论文摘要
目的以橄榄总黄酮（按芦丁折算）提取物为有效成分,筛选出最佳提取条件,用大孔树脂法对橄榄总黄酮进行纯化,确定最佳纯化条件。采用大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,研究TFCO对局灶性脑缺血再灌注损伤（CIRI）的保护作用,并探讨其机制。方法（1）以橄榄总黄酮（按芦丁折算）提取物为有效成分,采用可见分光光度法,对TFCO的含量进行控制,采用乙醇作为溶剂对不同浓度、不同用量、不同提取时间3个因素按正交实验法设计优选出最佳提取工艺。用大孔树脂法对TFCO进行纯化,筛选了大孔树脂的种类,综合考察了树脂的吸附率,解析率,上样流速,上样液pH,洗脱剂浓度,洗脱体积,流速等各项指标。（2）线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞2h/再灌注24h模型,于再灌注前4天灌胃给予橄榄总黄酮30、60 mg.kg-1。神经病学评分观察神经功能缺失症状;TTC染色法观察脑梗死体积;AutoCAD图像分析软件计算脑水肿程度;光镜观察脑组织形态学变化;免疫组化法检测脑组织iNOS、TNF-α表达;生化法检测脑组织中MPO、GSH活性及T-AOC含量。结果（1）超声提取的最佳工艺是:取橄榄适量,加4倍量95%乙醇,超声提取60分钟;（2）纯化的最佳工艺是:使用D101型大孔树脂,配制pH4.5吸附液以2BV/h上柱,至泄漏。用3BV纯水以2BV/h洗柱后,再用3BV 60%乙醇洗脱,流速为1BV/h,将洗脱液减压浓缩,干燥得橄榄总黄酮,纯度为90.1%。（2）脑缺血2h/再灌注24h后,神经功能缺失,脑组织出现白色梗死灶,脑水肿明显,形态学呈病理改变,脑组织iNOS、TNF-α蛋白表达增强,MPO活性增高,GSH活性降低,T-AOC含量降低;（3）TFCO 30、60 mg.kg-1均能改善神经功能缺失症状,有效减小脑梗死灶,减轻脑水肿,抑制脑组织iNOS蛋白表达,增高脑组织GSH活性,提高T-AOC含量,还可缓解MPO升高,并能减轻脑组织病理变化,抑制脑组织TNF-α蛋白表达。结论（1）大孔吸附树脂纯化橄榄总黄酮,使其纯度达到90%以上;（2）再灌注前4天分别给予TFCO30、60mg.kg-1,减轻脑损伤;（3）TFCO对CIRI的保护作用,可能与减少iNOS和TNF-α蛋白表达、抗炎、抗脂质过氧化有关。