论文题目: 急性脊髓损伤后神经细胞黏附分子L1的动态变化及L1-Ig1-6融合蛋白对损伤脊髓修复作用的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 外科学
作者: 王长峰
导师: 贾连顺,袁文,肖建如,叶晓健
关键词: 脊髓损伤,逆转录聚合酶链反应,神经细胞黏附分子,融合蛋白
文献来源: 第二军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本实验第一部分,利用RT-PCR和免疫组化染色法观察急性脊髓损伤后不同时相,脊髓表达L1和相关凋亡指标的动态变化。结果表明L1和bcl-2/bax基因表达存在线性相关性,这提示L1的表达可以抑制脊髓神经元的凋亡;第二部分根据不同时相脊髓L1和GAP-43的表达,建立两者的核酸和蛋白时序性表达曲线。GAP-43的表达时程短,而L1的时程较长,并持续在较高水平上,这可维持GAP-43的磷酸化,对神经再生可能有重要意义;第三部分通过免疫组化、红核脊髓束的HRP逆行示踪以及行为学评分的对比研究,证实蛛网膜下腔给予His-Igl-6能减轻SCI后的继发性损害,促进脊髓的修复。
论文目录:
英文缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 急性脊髓损伤后 L1和c-fos、bcl-2、bax表达关系研究
一、材料
(一) 实验动物
(二) 主要器械及仪器
(三) 主要试剂
二、实验方法
(一) 动物模型制备
(二) Rf-PCR法测定脊髓组织中Ll和c-fos、bel-2、bax mRNA表达水平
(三) L1和c-fos、bel-2、bax的免疫组化染色
三、结果
(一) SCI后损伤段脊髓 Ll和c-fos、bel-2、bax mRNA的表达变化
(二) L1/β-actin和bel-2/bax的核酸表达变化的相关性研究
(三) SCI后损伤脊髓 L1和c-fos、bcl-2、bax蛋白表达变化
(四) NCAM·L1蛋白含量和bel-2/bax比值的关系研究
四、讨论
(一) 急性脊髓损伤后，凋亡基因的表达变化及其意义
(二) 神经细胞黏附分子与凋亡受体的交叉机制导致程序性死亡
(三) L1和凋亡基因的交互作用
五、结论
参考文献
第二部分 NCAM-L1和 GAP-43在 SCI后的动态表达及意义
一、材料
(一) 实验动物
(二) 主要器械及仪器
(三) 主要试剂
二、实验方法
(一) 动物分组
(二) RT-PCR法测定脊髓组织中NCAM-L1和 GAP-43mRNA表达水平
(三) NCAM-L1和 GAP-43的免疫组化染色
(四) 统计学处理
三、结果
(一) SCI后 NCAM-L1和 GAP-43 mRNA的表达变化
(二) SCI后 NCAM-L1和 GAP-43蛋白表达变化
四、讨论
(一) L1和 GAP-43在脊髓修复过程中的协同作用及意义
(二) NCAM-Ll在损伤脊髓修复中的作用与意义
(三) GAP-43在脊髓神经修复中的意义
(四) SCI后，即刻早期因子对 L1和 GAP-43的调控和意义
五、结论
参考文献
第三部分 His-Igl-6融合蛋白对损伤脊髓的修复作用
一、材料
(一) 试验动物
(二) 试剂及试剂盒
(三) 实验仪器
二、实验方法
(一) L1-Igl-6融合蛋白的制备
(二) 脊髓损伤模型的建立和分组
(三) 脊髓标本的收集和制片方式
(四) 行为学评价
(五) NF、GFAP、c-fos、bax、bel-2的免疫组化染色
(六) 红核脊髓束的HRP逆行示踪观察
(七) 计算机图像分析和统计学处理
三、结果
(一) 大鼠的行为学改变
(二) His-Igl-6治疗后的NF染色
(三) His-Igl-6治疗后的GFAP染色
(四) His-Igl-6治疗后的凋亡细胞染色
(五) HRP实验结果
四、讨论
(一) 神经细胞黏附分子 Ll融合蛋白的功能
(二) 神经细胞黏附分子 Ll融合蛋白的抗凋亡作用
(三) 融合蛋白治疗前后NF表达的变化
(四) 融合蛋白治疗前后 GFAP的变化
(五) 行为学功能的评价
(六) 红核脊髓束的HRP逆行示踪
五、结论
参考文献
综述 神经细胞黏附分子L1及其功能分析
在校期间主要学术活动
致谢
发布时间: 2006-05-08
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标签：脊髓损伤论文; 逆转录聚合酶链反应论文; 神经细胞黏附分子论文; 融合蛋白论文;