论文摘要
[目的]研究不同类型、不同程度的脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）后脊髓组织内活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平变化和神经细胞凋亡情况及其凋亡相关因子表达变化，探讨ROS在SCI后的作用及其分子机制。[方法]雌性成年SD大鼠204只，采用切割法和改良的Allen’s法在模型动物脊髓第10胸段(T10)制作不同类型、不同程度的SCI模型。实验动物分组情况：假手术组（18只）；半横断切割伤组（6只）；全横断切割伤组（6只）；轻度挫伤组（6只）；中度挫伤组（168只，其中，SCI组84只，SCI加甲基强的松龙（methylprednisolone，MPSS）治疗84只）；采用比色法测定SCI损伤后不同时间段受损脊髓组织的丙二醛（malonyldialdehyed，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dissmutas，SOD）含量；采用BBB评分法评估模型动物肢体运动功能恢复情况；HE染色观察SCI后脊髓组织病理学改变、荧光末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNEL）检测脊髓组织细胞凋亡情况；常规免疫组织化学分析受损脊髓组织区域凋亡相关因子Caspase-3和Bcl-2家族表达变化。[结果] 1)不同程度和类型的SCI后脊髓组织内MDA含量增高、SOD含量降低（P＜0.05）：2)同一类型的SCI脊髓组织内的MDA、SOD含量在不同程度损伤模型之间比较，其含量不与损伤程度呈正相关。3) SCI损伤6h后MDA含量明显增高并维持到伤后5d（P＜0.05），期间在6h、3d出现两次高峰，7d基本恢复正常；SCI后6h TUNEL阳性细胞有增多的趋势（P＞0.05），3-5d达高峰，以后逐渐减少，21d仍有少量阳性细胞，且与假手术组比较有显著性的差异（P＜0.05）；Bcl-2、Bax蛋白伤后6h开始有较多的表达，以后快速增多，5d达高峰，然后逐渐回落。Caspase-3在损伤后6h阳性细胞数有增高趋势，以后持续增多，到伤后3d达最大值，以后逐渐减少。4) SCI加MP治疗组与SCI组比较：MDA含量、细胞凋亡指数、凋亡因子Caspase-3和Bax表达减少，Bcl-2表达增多，并且在部分时间点有显著性差异（P＜0.05）。[结论] 1) ROS水平在不同类型的SCI后都有明显的增高，并且维持近一周的较高水平，因此ROS可能是诱导SCI继发性损伤的重要损伤因子。2) SCI后ROS产生的量并非与损伤的程度成正比。3) ROS水平在SCI后增高可能是原发性损伤和继发性损伤共同作用的结果。4) ROS可能通过影响凋亡因子Caspase-3和Bcl-2家族诱导神经细胞凋亡，从而加重SCI继发性损害。5)在SCI继发性损伤病理过程中可能存在有其它机制诱导神经细胞的凋亡。