尹玉琨:低频脉冲电磁场对人脂肪源干细胞增殖及成骨分化的影响论文

尹玉琨:低频脉冲电磁场对人脂肪源干细胞增殖及成骨分化的影响论文

本文主要研究内容

作者尹玉琨(2019)在《低频脉冲电磁场对人脂肪源干细胞增殖及成骨分化的影响》一文中研究指出:研究背景:电磁场由相互依存的电场和磁场共同组成,其普遍存在于自然界和生物界,对生物学过程有着广泛的影响。在医学领域,运用脉冲电磁场治疗骨折延迟愈合和骨不连已有40多年的历史。低频脉冲电磁场(PEMF)可用于治疗骨不连、骨质疏松和骨关节疾病,促进骨折愈合,并且以其无创伤、无感染、治疗方便、副作用小等优点日益受到人们的关注与重视,而用其治疗骨质疏松患者,可有效提高骨矿密度。这些发现使脉冲电磁场促进成骨的特性得到了广泛认可。成骨是一个有着复杂调控机制的生物学过程,其包含了骨髓间充质干细胞(BMSCs)等前体细胞向成骨细胞的分化以及成骨细胞分泌骨基质并矿化后形成骨组织的过程。成骨细胞是成骨的直接功能细胞。研究表明,脉冲电磁场对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化、骨基质合成、生长因子的合成和分泌等均具有正性刺激作用。然而与BMSCs相比,脂肪来源的干细胞(ASCs)具有一些更吸引人的临床应用特征,例如丰富的来源,可在脂肪抽吸物中提取干细胞;更快的生长周期;提取过程中受试者更少的不适和手术期间的发病率。ASCs可以分化为成骨细胞,肌细胞,软骨细胞和其他细胞类型。因此,ASCs是治疗PEMF的临床工作的良好替代方案。然而关于脉冲电磁场对于ASCs在成骨方面的作用的研究任存在欠缺。研究目的:本实验使用脂肪源干细胞作为研究促成骨细胞的体外研究模型,试图阐明以下问题:第一,PEMF能否促进ASCs脂肪源干细胞的增殖;第二,PEMF对ASCs脂肪源干细胞向成骨分化方面是否有作用;第三,PEMF对ASCs脂肪源干细胞向成骨分化具体作用。材料与方法:将人ASCs分为对照组(无PEMF暴露)和实验组(每天2小时进行PEMF照射暴露)。脉冲电磁场参数为场强1mT,频率50Hz,本实验研究中我们从几个方面检测了 PEMF对促进细胞增殖和成骨分化的影响:我们通过CCK-8细胞增殖试验证明PEMF对ASCs细胞增殖及凋亡有无影响;为了证明PEMF对对ASCs向成骨分化方面的影响,我们分别对实验组设置1周、2周、3周不同PEMF刺激时间,通过使用ALP染色检测成骨分化特殊指标碱性磷酸酶的表达,使用RNA提取和qRT-PCR实验方法分别对成骨表达特殊基因OPN(骨桥蛋白),OCN(骨钙蛋白),Runx-2(转录因子Runxx家族成员之一)的表达进行检测,并通过Western蛋白免疫印迹和免疫荧光染色实验对其相应成骨相关蛋白的表达进行检测。结果:首先,在PEMF的特异强度(1 mT)和频率(50 Hz)下,通过CCK-8细胞增殖检测实验表明,PEMF可以早期促进人ASCs的细胞增殖。其次,我们证明了PEMF可以促进脂肪源干细胞分化为成骨细胞。在ALP染色实验中,实验组中ASCs经过PEMF照射碱性磷酸酶表达量明显增加。在qRT-PCR实验中,特定PEMF暴露2周后实验组OPN,OCN,Runx-2成骨相关基因表达明显增加,通过Western印迹和免疫荧光染色测定,经过较长时间(3周)的PEMF处理后,相应成骨相关蛋白的表达也增加。结论:我们首次发现PMEF可在早期刺激hASCs的细胞增殖,随后促进骨相关基因表达和诱导相关蛋白的表达以刺激成骨分化。

Abstract

yan jiu bei jing :dian ci chang you xiang hu yi cun de dian chang he ci chang gong tong zu cheng ,ji pu bian cun zai yu zi ran jie he sheng wu jie ,dui sheng wu xue guo cheng you zhao an fan de ying xiang 。zai yi xue ling yu ,yun yong mai chong dian ci chang zhi liao gu she yan chi yu ge he gu bu lian yi you 40duo nian de li shi 。di pin mai chong dian ci chang (PEMF)ke yong yu zhi liao gu bu lian 、gu zhi shu song he gu guan jie ji bing ,cu jin gu she yu ge ,bing ju yi ji mo chuang shang 、mo gan ran 、zhi liao fang bian 、fu zuo yong xiao deng you dian ri yi shou dao ren men de guan zhu yu chong shi ,er yong ji zhi liao gu zhi shu song huan zhe ,ke you xiao di gao gu kuang mi du 。zhe xie fa xian shi mai chong dian ci chang cu jin cheng gu de te xing de dao le an fan ren ke 。cheng gu shi yi ge you zhao fu za diao kong ji zhi de sheng wu xue guo cheng ,ji bao han le gu sui jian chong zhi gan xi bao (BMSCs)deng qian ti xi bao xiang cheng gu xi bao de fen hua yi ji cheng gu xi bao fen bi gu ji zhi bing kuang hua hou xing cheng gu zu zhi de guo cheng 。cheng gu xi bao shi cheng gu de zhi jie gong neng xi bao 。yan jiu biao ming ,mai chong dian ci chang dui gu sui jian chong zhi gan xi bao xiang cheng gu xi bao fen hua 、gu ji zhi ge cheng 、sheng chang yin zi de ge cheng he fen bi deng jun ju you zheng xing ci ji zuo yong 。ran er yu BMSCsxiang bi ,zhi fang lai yuan de gan xi bao (ASCs)ju you yi xie geng xi yin ren de lin chuang ying yong te zheng ,li ru feng fu de lai yuan ,ke zai zhi fang chou xi wu zhong di qu gan xi bao ;geng kuai de sheng chang zhou ji ;di qu guo cheng zhong shou shi zhe geng shao de bu kuo he shou shu ji jian de fa bing lv 。ASCske yi fen hua wei cheng gu xi bao ,ji xi bao ,ruan gu xi bao he ji ta xi bao lei xing 。yin ci ,ASCsshi zhi liao PEMFde lin chuang gong zuo de liang hao ti dai fang an 。ran er guan yu mai chong dian ci chang dui yu ASCszai cheng gu fang mian de zuo yong de yan jiu ren cun zai qian que 。yan jiu mu de :ben shi yan shi yong zhi fang yuan gan xi bao zuo wei yan jiu cu cheng gu xi bao de ti wai yan jiu mo xing ,shi tu chan ming yi xia wen ti :di yi ,PEMFneng fou cu jin ASCszhi fang yuan gan xi bao de zeng shi ;di er ,PEMFdui ASCszhi fang yuan gan xi bao xiang cheng gu fen hua fang mian shi fou you zuo yong ;di san ,PEMFdui ASCszhi fang yuan gan xi bao xiang cheng gu fen hua ju ti zuo yong 。cai liao yu fang fa :jiang ren ASCsfen wei dui zhao zu (mo PEMFbao lou )he shi yan zu (mei tian 2xiao shi jin hang PEMFzhao she bao lou )。mai chong dian ci chang can shu wei chang jiang 1mT,pin lv 50Hz,ben shi yan yan jiu zhong wo men cong ji ge fang mian jian ce le PEMFdui cu jin xi bao zeng shi he cheng gu fen hua de ying xiang :wo men tong guo CCK-8xi bao zeng shi shi yan zheng ming PEMFdui ASCsxi bao zeng shi ji diao wang you mo ying xiang ;wei le zheng ming PEMFdui dui ASCsxiang cheng gu fen hua fang mian de ying xiang ,wo men fen bie dui shi yan zu she zhi 1zhou 、2zhou 、3zhou bu tong PEMFci ji shi jian ,tong guo shi yong ALPran se jian ce cheng gu fen hua te shu zhi biao jian xing lin suan mei de biao da ,shi yong RNAdi qu he qRT-PCRshi yan fang fa fen bie dui cheng gu biao da te shu ji yin OPN(gu qiao dan bai ),OCN(gu gai dan bai ),Runx-2(zhuai lu yin zi Runxxjia zu cheng yuan zhi yi )de biao da jin hang jian ce ,bing tong guo Westerndan bai mian yi yin ji he mian yi ying guang ran se shi yan dui ji xiang ying cheng gu xiang guan dan bai de biao da jin hang jian ce 。jie guo :shou xian ,zai PEMFde te yi jiang du (1 mT)he pin lv (50 Hz)xia ,tong guo CCK-8xi bao zeng shi jian ce shi yan biao ming ,PEMFke yi zao ji cu jin ren ASCsde xi bao zeng shi 。ji ci ,wo men zheng ming le PEMFke yi cu jin zhi fang yuan gan xi bao fen hua wei cheng gu xi bao 。zai ALPran se shi yan zhong ,shi yan zu zhong ASCsjing guo PEMFzhao she jian xing lin suan mei biao da liang ming xian zeng jia 。zai qRT-PCRshi yan zhong ,te ding PEMFbao lou 2zhou hou shi yan zu OPN,OCN,Runx-2cheng gu xiang guan ji yin biao da ming xian zeng jia ,tong guo Westernyin ji he mian yi ying guang ran se ce ding ,jing guo jiao chang shi jian (3zhou )de PEMFchu li hou ,xiang ying cheng gu xiang guan dan bai de biao da ye zeng jia 。jie lun :wo men shou ci fa xian PMEFke zai zao ji ci ji hASCsde xi bao zeng shi ,sui hou cu jin gu xiang guan ji yin biao da he you dao xiang guan dan bai de biao da yi ci ji cheng gu fen hua 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自南方医科大学的尹玉琨,发表于刊物南方医科大学2019-09-02论文,是一篇关于脉冲电磁场论文,增殖论文,成骨分化论文,人脂肪源干细胞论文,南方医科大学2019-09-02论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自南方医科大学2019-09-02论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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