此外,噬菌体宿主谱测定结果显示,该噬菌体有较宽的宿主谱,裂解率为75.7%(50/66)。噬菌体VB-Sav M-JYL01全基因组学研究表明,该噬菌体基因组全长141,384 bp,含有219个开放阅读框,其中未发现与细菌毒力、抗生素抗性以及溶原生成相关基因,这为该噬菌体用于治疗性研究奠定了基础。本文进一步评估了噬菌体VB-Sav M-JYL01对兔坏死性肺炎模型的治疗效果。体内实验结果显示,单次鼻内给予3×109 PFU的噬菌体VB-Sav M-JYL01可在48 h有效提高兔存活率至90%(9/10),而通过PBS或利奈唑胺治疗后的保护率分别为10%(1/10)和80%(8/10)。兔肺部菌落计数结果表明,噬菌体VB-Sav M-JYL01治疗组在感染24 h后肺部菌载量为4.18×104 CFU/g,与PBS治疗组(7.38×107 CFU/g)以及利奈唑胺治疗组(3.12×105 CFU/g)相比显著降低。此外,与PBS治疗组相比,噬菌体VB-Sav M-JYL01能够显著改善肺组织损伤程度。同时,噬菌体VB-Sav M-JYL01治疗后的兔血液及肺泡灌洗液中的总蛋白、杀白细胞素(PVL)、α-毒素(Hla)以及相关细胞因子的含量显著低于PBS处理组。以上研究结果表明,金黄色葡萄球菌噬菌体VB-Sav M-JYL01具有高裂解活性和宽宿主谱,且在体外和体内均能有效的杀死金黄色葡萄球菌,该噬菌体在治疗金黄色葡萄球菌感染以及作为防治金黄色葡萄球菌引起的兔坏死性肺炎方面具有很大的潜力。

Abstract

jin huang se pu tao qiu jun (Staphylococcus aureus)shi yi chong ren chu gong huan bing yuan jun ,gai jun yin qi de tu huai si xing fei yan ,chang chang dao zhi tu ji xing hu xi jiong pai ,ban xiong qiang ji ye 、ge xie bing kuai su zhi si ,gei tu yang shi ye zao cheng ju da de jing ji sun shi 。jin guan yi xie kang sheng su dui tu huai si xing fei yan ju you yi ding de zhi liao xiao guo ,dan shi jin huang se pu tao qiu jun nai yao jun zhu de chu xian yi ji kang sheng su yao wu can liu wen ti ,shi de kang sheng su liao fa shou dao le xian zhi 。yin ci ,ji xu xun zhao yi chong ji neng gou you xiao fang zhi jin huang se pu tao qiu jun gan ran yin qi de tu huai si xing fei yan ,you neng zai sheng chan guo cheng zhong di gong mo yao can he an quan jian kang de rou zhi pin de sheng wu zhi liao yao wu 。shi jun ti shi yi lei neng gou gan ran xi jun de bing du ,ta neng gou qin ru xi jun xi bao nei ,te yi xing sha si xi jun ,wei fang kong jin huang se pu tao qiu jun gan ran yin qi de ji bing di gong le yi chong you qian jing de ti dai liao fa 。duo xiang yan jiu biao ming ,shi jun ti zhen dui yi xie xi jun gan ran ju you hen hao de zhi liao xiao guo ,fan ying le shi jun ti yong yu zhi liao de qian li 。ran er ,mu qian shi jun ti shang wei yong yu yu fang he zhi liao you jin huang se pu tao qiu jun yin qi de tu huai si xing fei yan gan ran 。wei le yan jiu shi jun ti shi fou dui jin huang se pu tao qiu jun yin qi de tu huai si xing fei yan ju you zhi liao zuo yong ,ben wen jin hang le yi ji lie de yan jiu 。shou xian ,cong lin chuang huo de de huan you huai si xing fei yan de tu fei zhong fen li jian ding le duo zhu jin huang se pu tao qiu jun 。yao min shi yan jie guo biao ming zhe xie jun zhu ju you duo chong nai yao xing ,zhu yao dui qing mei su ,gong mei su ,lv mei su he fu kui nuo tong lei deng kang sheng su ju you kang xing ,dan suo you zhe xie jun zhu dui kang sheng su li nai zuo an min gan 。sui hou ,li yong ji zhong yi zhu jin huang se pu tao qiu jun fen li zhu S6zuo wei su zhu jun ,cong wu shui yang pin zhong fen li shai shua chu yi zhu xin de jin huang se pu tao qiu jun shi jun ti bing jiang ji ming ming wei VB-Sav M-JYL01,bing jin yi bu yan jiu le shi jun ti VB-Sav M-JYL01de zhu yao sheng wu xue te xing 。shi jun ti VB-Sav M-JYL01zai TSBgu ti ping ban shang xing cheng yuan xing tou ming shi ban ,zhi jing yao wei 1-2 mm。tou she dian jing xia guan cha shi jun ti VB-Sav M-JYL01de xing tai ,jie guo xian shi gai shi jun ti ju you zheng er shi mian ti de tou bu he ke shen su de wei bu ,biao ming gai shi jun ti shu yu ji wei shi jun ti ke 。dang gan ran fu shu wei 0.01shi ,shi jun ti de xiao jia da dao zui da zhi ,yao wei 9.8×109 PFU/m L。yi bu sheng chang qu xian ce ding jie guo xian shi ,shi jun ti VB-Sav M-JYL01de qian fu ji yao wei 20 min,bao fa liang yao wei 100 PFU/cell,biao ming gai shi jun ti ju you gao xiao de lie jie huo xing 。ci wai ,shi jun ti su zhu pu ce ding jie guo xian shi ,gai shi jun ti you jiao kuan de su zhu pu ,lie jie lv wei 75.7%(50/66)。shi jun ti VB-Sav M-JYL01quan ji yin zu xue yan jiu biao ming ,gai shi jun ti ji yin zu quan chang 141,384 bp,han you 219ge kai fang yue dou kuang ,ji zhong wei fa xian yu xi jun du li 、kang sheng su kang xing yi ji rong yuan sheng cheng xiang guan ji yin ,zhe wei gai shi jun ti yong yu zhi liao xing yan jiu dian ding le ji chu 。ben wen jin yi bu ping gu le shi jun ti VB-Sav M-JYL01dui tu huai si xing fei yan mo xing de zhi liao xiao guo 。ti nei shi yan jie guo xian shi ,chan ci bi nei gei yu 3×109 PFUde shi jun ti VB-Sav M-JYL01ke zai 48 hyou xiao di gao tu cun huo lv zhi 90%(9/10),er tong guo PBShuo li nai zuo an zhi liao hou de bao hu lv fen bie wei 10%(1/10)he 80%(8/10)。tu fei bu jun la ji shu jie guo biao ming ,shi jun ti VB-Sav M-JYL01zhi liao zu zai gan ran 24 hhou fei bu jun zai liang wei 4.18×104 CFU/g,yu PBSzhi liao zu (7.38×107 CFU/g)yi ji li nai zuo an zhi liao zu (3.12×105 CFU/g)xiang bi xian zhe jiang di 。ci wai ,yu PBSzhi liao zu xiang bi ,shi jun ti VB-Sav M-JYL01neng gou xian zhe gai shan fei zu zhi sun shang cheng du 。tong shi ,shi jun ti VB-Sav M-JYL01zhi liao hou de tu xie ye ji fei pao guan xi ye zhong de zong dan bai 、sha bai xi bao su (PVL)、α-du su (Hla)yi ji xiang guan xi bao yin zi de han liang xian zhe di yu PBSchu li zu 。yi shang yan jiu jie guo biao ming ,jin huang se pu tao qiu jun shi jun ti VB-Sav M-JYL01ju you gao lie jie huo xing he kuan su zhu pu ,ju zai ti wai he ti nei jun neng you xiao de sha si jin huang se pu tao qiu jun ,gai shi jun ti zai zhi liao jin huang se pu tao qiu jun gan ran yi ji zuo wei fang zhi jin huang se pu tao qiu jun yin qi de tu huai si xing fei yan fang mian ju you hen da de qian li 。

论文参考文献

论文详细介绍

论文作者分别是来自吉林大学的冀亚路,发表于刊物吉林大学2019-06-25论文,是一篇关于金黄色葡萄球菌论文,兔坏死性肺炎论文,噬菌体论文,利奈唑胺论文,吉林大学2019-06-25论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自吉林大学2019-06-25论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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