食管鳞癌染色体畸变研究及候选扩增癌基因的鉴定

论文摘要

食管癌的死亡率在我国恶性肿瘤中居第四位,鳞状细胞癌是我国食管癌的主要病理类型,总体五年生存率仅约10%。为鉴定与食管癌关系密切的基因,本研究从染色体畸变的角度出发,在实验室前期工作及相关文献的基础上,统计分析食管癌染色体畸变谱,发现3、5、8号染色体重排及着丝粒断裂再重组可能是最常见的结构改变,3q、8q增益是最常见的数目异常。本研究首先选择食管癌中结构改变较多、扩增频率最高的染色体区段3q进行分析。依据本课题组前期对27例标本3q24-q29（跨越75Mb）的28个位点的扩增频率分析,我们绘制了3q26-q27区段23个位点扩增频率改变的趋势图。鉴定了3q26.2、3q26.31及3q26.33三个扩增子,在扩增子内挑选了MDS1,PRKCI,ECT2和PIK3CA四个候选基因进一步分析。双色荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测108例食管鳞癌发现MDS1,PRKCI,ECT2和PIK3CA的扩增率分别是53.5%、53.4%、40.0%和32.3%,MDS1和PRKCI在食管癌组织及细胞系中均存在共扩增的现象,但只有PRKCI基因的扩增与浸润深度（P=0.043）、淋巴结转移（P=0.015）及病理分期（P=0.002）相关。定位于3q26.2上的PRKCI（也称为PKCι）基因编码的蛋白是一种不典型的丝氨酸/苏氨酸激酶,目前对其在具体肿瘤中作用的研究还相对较少,为此我们对该基因在食管癌中的作用进行了深入的研究。对31例食管癌标本同时进行了FISH检测和免疫组织化学分析,结果显示PRKCI扩增与过表达存在相关性（P=0.009）,食管鳞癌中PRKCI拷贝数增加是PRKCI蛋白表达上调的重要机制。食管癌组织微阵列的免疫组化分析发现PRKCI基因过表达与淋巴结转移（P=0.002）和肿瘤分期（P=0.004）相关。多变量统计分析进一步说明PRKCI基因是3q26上与食管癌淋巴结转移相关的独立因素。以上结果提示,染色体3q26上的PRKCI基因,通过扩增导致的PRKCI失调可能在食管癌演进中发挥重要作用,PRKCI可能成为判断转移及肿瘤分期的候选分子指标。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 一、材料和方法
• （一）、实验材料
• （二）、实验方法
• 二、结果与分析
• （一）、食管鳞癌的染色体畸变谱分析
• （二）、食管鳞癌染色体3q的拷贝数分析
• （三）、PRKCI基因在食管癌中的改变
• 三、讨论
• （一）、食管癌染色体畸变的研究策略
• （二）、3q26拷贝数目异常与食管癌的关系
• （三）、PRKCI基因在食管癌中发挥的作用
• （四）、应用前景
• 四、小结
• 参考文献
• 文献综述 实体瘤与染色体畸变研究
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历