高山离子芥差异蛋白质组学双向电泳技术平台的建立

论文摘要

随着人类基因组计划的实施和推进,生命科学研究已进入了后基因组时代,这一转变的标志就是蛋白质组学的兴起。尽管蛋白质组学研究的技术发展迅速,双向电泳仍然是进行蛋白质样品分离的不可或缺的技术。蛋白质样品的制备是双向电泳技术的关键,也是进行蛋白质组学分析的前提。由于植物组织中所含有的色素、酚类、醌类以及其它多种次生代谢产物的严重干扰,使得电泳结果的分辨率低和重复性差,取得令人满意的双向电泳图谱相对比较困难。因此,建立完善的蛋白质双向电泳技术平台是开展蛋白质组学研究的基础。本研究以高山离子芥（Chorispora bungeana）为材料,构建了一套适于高山离子芥蛋白质组学研究的双向电泳技术平台,即硫脲-丙酮/TCA-甲醇/苯酚提纯法、pH 5-8的IPG预制干胶条、12%的聚丙烯酰胺凝胶、改良的胶体考马斯亮蓝染色法。最终得到符合要求的SDS-PAGE胶,为在蛋白质水平上揭示植物抗低温的分子机制,构建蛋白质水平上的分子调控网络做出一些贡献。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 蛋白质组学技术
• 1.2 植物蛋白质组学
• 1.3 植物器官及组织蛋白质组学
• 1.4 亚细胞蛋白质组学
• 1.4.1 质体蛋白质组学
• 1.4.2 线粒体蛋白质组学
• 1.4.3 细胞核与核仁蛋白质组学
• 1.4.4 细胞壁和细胞外蛋白质组学
• 1.4.5 亚细胞混合物蛋白质组学
• 1.5 生物与非生物胁迫应答蛋白质组学
• 1.5.1 生物胁迫
• 1.5.2 非生物胁迫
• 1.6 翻译后修饰蛋白质组学
• 1.7 蛋白质间的相互作用蛋白质组学
• 1.7.1 非变性凝胶电泳技术
• 1.7.2 亲和层析
• 1.8 总结
• 1.9 立题依据
• 第二章 研究内容
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 化学试剂
• 2.1.2 材料
• 2.1.3 仪器
• 2.1.4 实验方法
• 2.2 实验结果
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 不同蛋白质提纯方法对双向电泳的影响
• 2.2.3 蛋白质的不同上样方式对双向电泳的影响
• 2.2.4 不同pH范围的IPG胶条的选择
• 2.2.5 高山离子芥低温诱导蛋白质组学双向电泳优化体系
• 2.2.6 对高山离子芥蛋白质组学双向电泳优化体系的验证
• 2.3 讨论
• 第三章 结论
• 参考文献
• 在学期间的研究成果
• 致谢