论文摘要
F-2毒素即玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEA）,是由镰刀菌产生的一种类雌激素霉菌毒素,具有很强的生殖毒性和致畸作用,同时能够降低家畜的采食量,导致生长下降,免疫抑制,繁殖障碍,降低畜禽产品的品质,给畜牧业带来很大的经济损失,现已成为养猪业的第二杀手,甚至威胁着人类的健康,为此我们进行了此项研究。研究目的:探讨中草药提取物茶多酚、绞股蓝对雄性小鼠F-2毒素中毒的控毒研究,并且比较两种药物的抑毒作用,阐明控毒机制。为有效控制F-2毒素的体内毒性,研制有效的控毒制剂提供科学的理论依据。研究方法:本实验采用30日龄左右小白鼠80只,随机分为8组,分别为（Ⅰ）对照组、（Ⅱ）F-2毒素组、（Ⅲ-Ⅴ）F-2毒素+茶多酚低、中、高浓度组、（Ⅵ-Ⅷ）F-2毒素+绞股蓝提取物低、中、高浓度组,每天上午分别予Ⅱ-Ⅷ组小鼠以10μg/0.5ml每只灌胃攻毒F-2毒素,Ⅰ组小鼠灌胃10%酒精0.5ml/只,下午Ⅰ、Ⅱ组分别灌胃0.5ml/只蒸馏水,Ⅲ-Ⅴ组小鼠分别灌胃相应浓度的茶多酚溶液0.5ml/只,Ⅵ-Ⅷ组小鼠分别灌胃相应浓度的绞股蓝提取物水溶液0.5ml/只,连续15天,实验结束称取睾丸重量,比较各组体重、睾丸质量及睾丸脏器系数的变化;采用病理组织学方法检测睾丸生殖细胞的形态学变化;采用TUNEL法检测睾丸生殖细胞凋亡情况;用常规方法检测睾丸组织SOD活性及MDA含量的变化;用半定量RT-PCR法检测睾丸P53、Bcl-2、Bax基因的表达。研究结果:小鼠攻毒F-2毒素后睾丸重量与睾丸脏器系数与对照组、茶多酚控毒组、绞股蓝控毒组比较明显降低,而体重无显著性变化。TUNEL法检测生殖细胞凋亡结果为:茶多酚、绞股蓝对F-2毒素致睾丸生殖细胞凋亡有一定的控毒效果,并随着剂量的增加,凋亡率呈下降趋势。SOD活性与MDA含量检测结果,F-2毒素组SOD活性显著降低,茶多酚各剂量组、绞股蓝各剂量组均与F-2毒素组呈极显著差异（P＜0.01）,且随着茶多酚、绞股蓝剂量增大,SOD活性呈上升趋势;F-2毒素组MDA含量明显升高,其余各组与F-2毒素组比较差异均极显著（P＜0.01）,随着各组剂量增加,MDA含量逐渐减少。用RT-PCR半定量法检测睾丸组织P53、Bcl-2、Bax蛋白表达,检测结果为:对照组各基因蛋白表达正常,F-2毒素组P53、Bax表达均高于对照组,Bcl-2则明显的低于对照组。利用茶多酚、绞股蓝控毒后,各控毒组的P53、Bax的表达量与毒素组比较明显降低,Bcl-2表达升高,均呈现显著差异,且呈现剂量效应关系。研究结论:①F-2毒素能促进雄性小鼠睾丸生殖细胞的凋亡,茶多酚、绞股蓝提取物对F-2毒素引起的睾丸生殖细胞凋亡有一定的控毒作用;②F-2毒素能使小鼠睾丸组织中SOD活性降低及MDA含量增加,而茶多酚、绞股蓝提取物能抑制F-2毒素对机体的强氧化作用,增强睾丸组织中SOD活性,减少MDA的含量;③P53、Bcl-2、Bax等基因参与了雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡的调控,F-2毒素能增强P53、Bax蛋白表达,抑制Bcl-2基因表达。茶多酚、绞股蓝提取物能有效的增强Bcl-2基因表达,使P53、Bax蛋白表达减少;④茶多酚、绞股蓝提取物对F-2毒素毒性作用的控制主要是因其强抗氧化作用和影响相关基因的表达而实现的。
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