本文主要研究内容
作者张瑜（2019）在《PM2.5对大鼠呼吸道微生态的影响及诱导细胞周期阻滞》一文中研究指出：目的近些年,伴随着快速的工业发展,大气污染问题愈加严重,频繁出现了雾霾天气。空气细颗粒物的浓度与雾霾天气的出现有着紧密联系,因而对空气中PM2.5(Particulate Matter 2.5)等细颗粒物的研究成为热点。本课题采集大气中的以PM2.5直径为主的细颗粒物,制备PM2.5气雾化暴露Wistar大鼠模型及PM2.5混悬液处理人肺上皮细胞H1299、H292细胞模型,研究PM2.5对大鼠上呼吸道菌群组成改变及人肺上皮细胞因PM2.5引起周期阻滞的影响。通过使用单浓度口鼻暴露系统(HRH-MNE3026)进行染尘,高通量测序检测Wistar大鼠染尘前后上呼吸道菌群差异,Western检测肺组织、H1299、H292细胞的cyclinD1、TS、mTOR、P70S6K1表达水平。通过相应指标探讨大气污染物PM2.5影响上呼吸道菌群组成及诱导人肺上皮细胞周期阻滞的情况。方法1.收集PM2.5的纤维滤纸,按国家环境质量二级标准的10倍,制备一定浓度(750 μg/m3)的PM2.5混悬液暴露Wistar大鼠模型。2.应用16S rDNA检测染尘前后不同时间段(2W、4W)大鼠口咽部菌群的变化情况。3.流式细胞仪检测PM2.5处理前后两种传代细胞系(人肺上皮H292和H1299细胞)细胞周期的改变。4.Western检测两个细胞系及暴露2周、4周后大鼠肺组织中TS、cyclinD1、mTOR、P70S6K1蛋白的表达量。5.瞬时转染:用TS的siRNA抑制剂转染H292细胞,抑制TS分子的表达。6.统计学分析:第一部分16S rDNA高通量测序结果,使用R Studio软件完成实验结果的统计分析,呼吸道菌群的异同性采用聚类分析;P值计算基于Wilcoxon秩和检验,并经过FDR校正(P<0.05),差异具有统计学意义。第二部分结果采用SPSS 22.0软件进行结果分析,用方差分析确定统计学显著性(P<0.05),认为具有统计学意义。结果1.16S rDNA高通量测序结果显示,随着大鼠染尘时间的增加,呼吸道菌群组间丰度及多样性有所改变,使得呼吸道菌群中优势菌减少,条件致病菌菌群丰度增加。2.PM2.5处理H292、H1299细胞48 h后,H292、H1299细胞的细胞周期阻滞在S期,cyclinD1的表达下调(P<0.05)。当PM2.5浓度为200 μg/mL时,S期细胞百分比分别达到50.35%和56.20%。为了分析PM2.5诱导的肺损伤,采用暴露染尘Wistar大鼠实验。结果发现与细胞暴露实验一致,PM2.5暴露组中cyclinD1蛋白表达下调(P<0.05)。3.随着PM2.5处理H292和H1299细胞浓度的增加,TS蛋白表达下调(P<0.05)。体内暴露Wistar大鼠后,暴露组肺组织TS蛋白表达也下调(P<0.05)。4.H292细胞中抑制TS分子的表达,导致PM2.5暴露后细胞周期阻滞更明显和cyclin D1蛋白表达下调更显著(P<0.05)。5.随着PM2.5浓度的增加,H1299、H292细胞中p-mTOR和p-P70S6K1的表达下调(P<0.05)。体内暴露Wistar大鼠,延长暴露时间(2、4周),p-mTOR和p-P70S6K1的表达显著下调(P<0.05)。结论1.PM2.5暴露改变了呼吸道局部的菌群丰度及多样性,打破了呼吸道菌群平衡。2.PM2.5处理后使大鼠肺组织生物合成发生障碍,诱导人H292、H1299细胞周期阻滞;mTOR/P70S6K1信号通路在其介导的生物学效应中起关键作用,且推测TS是PM2.5暴露后调节细胞周期过程的靶点。
Abstract
mu de jin xie nian ,ban sui zhao kuai su de gong ye fa zhan ,da qi wu ran wen ti yu jia yan chong ,pin fan chu xian le wu mai tian qi 。kong qi xi ke li wu de nong du yu wu mai tian qi de chu xian you zhao jin mi lian ji ,yin er dui kong qi zhong PM2.5(Particulate Matter 2.5)deng xi ke li wu de yan jiu cheng wei re dian 。ben ke ti cai ji da qi zhong de yi PM2.5zhi jing wei zhu de xi ke li wu ,zhi bei PM2.5qi wu hua bao lou Wistarda shu mo xing ji PM2.5hun xuan ye chu li ren fei shang pi xi bao H1299、H292xi bao mo xing ,yan jiu PM2.5dui da shu shang hu xi dao jun qun zu cheng gai bian ji ren fei shang pi xi bao yin PM2.5yin qi zhou ji zu zhi de ying xiang 。tong guo shi yong chan nong du kou bi bao lou ji tong (HRH-MNE3026)jin hang ran chen ,gao tong liang ce xu jian ce Wistarda shu ran chen qian hou shang hu xi dao jun qun cha yi ,Westernjian ce fei zu zhi 、H1299、H292xi bao de cyclinD1、TS、mTOR、P70S6K1biao da shui ping 。tong guo xiang ying zhi biao tan tao da qi wu ran wu PM2.5ying xiang shang hu xi dao jun qun zu cheng ji you dao ren fei shang pi xi bao zhou ji zu zhi de qing kuang 。fang fa 1.shou ji PM2.5de qian wei lv zhi ,an guo jia huan jing zhi liang er ji biao zhun de 10bei ,zhi bei yi ding nong du (750 μg/m3)de PM2.5hun xuan ye bao lou Wistarda shu mo xing 。2.ying yong 16S rDNAjian ce ran chen qian hou bu tong shi jian duan (2W、4W)da shu kou yan bu jun qun de bian hua qing kuang 。3.liu shi xi bao yi jian ce PM2.5chu li qian hou liang chong chuan dai xi bao ji (ren fei shang pi H292he H1299xi bao )xi bao zhou ji de gai bian 。4.Westernjian ce liang ge xi bao ji ji bao lou 2zhou 、4zhou hou da shu fei zu zhi zhong TS、cyclinD1、mTOR、P70S6K1dan bai de biao da liang 。5.shun shi zhuai ran :yong TSde siRNAyi zhi ji zhuai ran H292xi bao ,yi zhi TSfen zi de biao da 。6.tong ji xue fen xi :di yi bu fen 16S rDNAgao tong liang ce xu jie guo ,shi yong R Studioruan jian wan cheng shi yan jie guo de tong ji fen xi ,hu xi dao jun qun de yi tong xing cai yong ju lei fen xi ;Pzhi ji suan ji yu Wilcoxonzhi he jian yan ,bing jing guo FDRjiao zheng (P<0.05),cha yi ju you tong ji xue yi yi 。di er bu fen jie guo cai yong SPSS 22.0ruan jian jin hang jie guo fen xi ,yong fang cha fen xi que ding tong ji xue xian zhe xing (P<0.05),ren wei ju you tong ji xue yi yi 。jie guo 1.16S rDNAgao tong liang ce xu jie guo xian shi ,sui zhao da shu ran chen shi jian de zeng jia ,hu xi dao jun qun zu jian feng du ji duo yang xing you suo gai bian ,shi de hu xi dao jun qun zhong you shi jun jian shao ,tiao jian zhi bing jun jun qun feng du zeng jia 。2.PM2.5chu li H292、H1299xi bao 48 hhou ,H292、H1299xi bao de xi bao zhou ji zu zhi zai Sji ,cyclinD1de biao da xia diao (P<0.05)。dang PM2.5nong du wei 200 μg/mLshi ,Sji xi bao bai fen bi fen bie da dao 50.35%he 56.20%。wei le fen xi PM2.5you dao de fei sun shang ,cai yong bao lou ran chen Wistarda shu shi yan 。jie guo fa xian yu xi bao bao lou shi yan yi zhi ,PM2.5bao lou zu zhong cyclinD1dan bai biao da xia diao (P<0.05)。3.sui zhao PM2.5chu li H292he H1299xi bao nong du de zeng jia ,TSdan bai biao da xia diao (P<0.05)。ti nei bao lou Wistarda shu hou ,bao lou zu fei zu zhi TSdan bai biao da ye xia diao (P<0.05)。4.H292xi bao zhong yi zhi TSfen zi de biao da ,dao zhi PM2.5bao lou hou xi bao zhou ji zu zhi geng ming xian he cyclin D1dan bai biao da xia diao geng xian zhe (P<0.05)。5.sui zhao PM2.5nong du de zeng jia ,H1299、H292xi bao zhong p-mTORhe p-P70S6K1de biao da xia diao (P<0.05)。ti nei bao lou Wistarda shu ,yan chang bao lou shi jian (2、4zhou ),p-mTORhe p-P70S6K1de biao da xian zhe xia diao (P<0.05)。jie lun 1.PM2.5bao lou gai bian le hu xi dao ju bu de jun qun feng du ji duo yang xing ,da po le hu xi dao jun qun ping heng 。2.PM2.5chu li hou shi da shu fei zu zhi sheng wu ge cheng fa sheng zhang ai ,you dao ren H292、H1299xi bao zhou ji zu zhi ;mTOR/P70S6K1xin hao tong lu zai ji jie dao de sheng wu xue xiao ying zhong qi guan jian zuo yong ,ju tui ce TSshi PM2.5bao lou hou diao jie xi bao zhou ji guo cheng de ba dian 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自沈阳医学院的张瑜，发表于刊物沈阳医学院2019-07-01论文，是一篇关于呼吸道微生态论文,细胞周期阻滞论文,信号通路论文,沈阳医学院2019-07-01论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自沈阳医学院2019-07-01论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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