刘艳如:基于空腔填充效应构建伯克霍尔德菌脂肪酶LipA的热稳定性突变体论文

刘艳如:基于空腔填充效应构建伯克霍尔德菌脂肪酶LipA的热稳定性突变体论文

本文主要研究内容

作者刘艳如,李鑫,董盼盼,黄建忠,舒正玉(2019)在《基于空腔填充效应构建伯克霍尔德菌脂肪酶LipA的热稳定性突变体》一文中研究指出:【目的】中温伯克霍尔德菌胞外脂肪酶LipA在工业领域具有重要的应用价值。利用蛋白质工程技术来提高其热稳定性,对开发脂肪酶LipA酶制剂及提高其应用范围及应用效果,具有重要的意义。【方法】利用生物信息学软件Castp、Voronoia和Cave分析LipA分子中存在的空腔及其组成氨基酸残基;利用FoldX软件构建上述氨基酸残基的突变体电子文库,并基于空腔效应(体积变小)、自由能变化值(降低)和空间结构特点等对前述突变体电子文库进行筛选。从突变体电子文库中选择具有代表性的突变体,通过基因工程技术,引入突变。经诱导表达后,实验验证并筛选出热稳定性的突变体。【结果】构建了一个由58个突变体组成的电子文库;并对其中17个代表性的突变体进行了实验验证;筛选到2个热稳定性有明显提高的突变体LipA-His15Pro和LipA-Ala210Val;其叠加突变体LipA-His15Pro/Ala210Val的T5012较野生型LipA提高了8°C,在55°C下的半衰期较野生型脂肪酶LipA提高了23.1倍。【结论】基于空腔填充技术构建热稳定性伯克霍尔德菌胞外脂肪酶LipA突变体,是一种行之有效的策略。

Abstract

【mu de 】zhong wen bai ke huo er de jun bao wai zhi fang mei LipAzai gong ye ling yu ju you chong yao de ying yong jia zhi 。li yong dan bai zhi gong cheng ji shu lai di gao ji re wen ding xing ,dui kai fa zhi fang mei LipAmei zhi ji ji di gao ji ying yong fan wei ji ying yong xiao guo ,ju you chong yao de yi yi 。【fang fa 】li yong sheng wu xin xi xue ruan jian Castp、Voronoiahe Cavefen xi LipAfen zi zhong cun zai de kong qiang ji ji zu cheng an ji suan can ji ;li yong FoldXruan jian gou jian shang shu an ji suan can ji de tu bian ti dian zi wen ku ,bing ji yu kong qiang xiao ying (ti ji bian xiao )、zi you neng bian hua zhi (jiang di )he kong jian jie gou te dian deng dui qian shu tu bian ti dian zi wen ku jin hang shai shua 。cong tu bian ti dian zi wen ku zhong shua ze ju you dai biao xing de tu bian ti ,tong guo ji yin gong cheng ji shu ,yin ru tu bian 。jing you dao biao da hou ,shi yan yan zheng bing shai shua chu re wen ding xing de tu bian ti 。【jie guo 】gou jian le yi ge you 58ge tu bian ti zu cheng de dian zi wen ku ;bing dui ji zhong 17ge dai biao xing de tu bian ti jin hang le shi yan yan zheng ;shai shua dao 2ge re wen ding xing you ming xian di gao de tu bian ti LipA-His15Prohe LipA-Ala210Val;ji die jia tu bian ti LipA-His15Pro/Ala210Valde T5012jiao ye sheng xing LipAdi gao le 8°C,zai 55°Cxia de ban cui ji jiao ye sheng xing zhi fang mei LipAdi gao le 23.1bei 。【jie lun 】ji yu kong qiang tian chong ji shu gou jian re wen ding xing bai ke huo er de jun bao wai zhi fang mei LipAtu bian ti ,shi yi chong hang zhi you xiao de ce lve 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自微生物学报的刘艳如,李鑫,董盼盼,黄建忠,舒正玉,发表于刊物微生物学报2019年08期论文,是一篇关于伯克霍尔德菌论文,脂肪酶论文,空腔填充效应论文,半衰期论文,微生物学报2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自微生物学报2019年08期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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