论文摘要
目的:研究(60)Coγ射线对鼻咽癌细胞株(CNE-2)细胞周期和细胞周期素(cyclin) D1、B1,增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin dependent kinase,CDK)1、4 的影响,动态观察辐射对细胞生长增殖与细胞周期动力学的影响,探讨γ射线对CNE-2 细胞增殖与细胞周期动力学影响的分子机制,为肿瘤大分割放疗方案的制定提供基础资料。方法:采用(60)Coγ射线照射,剂量率为108111mGy/min,设对照(未照射)组和分割剂量为4.0、6.0、8.0 Gy×5 次/5 天组,每次照射间隔24小时。采用PI 单染,用流式细胞术检测细胞周期分布;逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)结合半定量分析方法测定cyclin B1、CDK1、cyclin D1、CDK4 和PCNA mRNA 的表达情况。结果:①4.0、6.0、8.0 Gy (60)Coγ射线分割照射CNE-2细胞第一天(次)后3 h,各组CNE-2 细胞均出现明显的S期和G2/M 阻滞,表现为S期和G2M 期细胞比例明显增大。照射第3 天(次),G1期细胞比例增高,S 期、G2期细胞数量减少。4.0、6.0Gy 分割照射第5 天(次),G1期细胞数量下降,G2期细胞数量上升,同时可见异倍体细胞;8.0Gy 照射第5 天(次),出现轻微的G1和G2期细胞比例升高,同时S期细胞数下降。②4.0、6.0、8.0 Gy 60Coγ射线分割照射CNE-2 细胞cyclin B1 mRNA 表达较对照组均有明显的下降(P<0.05),但各照射组间cyclin B1 表达水平无差别(P>0.05)。CDK1 mRNA 在所有照射组中均无表达,而对照组正常表达。4.0、6.0、8.0 Gy (60)Coγ射线分割照射CNE-2 细胞cyclin D1 较对照组均有明显的下降(P<0.05);4.0、6.0、8.0 Gy 组分割照射CNE-2 细胞第3 天(次)cyclin D1mRNA 表达水平各照射组间无明显差别(P>0.05);6.0、8.0 Gy 组细胞在照射第5 天(次)后cyclin D1 mRNA 不表达。各照射组CNE-2 细胞CDK4 mRNA 表达较对照组无明显改变(P>0.05)。各照射组PCNA mRNA 表达水平较对照组无明显差别(P>0.05)。结论:①4.0、6.0、8.0 Gy (60)Coγ射线分割照射CNE-2 细胞可使细胞发生G1、S、G2阻滞。G1阻滞程度呈剂量依赖性升高,照射剂量越大,阻滞程度越明显。②4.0、6.0、8.0 Gy (60)Coγ射线分割照射CNE-2 细胞诱发的G2/M 阻滞与CDK1 活性受抑及cyclin B1 mRNA 表达水平下降有关;G1阻滞
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