性激素受体与VEGF、EGFR及COX-2在结直肠癌肝转移中的作用

论文摘要

背景:结直肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤,近年来其发病率呈增高趋势,肝脏是结直肠癌最常见的转移部位,是结直肠癌患者死亡的主要原因。流行病学调查结果显示,各年龄段女性结直肠癌的患病率均低于男性,结直肠癌肝转移（CRC LM）患者男女性别比例为1.9:1,绝经后的妇女患结肠癌的风险较绝经前妇女高,应用雌激素替代疗法可以减少绝经期妇女患结肠癌的风险30%～40%。目前已经发现性激素参与调节肠粘膜细胞的分化和成熟,且雌激素受体（estrogen receptor, ER）和孕激素受体（progestogen receptor, PR）在大肠正常组织和肿瘤组织中均有表达,提示雌激素及孕激素可能影响这些肿瘤的发生与发展提供了客观依据。另外雌激素（单用或联用孕激素）替代疗法在临床上作为治疗结直肠癌的一种手段已取得一定疗效,由此推测CRC LM可能与性激素水平有关。目的:研究雌激素受体α、雌激素受体β、雄激素受体、孕激素受体在肠癌灶、正常肠粘膜及肝转移灶中的表达,探讨其在结直肠癌肝转移中的作用。材料和方法:病例入选标准:术前未经过放疗、化疗,术前一年之内无服用性激素药物史;剔除标准:切除的肝转移灶小,不能同时满足病理检查和实验研究需要量,收集2000年3月至2008年12月间CRC伴肝转移、并且除肝脏外无其他器官转移的病例,共43例,设为实验组,同时随机选取同期住院接受手术治疗的单纯性CRC病例43例,设为对照组,应用免疫组化SP法和SuperPicTureTM Polymer二步法测定———肠癌灶、正常肠粘膜及肝转移灶中雌激素受体（ERα、ERβ）、孕激素受体（PR）、雄激素受体（AR）的表达。另外收集2005年6月至2008年12月间住院手术治疗的结直肠癌肝转移病例和单纯性结直肠癌病例各30例,应用RT-PCR检测结直肠癌肿瘤组织和正常粘膜组织中ERβmRNA的表达情况。统计学方法:所得资料采用两样本率比较、Fisher确切概率法、χ2分割法计算多样本率的两两比较以及两小样本均数比较t检验处理,检验水准取α=0.05,由SPSS13.0 for windows软件包完成统计工作。结果:肠癌灶、正常肠粘膜及肝转移病灶均未检测到ERα蛋白表达。肝转移灶表达ERβ蛋白,其表达率13.2%（5/43）,低于肠癌病灶ERβ蛋白表达率36.0%（31/86）,差异有统计学意义（P<0.05）,与肝转移组正常肠粘膜ERβ蛋白表达率60.5%（26/43）比较,差异有统计学意义（P<0.05）。实验组和对照组肠癌灶ERβ蛋白表达率分别为34.9% ,37.2% ,二者差异无统计学意义,P>0.05,两组正常肠粘膜ERβ蛋白表达率分别为60.5% ,62.8% ,二者差异无统计学意义,P>0.05。实验组和对照组肠癌灶ERβ蛋白表达率均明显低于正常肠粘膜,P<0.05。肝转移灶PR蛋白表达率4.7%（2/43）,低于肠癌病灶PR蛋白表达率40.7%（35/86）,差异有统计学意义（P<0.05）,与肝转移组正常肠粘膜PR蛋白表达率55.8%（19/43）比较,差异有统计学意义（P<0.05）。实验组和对照组肠癌灶PR蛋白表达率分别为39.5%（17/43）,41.9%（18/43）,二者差异无统计学意义,P>0.05,两组正常肠粘膜PR蛋白表达率均为55.8%（14/43）,无差异。实验组和对照组肠癌灶PR蛋白表达率均明显低于正常肠粘膜,P<0.05。肝转移灶中AR蛋白表达率7.0%低于肠癌病灶AR蛋白表达率27.9%（24/86）,差异有统计学意义（P<0.05）,与同组正常肠粘膜AR蛋白表达率23.3%比较,差异无统计学意义（P>0.05）。实验组和对照组肠癌灶AR蛋白表达率分别为23.3%（10/30）,32.6%（14/30）,二者差异无统计学意义,P>0.05,两组正常肠粘膜AR蛋白表达率分别为23.3%（10/30）和37.2%（16/30）,差异无统计学意义。实验组和对照组肠癌灶和正常肠粘膜AR蛋白表达率差异无统计学意义。ERβmRNA在实验组肠癌组织中的表达率为33.3%（10/30）,低于其该组正常肠粘膜中的表达率60%（18/30）,差异有统计学意义,P<0.05,ERβmRNA在对照组肠癌组织中的表达率为43.3%（13/30）,低于其该组正常肠粘膜中的表达率73.3%（22/30）,差异有统计学意义,P<0.05,ERβmRNA在实验组和对照组肠癌灶或正常肠粘膜间表达差异无统计学意义,P>0.05。结论:ERβ蛋白是CRC肝转移灶中的优势ER,CRC肝转移灶和肠癌癌灶均未发现ERα蛋白表达。实验组中,肝转移灶、肠癌灶和正常肠粘膜的ERβ蛋白和PR蛋白表达率呈依次升高的趋势,ERβmRNA在结直肠癌与相应正常肠粘膜中的的表达也有类似趋势。随着肿瘤进展,ERβmRNA表达降低,由此所致ERβ蛋白逐渐减少,推测ERβ对于结直肠癌肝转移是保护因子。PR可能协同作用于ERβ并对结直肠癌肝转移起保护性作用。AR在结直肠癌中有低表达,其在结直肠癌肝转移中的作用尚不明确。背景:结直肠癌是常见消化道恶性肿瘤,发病率在男性恶性肿瘤中排第四位,女性排第三位,近年来,随着我国生活条件和饮食习惯的改变,结直肠癌发病率呈逐年上升趋势,且75%的病例发生于普通人群。虽然随着研究的深入和诊疗技术的提高,结直肠癌的早期诊断率和术后生存率有所提高,但仍未取得突破性进展,总体状况仍难令人满意。转移和复发是影响CRC预后的主要原因,肝脏是CRC最常见的转移部位,初诊时已有20%～40%的病人发生肝转移,此后20%～25%的患者发生异时性肝转移。提高CRC早期诊断率和治愈率是目前面对的一大难题,选择有效的预防药物及初步探讨其作用机制成为当前一项十分迫切的任务。目的:探讨VEGF和EGFR在结直肠癌肝转移中的作用及其与临床病理特征之间的关系。方法:按第一部分选择和剔除标准,随机选择43例结直肠癌肝转移患者作为实验组,43例结直肠癌无他处转移的患者作为对照组,取手术切除原发肠癌病灶和相应癌旁正常肠粘膜组织及肝转移组织,应用免疫组织化学检测VEGF和EGFR蛋白的表达情况,统计分析VEGF和EGFR在两组病例中肝转移病灶、肠癌病灶及正常肠粘膜中的表达差异,及其与肿瘤临床病理特征的关系。统计学方法:所得资料采用两样本率比较、Fisher确切概率法、χ2分割法计算多样本率的两两比较,不同组间阳性率差异比较用χ2检验,相关分析采用Spearman等级相关分析,检验标准P<0.05有统计学意义,用SPSS13.0 for windows软件包完成统计学分析。结果:（1）VEGF蛋白在实验组中肠癌病灶的阳性表达率为76.7%（33/43）,高于该组的肝转移病灶的58.1%（25/43）和正常肠粘膜的9.3%（4/43）,差异有统计学意义,P<0.05;实验组肠癌病灶VEGF蛋白的阳性表达率高于对照组的53.5%（23/43）,差异有统计学意义,P<0.05;实验组和对照组正常肠粘膜VEGF蛋白率都比较低,分别为9.3%和0,差异无统计学意义,P>0.05;（2）EGFR蛋白在实验组中肠癌病灶的阳性表达率为79.1%（34/43）,高于该组的肝转移病灶的48.8%（21/43）和正常肠粘膜的11.6%（5/43）,差异有统计学意义,P<0.05;实验组肠癌病灶EGFR蛋白的阳性表达率高于对照组的58.1%（25/43）,差异有统计学意义,P<0.05;实验组和对照组正常肠粘膜EGFR蛋白率都比较低,分别为11.6%（5/43）和0,差异无统计学意义,P>0.05;（3）将两组病例综合,分析VEGF和EGFR蛋白表达率与结直肠癌临床病理特征的关系,发现VEGF和EGFR蛋白表达与性别、年龄、肿瘤部位、组织类型、浸润深度无相关性,与肿瘤分化程度呈负相关,与肝转移和淋巴结转移呈正相关,且两者有相关性。结论:（1）VEGF和EGFR异常表达是结直肠癌发生肝转移中的一个重要环节。（2）VEGF和EGFR可作为结直肠癌有无转移的生物学指标,有助于预测CRC肝转移的发生和判断CRC肝转移的预后。目的:应用免疫组织化学技术检测COX-在结直肠癌发生肝转移病例中的表达情况,探讨COX-2对结直肠癌肝转移的影响。方法:按照论文第一部分的入选标准和剔除标准,收集43例结直肠癌肝转移病例作为实验组,同时随机选取单纯性结直肠癌病例作为对照组。免疫组化SuperPic Ture TMPolymer二步法检测——肝转移灶、肠癌灶和正常肠粘膜内COX-2蛋白的表达情况。统计学方法:所得资料采用两样本率比较、Fisher确切概率法、χ2分割法计算多样本率的两两比较,不同组间阳性率差异比较用χ2检验,相关分析采用Spearman等级相关分析,检验标准P<0.05有统计学意义,用SPSS13.0 for windows软件包完成统计学分析。结果:肝转移灶中有较高COX-2蛋白表达率,为44.2%（19/43）,但低于肠癌灶的79.1%（34/43）,差异有统计学意义（P<0.05）,实验组肠癌灶的蛋白表达率79.1%（34/43）远高于正常肠粘膜的11.6%（5/43）,差异有显著意义,P<0.05,实验组肠癌灶COX-2蛋白表达率与对照组肠癌灶COX-2蛋白表达率65.1%（28/43）比较,无明显差异,P>0.05。将两组病例综合,分析COX-2蛋白表达率与临床病理因素的关系,发现COX-2蛋白过表达与肿瘤分化程度呈负相关,与淋巴结转移和肝转移呈正相关,而与性别、年龄、肿瘤部位、组织类型和浸润深度无明确相关关系。结论:COX-2蛋白在结直肠癌组织中过表达,尤其以肝转移组结直肠癌组织中的COX-2蛋白表达为高,可能在结直肠癌的发生发展中起到重要作用。1. COX-2蛋白表达水平与肿瘤的分化程度和淋巴结转移呈正相关。2. COX-2蛋白表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤部位及浸润深度无明确相关性。3.可以根据COX-2的表达情况判断肿瘤的恶性程度,它在结直肠癌肝转移中的表达为其靶向治疗提供了理论依据,调控COX-2蛋白表达以防止肿瘤的应用前景更加普遍。

论文目录

• 英文缩略词一览表
• 第一部分中文摘要
• 第一部分英文摘要
• 第二部分中文摘要
• 第二部分英文摘要
• 第三部分中文摘要
• 第三部分英文摘要
• 论文正文
• 前言
• 第一部分：性激素受体在结直肠癌肝转移中的作用
• 第一章 ERα、ERβ、PR 和AR 蛋白在结直肠癌肝转移中的表达
• 材料与方法
• 结果
• 第二章 结直肠癌肝转移组织中ERβmRNA 表达
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第二部分：VEGF 和EGFR 蛋白在结直肠癌肝转移中的作用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第三部分 COX-2 蛋白在结直肠癌肝转移中的作用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 全文总结
• 创新点及展望
• 附图
• 参考文献
• 综述一 性激素与结直肠癌及肝转移关系的研究进展
• 综述二 VEGF、EGFR 和COX-2 与结直肠癌肝转移的关系
• 论文发表登记
• 致谢