吡格列酮对STZ诱导的糖尿病大鼠十二指肠病理及免疫炎性指标的影响

论文摘要

目的：以正常大鼠及无干预治疗的STZ诱导的DM大鼠作为对照,观察不同剂量Piog对STZ诱导的DM大鼠十二指肠的病理组织学变化,IL-10和TNF-α的表达,以及T淋巴细胞数目和比值的影响,并与免疫调节剂环孢菌素A（CsA）及胰岛素干预的大鼠相作比较,了解Piog是否通过影响CD4+/CD8+T淋巴细胞比值,TNF-α与IL-10等细胞因子的表达,来预防和控制糖尿病大鼠十二指肠的器官损伤,为临床上应用Piog控制DM及其并发症提供理论依据。方法：健康雄性SD大鼠96只,随机分为Piog小剂量干预组、Piog小剂量加INS干预组、Piog大剂量干预组、Cs A干预组、Cs A加INS干预组、INS干预组、DM无干预组和CON组等8组。除CON组外,其余均由STZ诱导造成DM模型。造模前及成模后每周检测大鼠体重,每月测定血糖,共饲养16周后处死。处死前取血清和尿检测生化指标。对各组大鼠十二指肠,采用HE染色、AB-PAS染色法观察十二指肠杯状细胞；免疫组织化学法检测各组大鼠十二指肠肌层Cajal间质细胞的表达,CD4+、CD8+T淋巴细胞的表达及TNF-α与IL-10的表达水平。结果：1.成功建立了STZ诱导的DM大鼠模型；2. Piog能明显降低血脂和改善肾功能；3.DM组大鼠十二指肠均有不同程度的粘膜固有层充血,水肿,绒毛损伤,各PIO或CsA治疗组大鼠十二指肠病变均有不同程度减轻；4.DM组大鼠十二指肠粘膜层杯状细胞数目明显低于CON组,各PIO或CsA治疗组大鼠十二指肠粘膜层杯状细胞数目均有不同程度增加；5.DM组大鼠十二指肠肌层Cajal间质细胞的数量减少,各PIO或CsA治疗组大鼠十二指肠粘膜层杯状细胞数目均有不同程度增加；6.DM组大鼠十二指肠CD4+T淋巴细胞数量增加,CD8+T淋巴细胞数量减少,且CD4+/CD8+T淋巴细胞比值增加；各PIO或CsA治疗组CD4+T淋巴细胞数量减少,CD8+T淋巴细胞数量增加,且CD4+/CD8+T淋巴细胞比值降低。7.DM组大鼠十二指肠抑炎因子IL-10的量减少,致炎因子TNF-α的量增加；各PIO或CsA治疗组抑炎因子IL-10的量增加,致炎因子TNF-α的量减少。结论：Piog除有INS增敏和降糖作用外,Piog能明显降低血脂和改善肾功能；糖尿病大鼠十二指肠粘膜T淋巴细胞亚群的变化和细胞因子IL-10,TNF-α的异常表达提示免疫机制和炎症反应参与了十二指肠的病理组织学损伤,引起十二指肠粘膜层杯状细胞,肌层Cajal间质细胞数目减少,导致糖尿病大鼠十二指肠动力障碍。各PIO或CsA治疗能改善十二指肠粘膜T淋巴细胞亚群的变化和细胞因子的异常表达,减轻了器官的炎症反应,增加杯状细胞和Cajal间质细胞数目。因此,Piog不但可作为一种降糖药物,而且可作为一种免疫调节剂,用于预防和控制DM的器官免疫损伤,减少功能障碍的发生。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、吡格列酮对STZ诱导糖尿病大鼠十二指肠的病理组织改变的影响
• 1.1 对象和方法
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 主要试剂
• 1.1.3 主要仪器设备
• 1.1.4 溶液及药物配制
• 1.1.5 实验分组及糖尿病大鼠模型的制备
• 1.1.6 大鼠一般状况和生化指标检测
• 1.1.7 动物处死和获取标本
• 1.1.8 生化指标检测
• 1.1.9 组织病理学检测
• 1.1.10 统计学处理
• 1.2 结果
• 1.2.1 各组大鼠体重变化结果
• 1.2.2 各组大鼠血糖变化结果
• 1.2.3 各组大鼠胰岛素变化结果
• 1.2.4 各组大鼠肾脏功能结果
• 1.2.5 各组大鼠肝脏功能结果
• 1.2.6 各组大鼠十二指肠HE染色结果
• 1.2.7 各组大鼠十二指肠杯状细胞Ab-PAS染色结果
• 1.2.8 各组大鼠肌层cajal间质细胞的免疫组化染色结果
• 1.3 讨论
• 1.3.1 链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型
• 1.3.2 体重、血糖和胰岛素变化
• 1.3.3 肾、肝功能变化
• 1.3.4 十二指肠杯状细胞数目的变化
• 1.3.5 十二指肠肌层cajal间质细胞变化
• 1.3.6 吡格列酮的治疗作用
• 1.4 小结
• 二、吡格列酮对STZ诱导的糖尿病大鼠十二指肠TNF-α、IL-10、CD4+、CD8+T淋巴细胞的影响
• 1.1 对象和方法
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 主要试剂
• 1.1.3 主要仪器设备
• 1.1.4 实验方法
• 1.1.5 统计学处理
• 1.2 结果
• 1.2.1 各组大鼠十二指肠TNF-α的表达情况
• 1.2.2 各组大鼠十二指肠IL-10的表达情况
• +、CD8⁺T淋巴细胞的表达情况'>1.2.3 各组大鼠十二指肠CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞的表达情况
• 1.3 讨论
• 1.3.1 TNF-α的作用与十二指肠损伤
• 1.3.2 IL-10的作用与十二指肠损伤
• 1.3.3 各治疗组对TNF-α、IL-10表达的影响比较
• +,CD8⁺T淋巴细胞数量和CD4⁺/CD8⁺比值的变化'>1.3.4 十二指肠粘膜CD4⁺,CD8⁺T淋巴细胞数量和CD4⁺/CD8⁺比值的变化
• 1.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附图
• 综述
• 糖尿病肠动力障碍与Cajal间质细胞的关系
• 综述参考文献
• 致谢