RNAi CD147溶瘤腺病毒对结直肠癌的靶向治疗作用及机制研究

论文摘要

目的：以复制缺陷型溶瘤腺病毒（H101）为载体，构建携带CD147RNA干扰片段的重组复制缺陷型溶瘤腺病毒，检测与肿瘤增殖、浸润和转移相关的蛋白MCT和MMP的表达，探讨以CD147作为结直肠癌基因治疗靶分子的可行性。方法：以pDC316-EGFP-U6为载体，构建携带CD147shRNA干扰片段的重组腺病毒穿梭质粒。将携带CD147shRNA的重组腺病毒穿梭质粒（pDC316-EGFP-U6/shRNA）与携带了腺病毒大部分基因组的辅助包装质粒（H101）共转染HEK293细胞，利用Cre/loxP（或FLP/frt）重组酶系统的作用实现重组，产生重组腺病毒；将构建好的重组腺病毒分别感染p53基因突变细胞株HCT15和P53正常细胞株HCT8；检测与肿瘤增殖、浸润和转移相关的蛋白表达。结果：重组腺病毒在p53基因突变的肿瘤中能特异性复制并产生复制依赖性细胞毒作用，抑制与肿瘤细胞增殖、侵袭和转移相关蛋白MCT1、MMP的表达，而对p53正常的肿瘤细胞无抑制作用。结论：CD147siRNA重组复制缺陷型溶瘤腺病毒，通过结直肠癌细胞中P53突变介导溶瘤腺病毒的大量复制及与与肿瘤细胞增殖、侵袭和转移相关蛋白表达的抑制作用，特异性的发挥双重杀瘤作用。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 CD147 SHRNA 真核表达载体的构建
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 第二章 携带 CD147 干扰片段重组复制缺陷性溶瘤腺病毒的构建
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 第三章 重组溶瘤腺病毒介导的靶向治疗作用及机制研究
• 3.1 材料
• 3.2 方法
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 在读期间发表的学术论文及研究成果
• 致谢
• 综述
• 参考文献