非巴比妥类静脉全身麻醉药对大鼠皮层星形胶质细胞表达凝血酶敏感蛋白1及神经元突触数目影响的实验研究

非巴比妥类静脉全身麻醉药对大鼠皮层星形胶质细胞表达凝血酶敏感蛋白1及神经元突触数目影响的实验研究

论文摘要

目的:通过体外细胞培养实验,研究依托咪酯、咪达唑仑及氯胺酮对星形胶质细胞表达凝血酶敏感蛋白的影响。并观察依托咪酯和氯胺酮对共培养神经元突触的影响。方法:1)分离纯化培养SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞,并分别用依托咪酯、咪达唑仑及氯胺酮进行干预。药物设立不同浓度及不同时间组。利用RT-PCR和Western blotting技术分别检测星形胶质细胞表达TSP在基因和蛋白水平的变化;2)建立并优化星形胶质细胞和神经元共培养模型。用依托咪酯和氯胺酮进行处理,利用细胞免疫荧光化学法观察上述药物对神经元突触数目的影响。结果:1)依托咪酯可促进星形胶质细胞表达TSP-1,且具有浓度依赖性和时间依赖性。2)氯胺酮可减少星形胶质细胞分泌TSP-1,但与对照组无统计学差异。3)咪达唑仑对星形胶质细胞表达TSP-1无明显影响。4)依托咪酯可增加共培养神经元的突触数目;氯胺酮可减少共培养神经元的突触数目。两组之间具有统计学差异。结论:1.依托咪酯具有以促进星形胶质细胞TSP-1表达的作用。2.氯胺酮下调星形胶质细胞表达TSP-1,但与对照组相比无统计学差异;咪达唑仑对星形胶质细胞分泌TSP-1无明显影响。3.依托咪酯和氯胺酮可通过影响TSP-1的表达间接作用于神经元,分别对突触数量产生上调和下调的作用。

论文目录

  • 英文缩略词表
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 第一部分 依托咪酯、咪达唑仑及氯胺酮对大鼠皮层星形胶质细胞表达TSP-1的影响
  • 一、材料和方法
  • 1. 大鼠皮层星形胶质细胞的分离与培养
  • 2. 使用静脉全身麻醉药对星形胶质细胞进行处理
  • 3. RT-PCR检测
  • 4. 提取细胞总蛋白
  • 5. Western blotting
  • 二、结果
  • 1. 原代培养的星形胶质细胞
  • 2. 依托咪酯对星形胶质细胞表达TSP-1的影响
  • 3. 咪达唑仑对星形胶质细胞表达TSP-1的影响
  • 4. 氯胺酮对星形胶质细胞表达TSP-1的影响
  • 三、讨论
  • 第二部分 依托咪酯和氯胺酮对共培养神经元突触的影响
  • 一、材料和方法
  • 1. 大鼠皮层神经元的分离与培养
  • 2. 神经元与星形胶质细胞共培养
  • 3. 药物处理和实验分组
  • 4. 免疫细胞化学法检测
  • 5. 图像处理及图像分析
  • 6. 统计分析
  • 二、结果
  • 三、讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 文献综述
  • 参考文献
  • 附录一:主要仪器设备
  • 附录二:主要试剂配制方法
  • 致谢
  • 相关论文文献

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