半滑舌鳎早期发育生物学与种质资源研究

论文摘要

半滑舌鳎是我国渤、黄海的地方性名贵鱼种和理想的增养殖对象，由于过度捕捞和生境变化，资源量严重衰竭，加之独特的生殖习性(雌雄型体差异悬殊和性比变化幅度较大)，其种质资源现状及其可持续利用令人堪忧。本项研究以分布于黄渤海半滑舌鳎野生群体和养殖群体为对象，结合半滑舌鳎规模化人工繁育生产，采用实验生态学手段和多种分子生物学技术，系统地观察和研究了半滑舌鳎早期发育阶段的形态学和生态学特征；从细胞学(染色体核型和带型)、生物化学(组织生化组成和同工酶)和分子遗传学水平(RAPD、AFLP和mtDNA Cyt b和16S rRNA基因片段序列)分析研究了分布于黄渤海半滑舌鳎的种质资源特征，阐述其种质资源现状，提出半滑舌鳎合理利用和保护其种质资源的措施，为这一宝贵资源的保护及其增养殖种子工程奠定了理论基础。同时，从分子遗传进化角度探讨了14种鳎亚科鱼类的分子系统进化关系，为形态分类提供有意义的信息，以指导诸如通过近缘种的杂交培育具有优良性状的养殖品系计划的制订。 历经3年多的研究，获得了如下5方面的结果： 1．首先，跟踪观察和描述了半滑舌鳎从受精卵到2个月龄各主要特征性发育阶段(卵子、胚胎、仔鱼、稚鱼和幼鱼)的形态学特征，阐述了半滑舌鳎特征性器官的发生与消长，比较和论述了舌鳎属鱼类早期发育形态多样性，补充和完善了半滑舌鳎形态学水平的种质资源特征描述。其次，采用实验生态学手段，观察研究了半滑舌鳎胚胎发育与水温的关系，建立了半滑舌鳎胚胎发育速率与培养水温的关系模型，揭示半滑舌鳎胚胎发育的阈温度和有效积温值；认识了盐度与半滑舌鳎胚胎发育进程、变态率、畸形率和仔幼鱼生长的关系，并通过苗种生产验证，提出半滑舌鳎胚胎发育和仔幼鱼培养的最适温、盐度范围，为种苗生产提供了理论依据。第三，观察描述了半滑舌鳎从初孵仔鱼到完成变态营底匍生活幼鱼的摄食与生长，

论文目录

• 目录
• 摘要
• ABSRACT
• 1 文献综述
• 1.1 鱼类早期发育生物学研究概述
• 1.1.1 鱼类早期发育生物学涵义及其重要性
• 1.1.2 海洋鱼类早期发育生物学之研究概况
• 1.1.2.1 国内外相关研究历史
• 1.1.2.2 研究规范与学术交流
• 1.1.2.3 鱼类早期发育生物学热点问题
• 1.2 鱼类种质资源研究概述
• 1.2.1 种质资源的涵义及其主要类别
• 1.2.2 种质资源重要性及其研究意义
• 1.2.3 种质资源研究历史与技术进步
• 1.2.4 种质资源检测常用的标记技术
• 1.2.4.1 形态学标记（morphological markers）
• 1.2.4.2 细胞学标记（cytological markers）
• 1.2.4.3 生化标记（biochemical markers）
• 1.2.4.4 DNA分子标记（DNA molecular markers）
• 1.2.5 鱼类种质资源研究现状与进展
• 1.2.5.1 国内研究历史回顾
• 1.2.5.2 研究现状及其进展
• 1.3 鱼类分子系统进化研究概述
• 2 本研究总体设计及研究策略
• 2.1 半滑舌鳎渔业生物学研究现状
• 2.2 本研究的总体设计与研究策略
• 3 半滑舌鳎早期发育生物学研究
• 3.1 半滑舌鳎早期发育阶段形态及其发育特征
• 3.1.1 材料与方法
• 3.1.2 结果
• 3.1.2.1 胚胎发育
• 3.1.2.2 前期仔鱼
• 3.1.2.3 后期仔鱼
• 3.1.2.4 稚鱼
• 3.1.2.5 幼鱼
• 3.1.3 讨论
• 3.1.3.1 半滑舌鳎卵子油球数量及其变异
• 3.1.3.2 舌鳎属鱼类早期发育形态特征多样性
• 3.1.3.3 半滑舌鳎与其他鲽形目鱼类变态期发育特征差异
• 3.1.3.4 关于冠状幼鳍原基发育及其特征
• 3.1.3.5 关于眼睛移位及其特征
• 3.1.3.6 关于感觉器官及其发育
• 3.1.3.7 关于退化器官
• 3.2 温度、盐度对半滑舌鳎早期发育生长的影响
• 3.2.1 材料与方法
• 3.2.1.1 受精卵和胚胎的收集
• 3.2.1.2 有效积温值的计算
• 3.2.1.3 温度对胚胎发育影响的验证
• 3.2.1.4 不同盐度条件下受精卵的浮性及孵化试验
• 3.2.1.5 不同盐度海水中仔鱼的存活和生长
• 3.2.2 结果
• 3.2.2.1 水温与胚胎发育
• 3.2.2.2 胚胎发育的阈温度和有效积温
• 3.2.2.3 最适孵化温度
• 3.2.2.4 不同海水盐度条件下受精卵的浮性及孵化率
• 3.2.2.5 不同盐度下受精卵胚胎发育进程
• 3.2.2.6 不同盐度海水对仔鱼的存活和生长的影响
• 3.2.3 讨论
• 3.2.3.1 受精卵的发育时间与培养水温的关系
• 3.2.3.2 胚胎发育的阈温度和有效积温
• 3.2.3.3 盐度对胚胎发育的影响
• 3.2.3.4 盐度对仔鱼生长发育的影响
• 3.3 半滑舌鳎早期发育阶段的摄食与生长
• 3.3.1 材料与方法
• 3.3.1.1 仔鱼来源及其培养方法
• 3.3.1.2 初次摄食率和摄食习性的观察
• 3.3.1.3 不可逆转点（PNR）的确定
• 3.3.1.4 仔鱼发育特征和形态学观察
• 3.3.1.5 卵黄囊容量的计算
• 3.3.1.6 仔鱼生长模型的建立
• 3.3.2 结果
• 3.3.2.1 早期发育、摄食及生长
• 3.3.2.2 仔鱼生长模型
• 3.3.2.3 初次摄食率及不可逆转点
• 3.3.2.4 摄食节律
• 3.3.2.5 饱食和消化时间
• 3.3.2.6 仔稚鱼的相对最大饱食量
• 3.3.2.7 仔稚鱼的日摄食量及日摄食率
• 3.3.2.8 胸角（Pectoralangle）
• 3.3.3 讨论
• 3.3.3.1 关于油球的作用
• 3.3.3.2 关于内、外源性营养转换
• 3.3.3.3 关于仔鱼的三个长度生长相
• 3.3.3.4 关于饥饿仔鱼的形态与生态特征
• 3.3.3.5 关于摄食节律
• 4 半滑舌鳎染色体核型与带型研究
• 4.1 半滑舌鳎染色体核型研究
• 4.1.1 材料方法
• 4.1.1.1 实验材料来源
• 4.1.1.2 染色体标本的制备
• 4.1.1.3 核型分析
• 4.1.2 结果
• 4.1.2.1 染色体数目
• 4.1.2.2 染色体核型
• 4.1.2.3 性染色体的鉴定
• 4.1.3 讨论
• 4.1.3.1 关于鲽形目鱼类的核型
• 4.1.3.2 关于半滑舌鳎的性染色体
• 4.2 半滑舌鳎染色体带型研究
• 4.2.1 材料方法
• 4.2.1.1 实验材料来源
• 4.2.1.2 染色体标本的制备
• 4.2.1.3 G带显色及其显带染色体的命名
• 4.2.1.4 C带显色
• 4.2.1.5 NOR带显色
• 4.2.2 结果
• 4.2.2.1 G显带对核型分析的佐证
• 2.2.2.2 G带的带纹特征
• 4.2.2.3 C显带对核型分析的佐证
• 4.2.2.4 C带的带纹特征
• 4.2.2.5 NOR带
• 4.2.3 讨论
• 4.2.3.1 关于G带
• 4.2.3.2 关于C和NOR显带
• 5 半滑舌鳎生化遗传学研究
• 5.1 半滑舌鳎肌肉组织生物化学成分分析
• 5.1.1 材料与方法
• 5.1.1.1 样品来源
• 5.1.1.2 样品处理
• 5.1.1.3 主要营养成分测定
• 5.1.1.4 微量元素和常量元素的测定
• 5.1.1.5 氨基酸和脂肪酸含量的测定
• 5.1.2 结果
• 5.1.2.1 肌肉生化成分
• 5.1.2.2 肌肉主要常量和微量元素含量
• 5.1.2.3 肌肉氨基酸种类与含量
• 5.1.2.4 脂肪酸含量
• 5.1.3 讨论
• 5.1.3.1 关于主要生化成分含量差异
• 5.1.3.2 关于矿物质成分含量差异
• 5.1.3.3 关于氨基酸成分含量差异
• 5.1.3.4 关于脂肪酸成分含量差异
• 5.2 半滑舌鳎群体遗传变异同工酶分析
• 5.2.1 材料方法
• 5.2.1.1 实验材料及其来源
• 5.2.1.2 实验与分析方法
• 5.2.1.3 数据分析
• 5.2.2 结果
• 5.2.2.1 酶谱特征
• 5.2.2.2 组织特异性
• 5.2.2.3 群体遗传结构及遗传距离
• 5.2.3 讨论
• 5.2.3.1 关于半滑舌鳎遗传多样性水平
• 5.2.3.2 关于黄、渤海群的群体遗传结构差异
• 5.3 雌雄半滑舌鳎同工酶的表型差异分析
• 5.3.1 材料与方法
• 5.3.1.1 实验材料
• 5.3.1.2 实验方法
• 5.3.2 结果
• 5.3.2.1 苹果酸酶
• 5.3.2.2 苹果酸脱氢酶
• 5.3.2.3 酸性磷酸酶
• 5.3.2.4 酯酶
• 5.3.3 讨论
• 5.3.3.1 关于个体、组织特异性
• 5.3.3.2 关于雌雄表型差异
• 5 半滑舌鳎DNA群体遗传学研究
• 6.1 材料方法
• 6.1.1 材料来源
• 6.1.2 DAN提取
• 6.1.3 AFLP分析
• 6.1.4 RAPD分析
• 6.1.5 Cyt b基因片段扩增与测序
• 6.1.6 数据分析
• 6.1.6.1 AFLP和RAPD
• 6.1.6.2 Cyt b基因片段序列变异分析
• 6.2.结果
• 6.2.1 AFLP分析
• 6.2.2 RAPD分析
• 6.2.3 Cyt b基因片段序列变异分析
• 6.3 讨论
• 6.3.1 关于野生与养殖群体的遗传多样性水平差异
• 6.3.2 关于野生群体遗传多样性的评价
• 6.3.3 关于黄、渤海群的特异性DNA标记
• 7 舌鳎亚科鱼类分子系统进化关系研究
• 7.1 材料与方法
• 7.1.1 实验材料
• 7.1.2 基因组DNA提取
• 7.1.3 PCR扩增
• 7.1.3.1 引物
• 7.1.3.2 PCR反应体系
• 7.1.3.3 PCR循环参数
• 7.1.3.4 PCR产物的回收和纯化
• 7.1.4 序列测定
• 7.1.4.1 测序反应体系
• 7.1.4.2 测序反应程序
• 7.1.4.3 测序反应产物的纯化
• 7.1.5 数据分析
• 7.2 结果
• 7.2.1 序列信息
• 7.2.2 物种间系统发育关系
• 7.3 讨论
• 7.3.1 舌鳎亚科鱼类形态分类存在的问题
• 7.3.2 舌鳎亚科鱼类的系统发育关系
• 8 结论
• 8.1 半滑舌鳎早期发育生物学研究
• 8.2 半滑舌鳎细胞遗传学研究
• 8.3 半滑舌鳎生化遗传学研究
• 8.4 半滑舌鳎DNA分子遗传学研究
• 8.5 舌鳎亚科鱼类分子系统进化关系研究
• 8.6 本学位论文研究的特点与不足之处
• 8.6.1 本研究的特点与创新之处
• 8.6.1.1 特点之一
• 8.6.1.2 特点之二
• 8.6.1.3 特点之三
• 8.6.2 不足之处与深入研究的设想
• 8.6.2.1 不足之处
• 8.6.2.2 深入研究的建议与设想
• 参考文献
• 2001～2006发表论著、承担课题和获奖情况
• 一.学术期刊论文
• （一） 第一和通讯作者论文
• （二） 其他署名论文
• 二.专著
• 三.承担课题情况
• 四.获奖情况
• 致谢
• 附录