人脑胶质瘤中Cx43基因表达及其与细胞增殖的关系

论文摘要

目的:颅内肿瘤占全身肿瘤的2%,年发病率1/万,胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤。近年来外科手术、放疗、化疗等综合治疗已广泛应用于胶质瘤的治疗,使病人在一定程度上得到暂时缓解,但复发率高、预后未能根本改善,尤其是高度恶性胶质瘤。其原因之一就是胶质瘤的生物学行为极为复杂,临床神经外科对其还缺乏足够的认识,是目前胶质瘤研究的难题。随着分子生物学的发展及其在肿瘤学研究中的应用,人们已认识到肿瘤的发生是原癌基因的激活和抑癌基因的突变、失活所致。近年研究表明,连接蛋白基因在许多肿瘤中表达明显受到抑制,以Cx基因作为基本结构和功能单位的间隙连接所介导的细胞间隙连接通讯(GJIC)中断,因此,Cx基因和GJIC可能在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。Cx是一个多基因家族编码的蛋白质,目前发现有13个成员。鉴于Cx基因表达的组织特异性,在成人脑组织中主要表达Cx43及Cx32,其中星形细胞表达Cx43,少支胶质细胞及某些神经元细胞表达Cx32。有关Cx43基因在胶质瘤中的表达,目前国外仅有小宗脑胶质瘤标本及胶质瘤体外细胞系的研究,尚无Cx43基因表达与胶质瘤病理类型、增殖活性、生物学行为等方面的研究报道,国内则未见报道。增殖细胞核抗原(PCNA)是近年来用以观察细胞增殖活性的一个重要指标,它是一种细胞周期调节蛋白,其表达水平反映细胞增殖率及DNA合成率,是目前肿瘤增殖活动研究中可靠的增殖期标志物。在本实验中,我们通过检测Cx43mRNA及其蛋白在胶质瘤中的表达,同时用PCNA作细胞增殖指标,分析Cx43基因表达与胶质瘤和增殖的关系,探讨Cx43基因的表达与胶质瘤发生机制及在胶质瘤发生发展中的作用,为胶质瘤恶性程度、术后的治疗以及疗效观察提供客观的依据。方法:研究对象为手术切除且保存完好的胶质瘤组织的石蜡包埋标本47例,所有胶质瘤标本均经病理证实为原发性胶质瘤,并用10例正常脑组织标本作为对照(均取于内减压术)。采用免疫组化及原位杂交技术检测CX43基因的表达,SP免疫组化技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达。结果:1、Cx43mRNA在正常脑组织、胶质瘤组织中表达阳性率分别为100%、61.7%,实验组和对照组之间有显著差异(P<0.01)。低恶度胶质瘤组织(I/II)中Cx43表达率分别为100.0%、93.8%;高恶度胶质瘤(III/IV)Cx43表达率分别为33.3%、16.7%,Cx43mRNA表达率与胶质瘤分级呈负相关,且低恶度肿瘤与高恶度肿瘤有显著差异(P<0. 05)。2、Cx43蛋白在正常脑组织及不同级别胶质瘤中的表达结果与Cx43mRNA相近,实验组和对照组之间有显著差异(P<0.01),随着胶质瘤组织学分级升高Cx43蛋白表达呈下降趋势(P<0.05),具有统计学意义。3、PCNA在正常脑组织中均表达阴性,而在胶质瘤组织中表达阳性率为76.6%,两组之间有显著差异(P<0.01)。在不同级别胶质瘤中表达强弱依次为Ⅳ级100.0%、III级94.4%、II级62.5%和I级42.9%;PCNA表达率与胶质瘤分级呈正相关(P<0.05),且III/ IV级与I/II级之间有明显差异。4、Cx43mRNA, Cx43蛋白, PCNA在胶质瘤组织中的表达显示:Cx43表达结果与Cx43mRNA的表达结果之间呈显著正相关(P<0.01)。而随着Cx43mRNA及其蛋白表达强度逐渐下降, PCNA则呈上升趋势,统计分析表明Cx43mRNA及其蛋白与PCNA在胶质瘤中的表达呈负相关性(P<0.05)。结论:1、人脑胶质瘤中Cx43 mRNA表达与胶质瘤分级呈负相关,胶质瘤恶性程度越高,Cx43 mRNA表达越低或缺失。2、人脑胶质瘤中Cx43蛋白表达与胶质瘤的分级呈负相关;与Cx43 mRNA表达水平呈正相关。随肿瘤恶性程度增加,Cx43 mRNA转录水平逐渐下降,Cx43在组织中的含量降低,导致Cx43表达水平相应降低。3、人脑胶质瘤中较正常脑组织PCNA表达明显增高,且随着胶质瘤组织学分级的提高,PCNA表达有升高趋势,PCNA与胶质瘤的恶性增殖有密切联系。4、人脑胶质瘤中PCNA与肿瘤分级呈正相关;与Cx43mRNA及蛋白表达呈负相关,提示Cx43基因表达与胶质瘤恶性进展和肿瘤细胞增殖活性密切相关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述增殖细胞核抗原PCNA与肿瘤
• 致谢
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