黔产药用植物艳山姜内生真菌的研究

论文摘要

贵州省中药资源十分丰富,资源名列全国第4位,是驰名中外的地道药材之乡。有研究表明,植物的内生真菌可能产生与宿主相同或相似的代谢产物,因而从植物内生真菌中提取新药,是目前一个新兴的方向。本研究从内生真菌的角度出发,希望在既不破坏现有的黔产药用植物资源的基础上,还能开发出有益于医药事业的天然活性物质。论文工作涉及三部分:（1）对艳山姜等6种黔产药用植物内生真菌进行分离;（2）开展内生真菌的小量培养,对其提取物进行抗菌活性筛选;（3）利用活性跟踪法,对艳山姜的1株内生真菌主要活性成分展开研究。取得的结果如下:1、从艳山姜等6种黔产药用植物中分离得到102株内生真菌。2、以多种菌为测试菌株,对分离得到的内生真菌代谢产物活性进行初筛,发现从艳山姜中分离出来的一株内生真菌SRT2,其发酵菌丝体提取物对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）具有较好的抗菌活性。3、从黔产药用植物艳山姜中分离得到一株内生真菌SRT2,根据菌株的形态学特征,经初步鉴定为聚端孢霉属（Trichothecium spp.）。SRT2经发酵培养,利用多种层析手段对其菌丝体提取物的乙酸乙酯部分进行分离和纯化,得到了9个化合物,通过理化方法及光谱分析对化合物进行结构鉴定,鉴定结果为:7-deoxyrosenonolactone（SR-1）、麦角甾醇（SR-2）、过氧化麦角甾醇（SR-3）、6-hydroxyrosenonolactone（SR-4）、rosenonolactone（SR-5）、正三十二烷酸（SR-6）、正十六烷酸（SR-7）、胡萝卜苷（SR-8）和蔗糖（SR-9）。经活性复筛,发现化合物6-hydroxyrosenonolactone和7-deoxyrosenonolactone对枯草芽孢杆菌株（Bacillussubtilis）,藤黄微球菌（Micrococcus luteus）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）菌株有较好的的抗菌活性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 一、综述
• 1. 内生真菌的概念
• 2. 内生真菌与宿主的关系
• 3. 内生真菌研究现状
• 4. 内生真菌的生物活性
• 5. 内生真菌成为抗菌活性物质重要来源的可能性
• 6. 存在的问题与展望
• 二、研究目的和意义
• 三、艳山姜等黔产药用植物内生真菌的分离
• 1. 材料和实验方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验材料
• 1.1.2 培养基
• 1.1.3 主要药品及仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 菌种的分离
• 1.2.2 菌种的纯化及保存
• 2. 结果与分析
• 四、艳山姜等药用植物内生真菌代谢产物的抗菌活性研究
• 1. 材料和实验方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 测试菌种
• 1.1.2 培养基
• 1.1.3 主要药品及仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 内生真菌代谢产物粗提物的提取制备
• 1.2.2 内生真菌代谢产物抗菌活性检测的方法
• 2. 结果与分析
• 五、艳山姜内生真菌代谢产物活性单体的研究
• 1. 材料和实验方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验菌种
• 1.1.2 培养基
• 1.1.3 主要药品、试剂及仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 艳山姜内生真菌的发酵培养
• 1.2.2 艳山姜内生真菌代谢产物粗提物的提取制备
• 1.2.3 艳山姜内生真菌代谢产物的TLC活性跟踪
• 1.2.4 菌株的描述及鉴定
• 1.2.5 艳山姜内生真菌代谢产物单体的分离
• 1.2.6 艳山姜内生真菌代谢产物单体化合物结构鉴定
• 1.2.7 艳山姜内生真菌代谢产物单体化合物抗菌实验
• 2. 结果与分析
• 2.1 艳山姜内生真菌代谢产物TLC活性跟踪结果
• 2.2 艳山姜内生真菌的鉴定结果
• 2.3 艳山姜内生真菌代谢产物的结构鉴定
• 2.3.1 结构鉴定
• 2.3.2 化合物结构
• 2.4 艳山姜内生真菌代谢产物抗菌活性研究
• 六、讨论
• 七、小结
• 致谢
• 参考文献
• 附录