论文摘要
乳腺癌（breast cancer）是妇女最常见的恶性肿瘤之一。近20年来其发病率呈明显上升趋势,严重危害妇女的身心健康。既往研究表明端粒酶激活与乳腺癌的早期生成密切相关。作为人端粒酶最核心成分人端粒酶催化亚单位hTERT（human telomerase reverse transcriptase）是调节端粒酶活性的限速步骤,因此研究hTERT转录调控有助于揭示乳腺癌部分发生机制。乳腺癌易感基因BRCA1（breast cancer susceptibility gene）是近来发现的肿瘤抑制基因。大量研究证明,BRCA1基因结构、功能异常不仅与遗传性乳腺癌的发生密切相关,与部分散发性乳腺癌的发生关系也很密切。近来有许多学者在研究肿瘤细胞hTERT上游E-box位点突变时推测BRCA1与hTERT转录调控相关。但在乳腺癌中BRCA1基因是否参与hTERT转录调控及其相关机制目前仍不明确。 本研究分析人乳腺癌和癌旁组织中hTERT mRNA和BRCA1蛋白表达及二者之间的表达关系,观察外源性BRCA1基因转染MCF-7细胞强制表达后对hTERT蛋白表达的影响,以了解人乳腺癌组织中BRCA1蛋白对hTERT mRNA转录调控及对hTERT蛋白表达的影响,为进一步深入研究BRCA1对hTERT的调控机制奠定基础。 采用RT-PCR和免疫组化分别检测43例乳腺癌患者和40例乳腺癌癌旁组织中的hTERT mRNA和BRCA1蛋白的表达:在体外实验中应用脂质体将BRCA1真核表达质粒转染至乳腺癌MCF-7细胞中强制表达,Western Blot检测转染细胞中hTERT蛋白表达的变化。噻唑蓝比色试验（MTT）观察BRCA1真核表达质粒转染MCF-7细胞后细胞增殖活性的变化。 结果表明:41例乳腺癌组织中,30例检测出hTERT mRNA阳性,阳性率75.0%;而40例癌旁组织中只有2例检测出hTERT mRNA表达阳性,阳性率5.0%,在乳腺癌和癌旁组织中hTERT mRNA表达具有显著差异（卡方检验p<0.05）。在41例乳腺癌标本中,检测出BRCA1蛋白阳性15例,阳性率34.8%;而在40例癌旁组织中31例检测出BRCA1蛋白阳性,阳性率77.5%。BRCA1蛋白的表达在两组间也有显著的差异（卡方检验p<0.05）。并且在乳腺癌组织中hTERT mRNA的高表达和BRCA1蛋白的低表达有着明显的相关性（p<0.05）。体外实验中,将pcDNA3.1-BRCA1真核表达质粒转染MCF-7乳腺癌细胞株后,Westem Blot结果发现BRCA1蛋白表达明显增加,同
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标签：人端粒酶催化亚单位论文; 人乳腺癌细胞论文;