扇叶铁线蕨孢子离体培养及其快繁体系的建立

论文摘要

本研究采用扇叶铁线蕨（Adiantum flabellulatum L.）作为材料,以扇叶铁线蕨的孢子和无菌孢子体作为外植体,研究了各种不同因素（包括光照、无机盐、蔗糖和储藏时间等）对扇叶铁线蕨孢子萌发的影响;同时研究了不同种类和不同浓度的激素诱导孢子体产生GGB和GGB增殖所需的最适培养条件,建立了扇叶铁线蕨的离体快繁体系,从而为其他同科属的蕨类植物的快繁提供了一定的理论依据。主要研究结果如下:扇叶铁线蕨孢子离体培养的孢子灭菌以70%酒精处理15s、0.1%升汞处理4 min的过滤灭菌方法为佳。1/4MS+15.0g/L～45.0g/L蔗糖为适宜扇叶铁线蕨孢子萌发及原叶体发育的培养基,并且一定的蔗糖浓度有利于分生区的发育和性器官的分化。孢子萌发以光照培养,光照强度1000 lux～1500 lux比暗光培养为好,暗光不利于孢子萌发。低温冷藏有助于扇叶铁线蕨孢子萌发率的提高,冷藏8个月的孢子萌发率最高,8个月之后孢子萌发率极显著下降。扇叶铁线蕨原叶体增殖的最适培养基配方为MS+NAA 0.5 mg/L。扇叶铁线蕨原叶体不完全分化和正常培养方式产生的孢子体数量没有显著差异。MS+BA 1.0 mg/L是最经济高效的诱导扇叶铁线蕨GGB的细胞分裂素浓度,光照条件不影响扇叶铁线蕨GGB的诱导。ZT浓度1.0 mg/L最适合扇叶铁线蕨孢子体的增殖,增殖倍数可达3.6。最适合扇叶铁线蕨GGB增殖的培养基配方为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖倍数高达40以上。诱导GGB分化的最适细胞分裂素浓度为ZT 0.1 mg/L。沙瓶过渡炼苗是较适合的扇叶铁线蕨试管苗移栽方式,可以明显提高扇叶铁线蕨试管苗的移栽成活率至90%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略语表
• 1 前言
• 1.1 蕨类植物简介
• 1.2 观赏蕨类在园林中的应用
• 1.3 观赏蕨类植物组织培养研究进展
• 1.3.1 基本培养基的选择
• 1.3.2 蕨类植物组织培养途径
• 1.3.2.1 以孢子为外植体的途径
• 1.3.2.2 以孢子体为外植体的途径
• 1.3.3 外源激素和糖源对蕨类植物组织培养的影响
• 1.3.3.1 激素对原叶体的增殖与分化的影响
• 1.3.3.2 激素对孢子体材料的组织分化、增殖和成苗的调控
• 1.3.3.3 激素对世代转换的影响
• 1.3.3.4 糖源对蕨类植物的器官分化和形态发生的影响
• 1.3.4 其它因子对蕨类植物组织培养的影响
• 1.3.4.1 pH值的影响
• 1.3.4.2 有机添加物的影响
• 1.3.4.3 光照的影响
• 1.3.4.4 培养方式的影响
• 1.4 蕨类植物孢子萌发影响因素的研究进展
• 1.4.1 光照
• 1.4.2 温度
• 1.4.3 孢子年龄及孢子的表面消毒情况
• 1.4.4 成精子囊素
• 1.4.5 植物激素对孢子萌发的影响
• 1.4.5.1 赤霉素
• 1.4.5.2 乙烯
• 1.4.5.3 茉莉酸
• 1.4.5.4 脱落酸
• 1.4.6 金属离子
• 1.4.7 蔗糖和生长辅助物质
• 1.4.8 盐类
• 1.5 本研究的材料、目的及意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.2.1 扇叶铁线蕨孢子离体培养
• 2.2.1.1 扇叶铁线蕨孢子灭菌
• 2.2.1.2 无机盐和蔗糖对扇叶铁线蕨孢子萌发率的影响
• 2.2.1.3 蔗糖对扇叶铁线蕨原叶体发育的影响
• 2.2.1.4 光照对孢子萌发的影响
• 2.2.1.5 孢子储藏时间对其萌发的影响
• 2.2.2 扇叶铁线蕨原叶体的增殖
• 2.2.3 原叶体的不完全培养
• 2.2.4 细胞分裂素对扇叶铁线蕨孢子体的作用
• 2.2.4.1 BA和KT对扇叶铁线蕨孢子体芽点诱导GGB的影响
• 2.2.4.2 ZT对扇叶铁线蕨孢子体增殖的影响
• 2.2.4.3 光照对扇叶铁线蕨孢子体芽点诱导GGB的影响
• 2.2.5 扇叶铁线蕨GGB的增殖
• 2.2.6 扇叶铁线蕨GGB的分化
• 2.2.7 培养条件
• 2.2.8 数据处理
• 2.2.9 扇叶铁线蕨的移栽
• 3 结果与分析
• 3.1 扇叶铁线蕨孢子离体培养
• 3.1.1 升汞消毒时间对扇叶铁线蕨孢子萌发的影响
• 3.1.2 无机盐和蔗糖对扇叶铁线蕨孢子萌发的影响
• 3.1.3 蔗糖对扇叶铁线蕨原叶体发育的影响
• 3.1.4 光照对孢子萌发的影响
• 3.1.5 孢子储藏时间对其萌发率的影响
• 3.2 不同生长素对原叶体增殖的影响
• 3.3 扇叶铁线蕨原叶体的不完全培养
• 3.4 细胞分裂素对扇叶铁线蕨孢子体的作用
• 3.4.1 BA和KT对GGB诱导的影响
• 3.4.2 ZT对孢子体增殖的影响
• 3.4.3 光照对GGB诱导的影响
• 3.5 扇叶铁线蕨GGB的增殖
• 3.6 扇叶铁线蕨GGB的分化
• 3.7 扇叶铁线蕨的移栽
• 4 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.2 讨论
• 4.2.1 孢子萌发
• 4.2.2 原叶体的发育、增殖及不完全分化
• 4.2.3 孢子体的增殖
• 4.2.4 GGB的诱导和增殖
• 4.2.5 GGB的分化
• 4.2.6 试管苗生根与移栽
• 参考文献
• 致谢