丹酚酸A的转化制备及机理研究

论文摘要

在丹参丹酚酸类化合物中丹酚酸A的抗氧化活性最高,具有广泛的药理学功能,但丹参中丹酚酸A的含量极低,通过从丹参原植物中进行提取分离的常规方法难以实现对丹酚酸A的制备。本文通过高温高压处理丹酚酸提取物的方法分离得到高纯度的丹酚酸A,提出了最优的转化制备工艺,解决了丹酚酸A难以规模制备的问题,同时对转化机理进行了研究,阐释了丹酚酸提取物高温高压下转化为丹酚酸A的反应过程,对丹参制剂的有效成分及量效关系研究有重要意义。通过单因素考察及正交实验确定了高温高压下丹酚酸提取物转化为丹酚酸A的最佳工艺条件为：反应时间4 h,反应温度120℃,pH5,物料浓度5mg·mL-1,其中反应温度和反应时间对丹酚酸A的生成影响较大。采用高温高压处理丹酚酸提取物的方法获得丹酚酸转化产物,经过萃取、正相硅胶及反相树脂柱层析相结合的方法对转化产物进行分离,得到了高纯度的丹酚酸A（纯度≥98%）,经IR、ESI-MS、1H-NMR和13C-NMR分析及与文献数据比对,鉴定所制备的化合物为丹酚酸A。通过对丹酚酸提取物及丹酚酸B、紫草酸纯品水溶液分别经高温高压处理,采用高效液相色谱分析过程中成分的变化,结果表明丹酚酸B、紫草酸水溶液经高温高压处理后的主要产物为丹酚酸A,紫草酸是丹酚酸B高温高压反应生成丹酚酸A过程中的中间产物；相同条件下紫草酸比丹酚酸B更容易转化为丹酚酸A；丹酚酸A在高温高压条件下不稳定,能够继续分解为其它小分子化合物。采用UPLC/Q-TOF MS技术对高温高压条件下丹酚酸类化合物的反应产物进行了在线表征,共鉴定了27种化合物。根据丹酚酸类化合物的结构并结合UPLC/Q-TOF MS的鉴定结果对丹酚酸类化合物的高温高压反应过程进行推断,提出了丹酚酸类化合物高温高压下生成丹酚酸A的反应机理。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 丹酚酸类化合物概况
• 1.1.1 丹参简介
• 1.1.2 丹酚酸类化合物化学成分的研究
• 1.2 丹酚酸类化合物的药理作用
• 1.3 丹酚酸类化合物的分离制备及检测方法
• 1.3.1 丹酚酸类化合物的分离制备方法
• 1.3.2 丹酚酸类化合物的检测方法
• 1.3.2.1 比色法
• 1.3.2.2 薄层层析法
• 1.3.2.3 紫外分光光度法
• 1.3.2.4 液相色谱法
• 1.3.2.5 LC-MS技术
• 1.4 丹酚酸类化合物的稳定性及转化研究
• 1.4.1 丹酚酸类化合物的稳定性研究
• 1.4.2 丹酚酸类化合物的转化研究
• 1.5 本课题的研究内容及意义
• 1.5.1 研究内容
• 1.5.2 研究意义
• 第二章 高温高压下转化合成丹酚酸A的工艺研究
• 2.1 材料与仪器
• 2.1.1 主要试剂及材料
• 2.1.2 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 酸的配制
• 2.2.2 丹酚酸A含量的测定
• 2.2.2.1 色谱条件
• 2.2.2.2 标准曲线的制作
• 2.2.2.3 转化合成丹酚酸A的方法
• 2.2.2.4 酸的种类及丹酚酸B含量对转化反应影响的考察
• 2.2.2.5 转化合成丹酚酸A的单因素实验及正交实验
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 实验用酸的选择
• 2.3.2 丹酚酸提取物中丹酚酸B的含量对转化合成丹酚酸A的影响
• 2.3.3 反应时间对转化合成丹酚酸A的影响
• 2.3.4 反应温度对转化合成丹酚酸A的影响
• 2.3.5 pH对转化合成丹酚酸A的影响
• 2.3.6 物料浓度对转化合成丹酚酸A的影响
• 2.3.7 转化合成丹酚酸A的正交实验分析
• 2.4 小结
• 第三章 丹酚酸A的转化制备研究
• 3.1 材料与仪器
• 3.1.1 实验原料
• 3.1.2 主要试剂及材料
• 3.1.3 实验仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 分析方法
• 3.2.1.1 高效液相色谱法
• 3.2.1.2 薄层色谱分析方法
• 3.2.2 丹酚酸的转化
• 3.2.3 丹酚酸A的分离制备
• 3.3 结果与讨论
• 3.4 小结
• 第四章 高温高压下丹酚酸B、紫草酸化学变化的研究
• 4.1 材料与仪器
• 4.1.1 主要试剂及材料
• 4.1.2 实验仪器
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 色谱条件
• 4.2.2 对照品溶液的配制
• 4.2.3 丹酚酸提取物水溶液的高温高压反应
• 4.2.4 丹酚酸B水溶液的高温高压反应
• 4.2.5 紫草酸水溶液的高温高压反应
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 高温高压下丹酚酸提取物水溶液成分的变化
• 4.3.2 丹酚酸B水溶液高温高压处理过程中的化学变化
• 4.3.3 紫草酸水溶液高温高压处理过程中的化学变化
• 4.3.4 丹酚酸B、紫草酸水溶液高温高压反应过程的比较
• 4.3.5 高温高压下丹酚酸B、紫草酸转化生成丹酚酸A的反应过程
• 4.4 小结
• 第五章 高温高压下丹酚酸A的转化机理研究
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 试剂与材料
• 5.1.2 仪器
• 5.1.3 实验条件
• 5.1.4 样品制备
• 5.1.4.1 对照品溶液
• 5.1.4.2 样品溶液
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 丹酚酸类化合物的UPLC/Q-TOF MS表征
• 5.2.2 高温高压下丹酚酸类化合物化学变化的机理
• 5.3 小结
• 第六章 结论与展望
• 6.1 结论
• 6.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录