论文摘要
急性肾损伤是一种临床上常见的综合症,以急性肾小球滤过率下降、氮质血症、水电解质及酸碱平衡紊乱等为主要临床表现。其发病机理复杂,涉及到肾细胞凋亡或坏死、炎症反应、氧化应激反应等多种病理机制。患有糖尿病、血管疾病、慢性肾病或服用肾毒性药物的病人有很高的风险发生急性肾损伤。由于急性肾损伤复杂的发病机理,目前的支持疗法和肾脏替代疗法在降低患者死亡率和改善症状方面疗效有限,因此寻找治疗急性肾损伤的新策略迫在眉睫。近年来,干细胞研究方面所取得的巨大进展为急性肾损伤的治疗带来了曙光。干细胞具有自我更新和多向分化潜能,在体内有归巢至损伤组织并分化为相应的体细胞,用以修复和替代损伤及凋亡的组织细胞；干细胞还可分泌多种生长因子和免疫调节因子,可干预急性肾损伤病理进程的多个环节。因此研究干细胞对急性肾损伤的治疗作用及分子机制将为临床采用干细胞药物治疗急性肾损伤奠定基础。本文旨在研究骨髓间充质干细胞（bone marrow derived mesenchymal stem cells, BM-MSCs）对顺铂诱导的大鼠急性肾损伤的治疗作用及其抗细胞凋亡的分子机制。本文将SD大鼠分为三组：正常组（n=8）,顺铂处理组（n=8）和顺铂处理后干细胞治疗组（n=8）。大鼠注射顺铂1天后进行尾静脉注射干细胞治疗,4天后处死大鼠,比较三组大鼠的肾功能、肾组织结构、肾组织细胞凋亡和增生及与细胞凋亡有关的蛋白表达水平。为进一步研究骨髓间充质干细胞在体内的作用机制,本文在体外将骨髓间充质干细胞培养得来的条件培养基（BM-MSCs-CM）孵育顺铂处理过的大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）,再观察其细胞活性和凋亡情况。实验结果发现与顺铂处理组相比,干细胞治疗组的大鼠血肌酐、尿素氮及尿蛋白肌酐比值明显下降,肾脏的组织结构较完整,肾小管损伤减轻,肾细胞凋亡数目减少,增殖细胞增多,与细胞凋亡有关的蛋白p-p38、p-ERK、Bax、 cleaved-caspase3蛋白表达水平下降,而抗细胞凋亡的Bcl-2蛋白表达水平升高。BM-MSCs-CM孵育的顺铂处理的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E细胞活性增加,细胞凋亡减少。综上所述,BM-MSCs对顺铂诱导的大鼠急性肾损伤有治疗作用,这种治疗作用可能通过抗细胞凋亡的途径实现,骨髓间充质干细胞条件培养基对肾小管上皮细胞有抗凋亡保护作用说明BM-MSCs体内可能通过内分泌或旁分泌的方式实现其抗细胞凋亡而对急性肾损伤起治疗作用。