曲古霉素A和5-氮杂胞苷对胰岛β细胞的保护作用

论文摘要

目的探讨在细胞因子诱导条件下曲古霉素A（TSA）和5-氮杂胞苷（5-AzaC）对胰岛p细胞增殖、凋亡及功能的影响。方法体外培养大鼠胰岛素瘤细胞（RIN-m5f）至指数增长期,根据干预方案进行分组：正常细胞组、IL-1β/IFN-γ组、TSA+IL-1β/IFN-γ组（不同TSA浓度）、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ组（不同5-AzaC浓度）、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ组。采用噻唑蓝（MTT）比色法检测p细胞增殖活性、膜联蛋白V-FITC/PI检测p细胞凋亡率、酶联免疫吸附法（ELISA）检测葡萄糖刺激胰岛素分泌能力。结果TSA+IL-1β/IFN-γ组、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ组、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ组细胞增殖活性分别为79.2%、82.9%、89.1%,与IL-1β/IFN-γ组（33.9%）比较差异有统计学意义（均P<0.05）；TSA+IL-1β/IFN-γ组、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ组、5一AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ组凋亡率分别为8.2%、10.5%、7.9%,与IL-1β/IFN-γ组（16.6%）相比凋亡率降低,具有统计学差异（均P<0.05）: TSA+IL-1β/IFN-γ组、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ组、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ组细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌能力部分恢复[（5.530.16） ng/ml、（5.70±0.18） ng/ml、（5.90±0.10） ng/ml],与IL-1β/IFN-y组（3.21±0.17）ng/ml比较差异有统计学意义（均P<0.05）。结论曲古霉素A和5-氮杂胞苷可以抑制细胞因子诱导的胰岛p细胞凋亡和恢复p细胞的胰岛素分泌功能。目的探讨高糖诱导条件下曲古霉素A（TSA）和5-氮杂胞苷（5-AzaC）和对胰岛p细胞增殖、凋亡及功能的影响。方法体外培养大鼠胰岛素瘤细胞（RIN-m5f）至指数增长期,根据干预方案进行分组：正常细胞组、高糖（HG）组、TSA+HG组（不同TSA浓度）.5-AzaC+HG组（不同5-AzaC浓度）、5-AzaC+TSA+HG组。采用噻唑蓝（MTT）比色法检测β细胞增殖活性、膜联蛋白V-FITC/PI检测p细胞凋亡率、酶联免疫吸附法（ELISA）检测葡萄糖刺激胰岛素分泌能力。结果TSA+HG组、5-AzaC+HG组、5-AzaC+TSA+HG组细胞增殖活性分别为79.2%、81.8%、87.5%,与HG组（63.2%）比较差异有统计学意义（均尸<0.05）;TSA+HG组、5-AzaC+HG组、5-AzaC+TSA+HG组细胞凋亡率分别为10.4%、9.9%、8.7%,与HG组（15.8%）相比凋亡率降低,具有统计学差异（均p<0.05）;TSA+HG组、5-AzaC+HG组、5-AzaC+TSA+HG组细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌能力部分恢复[（5.59±0.21）ng/ml.（5.80±0.16）ng/ml.（6.05±0.11） ng/ml],与HG组（3.37±0.12）ng/ml比较差异有统计学意义（均P<0.05）。结论曲古霉素A和5-氮杂胞苷可以抑制高糖诱导的胰岛β细胞凋亡和恢复p细胞的胰岛素分泌功能。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略词一览表
• 前言
• 第一部分 曲古霉素A和5-氮杂胞苷对细胞因子诱导损伤的胰岛p细胞的保护作用
• 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验步骤与方法
• 1.3 统计分析
• 结果
• 2.1 镜下RIN-m5f细胞形态
• 2.2 R1N-m5f细胞增殖活性检测
• 2.3 RIN-m5f细胞凋亡率检测
• 2.4 RIN-m5f细胞胰岛素释放功能检测
• 第二部分 曲古霉素A和5-氮杂胞苷对高糖诱导损伤的胰岛β细胞的保护作用
• 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验步骤与方法
• 1.3 统计分析
• 结果
• 2.1 镜下R1N-m5f细胞形态
• 2.2 RIN-m5f细胞增殖活性检测
• 2.3 RIN-m5f细胞凋亡率检测
• 2.4 R1N-m5f细胞胰岛素释放功能检测
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 在读期间发表论文情况