论文摘要
目的探讨不同时程癫痫持续状态（status epilepticus, SE）对大鼠海马和皮质GABAA受体α1蛋白表达的影响。方法健康成年雄性Sprague-Dawley （SD）大鼠18只,体重250±20g,随机分成对照组、SEl h组和SE2 h组。建立氯化锂-匹罗卡品SE模型。各组脑组织用振动切片机进行矢状位切片,片厚300μm。每只老鼠取3张脑片,用sulfo-NHS-SS-biotin孵育脑片、标记细胞膜蛋白。解剖显微镜下分离海马和皮质组织,分别匀浆,获得海马细胞蛋白和皮质细胞蛋白。采用Bradford法测定蛋白浓度。取不同部位细胞匀浆蛋白150μg与neutravidin beads孵育过夜,离心获得膜蛋白。以GAPDH为细胞内蛋白标志分子,以钠钾ATP酶为细胞和细胞膜蛋白内参,进行Western blot半定量检测,观察SE对海马和皮质GABAA受体α1亚基的细胞和细胞膜表达水平的影响。结果1.氯化锂-匹罗卡品SE模型：12只SD大鼠,91.7%诱发出SE,死亡率为9.3%,总成功率为83.3%。2.SE对GABAA受体αl亚基细胞表达水平的影响（1）海马区：与对照组相比较,SE1 h组和SE2 h组中GABAA受体αl亚基的细胞表达量无明显变化（P>0.05）。（2）皮质区：与对照组相比较,SE1 h组和SE2 h组中GABAA受体α1亚基的细胞表达量无明显变化（P>0.05）。3.SE对GABAA受体α1细胞膜表达水平的影响（1）海马区：与对照组相比,SE1 h组、SE2 h组GABAA受体α1亚基的细胞膜表达水平均明显下降（P<0.01）,且SE2 h组较SE1 h组下降更明显（P<0.01）；（2）皮质区：与对照组比,SE1 h组GABAA受体αl亚基的细胞膜表达无明显变化（P>0.05）,但SE2 h组中GABAA受体α1亚基的细胞膜表达水平显著下降（P<0.05）。结论1.SE持续时间越长,对GABAA受体α1细胞膜表达水平的影响越显著。2.2小时内SE对海马和皮质区域GABAA受体α1的细胞水平无明显影响。