论文摘要
目的探索人肝癌HepG2细胞株（以下均简称HepG2细胞）培养参数及紫杉醇体外治疗适宜浓度,探讨超声辐照载紫杉醇微泡造影剂对HepG2细胞增殖的抑制,细胞周期的影响和形态学变化及诱导凋亡作用。方法体外培养HepG2细胞,采用形态学观察HepG2细胞生长情况;MTT法检测其生长特性;MTT法检测不同浓度紫杉醇对HepG2细胞的增殖抑制率,并以此确定适宜紫杉醇浓度。实验分4组:空白对照组、紫杉醇组、超声空白微泡组、超声载紫杉醇微泡组;MTT法观察不同时间点各处理组对HepG2细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期分布;透射电镜观察细胞形态学变化;Annexin V-FITC荧光染色检测细胞凋亡。结果在HepG2细胞培养过程中,以1×105/ml细胞数接种,于接种后约24-26小时达到对数生长期。单纯应用一定浓度紫杉醇能抑制HepG2细胞生长,有明显的浓度--效应--时间关系。与其他组比较,超声载紫杉醇微泡组对HepG2细胞的增殖抑制作用最强,将HepG2细胞阻滞在G2/M期;可见细胞凋亡,或凋亡小体形成。结论以1×105/ml细胞数接种细胞,于接种后约24小时可以进行后续实验;紫杉醇对HepG2细胞增殖有抑制作用;根据公式计算及参考文献后续实验紫杉醇剂量为1×10-7mol/L。超声辐照载紫杉醇微泡造影剂对HepG2细胞生长有明显抑制作用,将细胞明显阻滞在G2/M期并诱导其凋亡。
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