水蛭素与阿司匹林合用对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用研究

论文摘要

目的:本研究通过建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,给予阿司匹林、重组水蛭素（rH）预处理,观察脑梗塞灶体积大小、Bcl-2、Bax及其两者比值变化,研究阿司匹林与rH合用对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:健康SD清洁级雄性大鼠80只,随机分成5组;1)假手术组（n=16）,生理盐水;2)对照组（n=16）,生理盐水;3)阿司匹林组（ASA组,n=16）:阿司匹林80mg/kg;4)水蛭素组（n=16）:重组水蛭素0.5mg/kg;5)阿司匹林+水蛭素组（ASA+水蛭素组,n=16）:重组水蛭素0.5 mg/kg+阿司匹林80mg/kg;按分组配制成相同体积的药液同时腹腔注射,1次/日。预处理3天后,（?）大脑中动脉闭塞（MCAO）手术,假手术组仅将线栓插至颈总动脉。参考Bederson评分标准评分。于（?）血2h后实现再灌注,于再灌注后24h断头取脑。将脑片置于2%2,3,5-三苯基氧化四氮唑（TTC）溶液中染色,计算梗死灶体积。或经石蜡包埋后用于免疫组化染色（Bax,Bcl-2）及HE染色。结果:对照组和各给药组缺血病灶多位于大脑中动脉支配区的额顶叶皮层和尾壳核。ASA+水蛭素组与对照组、ASA或水蛭素组相比,于再灌注6h及24h,神（?）功能缺损症状均改善明显,P＜0.05;梗塞灶体积比明显减小,P＜0.05。镜下大鼠脑缺血灶的缺血核心区细胞染色较淡,细胞数量明显减少,给药组大鼠较对照组病理改变轻。Bcl-2、Bax免疫染色阳性反应呈棕色,染色部位为细胞浆。ASA+水蛭素组与对照组或ASA、水蛭素单药组相比,Bax明显降低,P＜0.05,与对照组或水蛭素组相比Bcl-2/Bax比值增大,P＜0.05。结论:1、ASA+水蛭素合用,可以改善脑缺血再灌注损伤后大鼠神经功能缺损症状,缩小脑梗死灶体积、减轻神经元的病理改变,提示ASA+水蛭素对脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用。2、大鼠脑缺血再灌注后,ASA+水蛭素部分可能是通过抑制Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值,从而发挥神经保护作用的。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 内容与方法
• 1.实验动物、主要试剂及仪器设备
• 1.1 实验动物及分组
• 1.2 手术器械及主要相关物品
• 1.3 主要仪器与设备
• 1.4 主要试剂、药品及配制
• 2.实验方法
• 2.1 大鼠大脑中动脉缺血再灌注（CI/RP）模型的建立方法:
• 2.2 再灌注及动物处死时间
• 2.3 神经功能评分
• 2.4 TTC染色及脑梗塞体积的测定
• 2.5 病理标本的制作
• 2.6 免疫组织化学染色
• 2.7 HE染色
• 3.病理形态学观察
• 4.统计学处理
• 结果
• 1. 神经功能缺损评分
• 2. 梗死灶体积测定
• 3. 组织病理学所见（HE染色）
• 4. 免疫组织化学染色
• 讨论
• 1. 线栓法大鼠局灶性脑缺血模型的建立和评估
• 2. 阿司匹林与水蛭素联合应用
• 3. 存在问题及展望
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表