血管钙化大鼠尾加压素Ⅱ及其受体表达的变化

论文摘要

目的:观察大鼠血管钙化模型心血管组织中尾加压素II （urotensin II, UII）及其受体（urotensin II receptor, UT,或称GPR14）表达的变化,探讨UII及其受体在血管钙化中的意义。方法: 9周龄雄性SD大鼠随机分成4组,每组10只,分别为正常对照组、钙化组（于第一天维生素D3肌注,300,000U/kg,同时尼古丁,25mg/kg,灌胃2次,之后常规饲养）、钙化+L-精氨酸（1g/kg,灌胃4周,每天1次）组及钙化+蛋氨酸（1g/kg,灌胃4周,每天1次）组,4周后进行实验,分别测定大鼠血管钙含量、碱性磷酸酶（ALP）活性及Von Konsa染色以判断血管钙化程度;采用放射免疫法检测大鼠血浆、主动脉和心肌的UII蛋白含量;免疫组织化学法检测心血管组织UII蛋白表达;RT-PCR法检测心血管组织UT mRNA水平。实验结果采用Prism 4统计软件分析。结果:Von Kossa染色可见钙化血管（主动脉）中膜大量黑色颗粒及块状物沉淀,以钙化组及及钙化+蛋氨酸最为明显。与正常对照组比较,大鼠钙化血管钙含量在钙化组、钙化+L-精氨酸组及钙化+蛋氨酸组分别增加2.2倍（P<0.01）、1.8倍（P<0.05）和6.9倍（P<0.01）; ALP活性在钙化组中增加1.7倍（P<0.05）,但钙化+L-精氨酸组及钙化+蛋氨酸组与正常组比较却无统计学差异;血管UII含量在钙化组、钙化+L-精氨酸与钙化+蛋氨酸组分别增加3.0倍、2.6倍及2.9倍（P<0.05）,免疫组化结果显示钙化组、钙化+L-精氨酸组及钙化+蛋氨酸组UII表达高于对照组,结果与放射性免疫结果相一致,但各组血浆UII含量无统计学差异;钙化组织UT mRNA表达上调,在血管中,钙化组、钙化+L-精氨酸与钙化+蛋氨酸组分别增加1.8倍（P<0.05）、1.5倍（P>0.05）及2.7倍（P<0.01）,而心肌mRNA分别增加1.9倍（P<0.05）,1.3倍（P>0.05）及2.2倍（P<0.05）。结论:大鼠心血管钙化组织中UII及其受体表达明显增加,提示UII可能参与了血管钙化的发展过程,UII可能是一种新的促进血管钙化的因子。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词
• 第一章、前言
• 第二章、材料与方法
• 2.1 主要仪器
• 2.2 主要药品与试剂
• 2.3 实验器具的处理
• 2.4 实验动物及分组
• 2.5 动物模型制作及给药方法
• 2.6 取材
• 2.7 组织钙含量的测定
• 2.8 碱性磷酸酶活性的测定
• 2.9 Von Kossa 染色
• 2.10 免疫组织化学染色法检测UII 分布
• 2.11 RT-PCR 检测 UT mRNA
• 2.12 放射免疫法检测 UII 水平
• 2.13 统计分析
• 第三章、实验结果
• 3.1 血管钙化程度和血管钙含量的变化
• 3.2 碱性磷酸酶活性的变化
• 3.3 Von Kossa 染色
• 3.4 心脏体重比
• 3.5 UII 的免疫组织化学染色结果
• 3.6 UT mRNA 表达的变化
• 3.7 UII 含量的变化
• 第四章、讨论
• 4.1 本实验结果表明血管钙化模型制备成功
• 4.2 精氨酸减少血管钙化大鼠模型 UII/UT 的表达
• 4.3 蛋氨酸饮食能够促进血管钙化组织中 UII/UT 的表达
• 4.4 UII/UT 参与血管钙化的可能机制
• 第五章、结论
• 第六章、参考文献
• 第七章、基金资助
• 第八章、致谢
• 第九章、综述
• 第十章、发表论文情况
• 第十一章、本人简历