氨基胍治疗前后糖尿病大鼠视网膜AQP-4表达变化及其与AGEs的相关性研究

论文摘要

目的：通过观察糖尿病（diabetes mellitus，DM）大鼠视网膜组织中水通道蛋白（aquaporin，AQP）-4表达改变，探讨糖尿病视网膜病（diabetic retinopathy,DR）是否与体液代谢异常有关；通过氨基胍（aminoguanidine，AG）治疗前后，D大鼠视网膜AQP-4表达变化与糖基化终末产物（advanced glycation end products，AGEs）表达变化的相关性分析，探讨AQP-4表达改变是否与AGEs异常有关。方法：选择清洁级2月龄雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（200g左右）51只，随机分成正常对照组、糖尿病组和糖尿病AG治疗组3组。一次性腹腔注射链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱发糖尿病模型，正常对照组腹腔注射生理盐水，糖尿病AG治疗组在糖尿病动物模型建立成功后对其进行灌胃给予AG治疗，各组分别于第1个月、3个月和6个月取材动物视网膜组织。应用HE染色方法观察正常组大鼠和糖尿病大鼠视网膜组织的病理改变；应用免疫组织化学染色和Western Blot等方法观测各组大鼠视网膜组织AQP-4的表达与变化；应用ELISA方法观测各组大鼠视网膜组织AGEs的表达与变化，并分析AQP-4表达改变与AGEs的相关性。应用计算机图像分析实验结果，并结合SPSS17.0软件包进行统计分析，实验数据以x±s表示。均数间的比较主要采用t检验、重复测量资料的多变量分析、方差分析和线性相关分析等。α=0.05为显著性检验标准。结果:正常对照组的大鼠随着饲养时间的延长体质量呈上升趋势，血糖值维持在正常水平（＜5.7mmol/L）；成功建立糖尿病模型的大鼠体质量在12h后开始有明显的下降，血糖值在72h后均达到DR模型的标准（＞17.6mmol/L），且随着DR病程的发展血糖值都维持在较高水平，与正常对照组大鼠相比有显著性差异（P＜0.05）；糖尿病AG治疗组大鼠的体质量和血糖值与糖尿病组大鼠相比无显著性差异（P＞0.05）。糖尿病1个月大鼠视网膜各层结构清晰，各种细胞见明显形态结构改变；糖尿病3个月大鼠视网膜外网层、内网层和节细胞层结构疏松；糖尿病6个月大鼠视网膜各层水肿更明显，病变主要在外网层及内网层，节细胞层见空泡化改变，内核层见较多空泡。在正常对照组、糖尿病组和糖尿病AG治疗组大鼠的视网膜组织中均可见AGEs与AQP-4的表达，与正常对照组大鼠相比，糖尿病组大鼠视网膜组织中，AGEs和AQP-4的表达均高于正常对照组，且随着病程的延长而增加，在1个月、3个月和6个月时均有显著性差异（P＜0.05）；糖尿病AG治疗组大鼠血清和视网膜组织中AGEs表达下调，与糖尿病组大鼠血清和视网膜组织中AGEs的表达相比有显著性差异（P＜0.05），而与正常对照组大鼠相比无显著性差异（P＞0.05）；糖尿病AG治疗组大鼠视网膜组织中AQP-4表达也有所下调，在1个月时，与正常对照组和糖尿病组大鼠比较有显著性差异（P＜0.05）；在3个月时，与糖尿病组大鼠相比有显著性差异（P＜0.05），与正常组大鼠相比无显著性差异（P＞0.05）；在6个月时，与糖尿病组大鼠相比有显著性差异（P＜0.05），与正常组大鼠相比有显著性差异（0.01＜P＜0.05）；线性相关分析结果显示，糖尿病大鼠视网膜AQP-4表达改变与AGEs呈正相关（r=0.943,P=0.005），治疗组大鼠视网膜AQP-4表达改变与AGEs呈正相关（r=0.886,P=0.019）。结论：体液代谢异常可能在糖尿病大鼠视网膜病的发生和发展过程中发挥作用；AQP-4表达改变可能与糖尿病视网膜组织中AEGs含量变化有关；AG治疗DR的机制之一可能与其抑制视网膜组织AQP-4的表达有关。

论文目录

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• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述
• 参考文献