变形链球菌介导牙髓细胞基质金属蛋白酶-8 mRNA的表达及意义

变形链球菌介导牙髓细胞基质金属蛋白酶-8 mRNA的表达及意义

论文摘要

牙髓炎是牙髓组织疾病,绝大多数由龋齿发展而来,微生物的混合感染引发多种炎症细胞产生细胞因子,进而促进牙髓细胞合成基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)。牙髓炎症期细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的降解,是牙髓组织发生不可逆性损伤的关键环节,这一过程主要由MMPs来完成。本实验目的是在变形链球菌刺激体外培养牙髓细胞的基础上,观察MMP-8 mRNA在牙髓细胞中的表达,研究MMP-8对牙髓炎基质降解的影响。实验分为两部分,实验一选取新鲜牙髓进行体外牙髓细胞的培养及鉴定;实验二采用RT-PCR方法检测变形链球菌刺激牙髓细胞MMP-8 mRNA的表达。实验一结果显示,获得的牙髓细胞为典型成纤维细胞,形态多呈星形、长梭形,胞体丰满,胞浆均匀,核圆形或卵圆,核仁清晰;免疫组织化学检测结果显示牙髓细胞角蛋白呈阴性表达、波形丝蛋白呈阳性表达;ALP活性变化曲线符合牙髓细胞ALP活性变化规律。实验二结果显示,正常牙髓细胞MMP-8 mRNA未见表达,变形链球菌刺激后牙髓细胞MMP-8 mRNA表达明显。由此可以得出结论:组织块法培养牙髓细胞是较理想的培养方法;细菌刺激牙髓组织可诱导牙髓组织细胞表达MMP-8 mRNA,MMP-8是牙髓炎过程中重要的活动因子之一。

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