盐地碱蓬黄酮的分离提取及抗氧化活性的研究

论文摘要

本论文以盐碱地特有植物盐地碱蓬为试验原料,动态监测了其一年生长期中黄酮含量和抗氧化活性的变化趋势,研究了利于盐地碱蓬黄酮保存的干燥方法,从原料中提取、分离碱蓬黄酮的工艺,体内和体外的抗氧化活性以及高效液相色谱分析的条件。论文对乙醇热回流提取碱蓬黄酮进行了研究,最佳工艺条件为：温度70℃,乙醇浓度75%,料液比1：15,提取时间4h,按此工艺提取1次,盐地碱蓬黄酮类物质提取物得率为173.6mg/g。对上述提取物进一步纯化,实验选用AB-8大孔吸附树脂,上柱溶液为1.8mg/mL-2.0mg/mL,pH为4.5,吸附流速为1BV/h,采用70%乙醇作洗脱剂,洗脱流速0.3BV/h,操作温度为室温。此方法纯化后的提取物中盐地碱蓬黄酮含量为72.9%。按照上述工艺制备的提取物具有强的抗氧化活性和还原能力,对羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子,过氧化氢具有较强的清除能力。在D-半乳糖致衰小鼠模型中,盐地碱蓬提取物体现出很高的抗氧化活性。使用高效液相色谱分析经纯化的盐地碱蓬提取物的条件为：250x4.6mm Kromasil C18 5μ检测柱,30℃柱温,流动相：A 25μmol/L NaH2PO4 （5%CH3CN）, pH 4.3, B 25μmol/L NaH2PO4 （25%CH3CN）, pH 4.3,梯度洗脱条件：20%B-95%B （0-20min）、95%B （20-40min）、95%B-20%B （40-45min）, 1.0mL/min流速,20μL进样量。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1. 前言
• 1.1 盐地碱蓬的概述
• 1.1.1 盐地碱蓬的形态与分布
• 1.1.2 盐地碱蓬的营养成分
• 1.1.3 盐地碱蓬的生长习性性
• 1.1.4 盐地碱蓬的抗逆性
• 1.1.5 盐地碱蓬的抗氧化性
• 1.2 氧自由基与天然抗氧化剂
• 1.2.1 自由基与活性氧
• 1.2.2 天然抗氧化剂的开发意义
• 1.2.3 天然抗氧化剂的来源
• 1.2.4 抗氧化作用机理
• 1.3 黄酮类物质的概述
• 1.3.1 黄酮类化合物的定义
• 1.3.2 黄酮类化合物的分类
• 1.3.3 黄酮类化合物的理化性质
• 1.3.4 黄酮类化合物的营养学功能
• 1.4 黄酮的提取方法
• 1.4.1 溶剂法
• 1.4.2 微波法
• 1.4.3 酶解法
• 1.4.4 超临界流体萃取法
• 1.4.5 双水相萃取分离法
• 1.4.6 超声波提取法
• 1.5 黄酮类物质的检测方法
• 1.5.1 紫外分光光度法
• 1.5.2 高效液相色谱法
• 1.5.3 高效液相色谱法-质谱法
• 1.5.4 气相色谱法
• 1.5.5 毛细管电泳法
• 1.6 盐地碱蓬中黄酮类化合物的抗辐射功能
• 1.6.1 黄酮类化合物的抗辐射功效
• 1.6.2 盐地碱蓬基因工程研展
• 1.6.3 盐地碱蓬黄酮类化合物在食品中的应用
• 1.7 本课题的研究目的和主要内容
• 1.7.1 研究目的与意义
• 1.7.2 研究的主要内容
• 2. 材料与方法
• 2.1 实验材料与设备
• 2.1.1 实验原料
• 2.1.2 仪器设备
• 2.1.3 药品与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 盐地碱蓬黄酮含量的测定
• 2.2.2 不同生长期盐地碱蓬的动态监测
• 2.2.3 新鲜盐地碱蓬干燥方法的选择
• 2.2.4 热回流提取盐地碱蓬黄酮的工艺优化实验
• 2.2.5 大孔吸附树脂纯化盐地碱蓬黄酮的研究
• 2.2.6 盐地碱蓬黄酮的体外抗氧化活性评价
• 2.2.7 盐地碱蓬黄酮的体内抗氧化活性评价
• 2.2.8 HPLC分离盐地碱蓬黄酮条件的研究
• 3. 结果与讨论
• 3.1 芦丁标准曲线的绘制
• 3.2 不同生长期盐地碱蓬的动态监测
• 3.2.1 盐地碱蓬一年内的颜色变化
• 3.2.2 不同生长期盐地碱蓬黄酮含量的比较
• 3.2.3 不同生长期盐地碱蓬提取物体外抗氧化活性的比较
• 3.3 新鲜盐地碱蓬干燥方法的选择
• 3.4 热回流提取工艺优化实验结果
• 3.4.1 单因素实验
• 3.4.2 热回流提取法的正交试验结果及分析
• 3.5 大孔吸附树脂分离纯化盐地碱蓬黄酮的研究
• 3.5.1 大孔吸附树脂对盐地碱蓬黄酮的静态吸附实验
• 3.5.2 动态吸附实验
• 3.6 盐地碱蓬黄酮的体外抗氧化活性评价
• 3.6.1 清除超氧阴离子-紫外分光光度法
• 3.6.2 清除超氧阴离子-化学发光法
• 3.6.3 清除羟自由基-紫外分光光度法
• 3.6.4 清除羟自由基-化学发光法
• 3.6.5 清除过氧化氢
• 3.7 盐地碱蓬黄酮的体内抗氧化活性评价
• 3.8 HPLC分离盐地碱蓬黄酮条件的初步研究
• 4. 结论
• 4.1 盐地碱蓬最佳采摘期的确定
• 4.2 盐地碱蓬黄酮类物质最佳提取条件的确定
• 4.3 大孔吸附树脂纯化盐地碱蓬黄酮类物质最佳工艺条件的确定
• 4.4 盐地碱蓬黄酮类物质体外抗氧化活性
• 4.5 盐地碱蓬黄酮类物质体内抗氧化活性
• 4.6 HPLC分离盐地碱蓬黄酮条件的确定
• 5. 展望
• 6. 参考文献
• 7. 论文发表情况
• 8. 致谢