30%苍耳素乳油加工工艺及药效评价

论文摘要

苍耳素是从植物苍耳中提取出来的抑菌活性物质,对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)、黄瓜黑星病菌( Cladosporium cucumerinum Ell.et Arthur)等蔬菜常见病害有较强的抑制作用。本文通过对苍耳中抑菌活性物质分离,确定了最佳分离路线;通过对苍耳素制剂助剂及加工配方的筛选,确定了最佳配方和加工工艺;通过探索中试加工研究,加工成了30%的苍耳素乳油(EC),并进行了质量检测和室内及田间药效评价。研究结果如下:1.以番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum Ell. et Arthur)为供试菌种,用正己烷、二氯甲烷、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇六种不同极性的溶剂淋洗苍耳素提取液,对苍耳素提取液进行分离研究,进行活性追踪测定。结果表明:正己烷→二氯甲烷→正丁醇→乙酸乙酯→丙酮→甲醇逐步分离(六溶剂分离法)为最佳分离路线。三溶剂分离法只分离到一个高活性甲醇流分,甲醇流分对番茄灰霉菌和黄瓜黑星菌的抑制率分别为87.50%、89.23%。六溶剂分离法分离到四个有较高抑菌活性的流分,乙酸乙酯流分和丙酮流分对番茄灰霉菌的抑制率为87.34%、89.23%;正丁醇流分和甲醇流分对番茄灰霉菌的抑制率均在20%以上。2.以苍耳素为原药,通过对苍耳素乳油配方的选择、优化,确定了加工配方和加工工艺。苍耳素乳油配方为苍耳素提取液30%;乳化剂0203B8%;助溶剂DMF10%、正丁醇10%;紫外保护剂荧光素钠1%;溶剂二甲苯41%;加工出了质量稳定的30%苍耳素乳油。3.在小试配方加工乳油的基础上,对生产设备和加工工艺进行系统研究,开展了小规模的乳油中试加工研究,并对加工产品进行质量检测,苍耳素提取液含量≥30%,有效成分分解率2.245%,乳液稳定性(稀释200倍)经检测达到合格(三级),冷贮稳定性、热贮稳定性合格,PH值为5.6,水分含量≤0.3%,结果表明该制剂符合国家标准。4.采用菌丝生长速率法测定了30%苍耳素EC对番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌的毒力并进行了田间药效试验。结果表明:30%苍耳素EC抑制番茄灰霉病菌和黄瓜黑星病菌菌丝生长的EC50值分别为0.4718、0.9586 mg/mL。对两种病菌也有一定的保护作用和治疗作用,且保护作用优于治疗作用。田间药效试验表明:第2次施药7 d后,30%苍耳素EC稀释100倍对两种病害的防效分别为67.76%和56.88%;第2次施药14 d后,30%苍耳素EC对两种病害的防效分别为72.03%和60.12%,50%扑海因WP 1000倍液对两种病害的防效分别为64.17%和62.07%。30%苍耳素EC 100倍液对番茄灰霉病的防效显著高于50%扑海因WP防效,对黄瓜黑星病的防效与对照药剂50%扑海因WP无显著差异。30%苍耳素乳油对两种病害有良好的防效,有一定的持效性。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 植物源农药活性成分研究
• 1.1.1 植物源农药活性物质提取与分离
• 1.1.2 植物源农药活性成分的研究
• 1.2 植物源农药制剂的加工及应用
• 1.2.1 植物源农药的开发现状
• 1.2.2 植物源农药加工应用研究
• 1.3 苍耳在农药方面的研究进展
• 1.4 植物源农药加工研究中存在的问题
• 1.5 植物源农药今后发展趋势
• 1.6 本文研究内容与目标
• 1.7 技术路线
• 第二章 苍耳素的提取及分离纯化路线筛选研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 供试材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 三溶剂分离法
• 2.2.2 六溶剂分离法
• 2.2.3 两种分离工艺比较
• 2.3 讨论
• 第三章 30%苍耳素乳油加工配方筛选及加工工艺研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 有效成分含量的确定
• 3.2.2 溶剂和助溶剂的选择
• 3.2.3 乳化剂筛选
• 3.2.4 紫外保护剂筛选
• 3.2.5 30%苍耳素乳油加工小试配方研究
• 3.2.6 30%苍耳素乳油加工标准配方确定
• 3.2.7 30%苍耳素乳油加工工艺
• 3.3 讨论
• 第四章 30%苍耳素乳油制剂加工及中试产品质量检测
• 4.1 材料与仪器
• 4.1.1 材料与菌种
• 4.1.2 药品与仪器
• 4.2 苍耳素乳油中试加工工艺研究
• 4.2.1 苍耳素乳油中试加工工艺流程图
• 4.2.2 乳油质量检测方法
• 4.3 结果分析
• 4.3.1 中试加工工艺
• 4.3.2 乳油质量检测结果
• 4.4 讨论
• 第五章 30%苍耳素乳油室内及田间药效评价
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 供试药剂
• 5.1.2 供试病菌
• 5.1.3 30%苍耳素乳油对供试病菌的药效评价方法
• 5.2 结果与分析
• 5.2.1 30%苍耳素乳油对供试病菌的室内毒力测定结果
• 5.2.2 离体组织测定
• 5.2.3 田间药效试验
• 5.3 结论与讨论
• 第六章 结论与讨论
• 6.1 主要结论
• 6.2 问题与讨论
• 6.2.1 苍耳抑菌活性成分的分离纯化
• 6.2.2 关于苍耳素乳油加工
• 6.2.3 植物源农药苍耳素乳油小试及中试加工
• 6.4 创新点
• 致谢
• 参考文献
• 附录 图版
• 作者简介
• 导师简介