基于流感病毒血凝素抗原表位的核酸疫苗研究

论文摘要

流感一直是人类社会的一个巨大威胁。应对流感,最好的办法就是接种疫苗。相对于传统的灭活疫苗和减毒活疫苗,新出现的核酸疫苗基于它的众多优点,很有希望成为新一代的流感疫苗。由于流感病毒表面抗原血凝素(HA)是流感病毒核酸疫苗最好的靶点,而针对血凝素抗原表位产生的抗体是主要的具保护性的中和抗体,因此对基于血凝素抗原表位的核酸疫苗进行的研究具有一定的探索性意义。本文在小鼠模型中探讨了血凝素单个抗原表位的改变对于核酸疫苗保护效果的影响；并尝试构建基于血凝素表位的具有交叉保护效果的核酸疫苗。本论文包括以下几个部分：(一)流感病毒,流感病毒疫苗和流感病毒血凝素的简介；(二)含甲型H1N1流感病毒血凝素单个抗原表位核酸疫苗的构建及其免疫小鼠后的保护效果比较研究；(三)含流感病毒血凝素多个抗原表位核酸疫苗的构建及其免疫小鼠后的交叉保护效果研究。(一)流感病毒,流感病毒疫苗和流感病毒血凝素的简介：以综述的形式简单介绍了流感病毒及其变异性；流感病毒疫苗的分类和特点；流感病毒血凝素的特性。(二)含甲型H1N1流感病毒血凝素单个抗原表位的核酸疫苗的构建及其免疫小鼠后的保护效果比较研究：试验中构建了多个以A/PR/8流感病毒HA1为骨架,含不同甲型H1N1流感病毒单个表位的核酸疫苗。分别将各疫苗30微克使用肌肉注射后辅以电击的方式免疫BALB/c雌性小鼠,一次免疫三周后或两次免疫一周后用致死量(20×LD50)甲型H1N1流感病毒攻击小鼠,通过观察小鼠的体重丢失率和存活率来比较评价各个疫苗的保护作用。结果显示,含甲型H1N1流感病毒血凝素单个抗原表位的核酸疫苗能够提供小鼠抗致死量流感病毒攻击的能力,一次免疫后可以提供部分保护,两次免疫后基本能达到完全保护。(三)含流感病毒血凝素多个抗原表位核酸疫苗的构建及其免疫小鼠后的交叉保护效果研究：我们在试验中构建了以甲型H1N1流感病毒HA1为骨架,含两个A/PR/8流感病毒表位的核酸疫苗。分别用含甲型H1N1流感病毒全长HA和A/PR/8流感病毒全长HA的核酸疫苗为对照。将各疫苗都用30微克间隔三周两次电击免疫BALB/c雌性小鼠,两免二周后分别用致死量(20×LD50)甲型H1N1流感病毒和致死量(20×LD50)A/PR/8流感病毒攻击小鼠,通过观察小鼠的体重丢失率和存活率来评价该疫苗的交叉保护作用。结果显示,两次免疫后,该核酸疫苗对甲型H1N1流感病毒和A/PR/8流感病毒的攻击都能提供完全的保护,达到了和含相应病毒株全长HA核酸疫苗一样的效果,而对照组基本没有或只有很小的保护效果。因此我们认为,基于流感病毒血凝素多个抗原表位的核酸疫苗方案是可行的,可以到达对于多个病毒株的交叉保护效果。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1. 流感病毒简介
• 1.1 流感病毒的特征
• 1.2 流感病毒的变异
• 2. 流感病毒疫苗
• 2.1 传统疫苗
• 2.2 新型疫苗
• 2.3 核酸疫苗
• 3. 流感病毒血凝素及其抗原表位
• 3.1 血凝素的合成,运输及修饰
• 3.2 血凝素与受体的结合
• 3.3 血凝素的膜融合特性
• 3.4 血凝素抗原表位
• 4. 本文的研究背景及目的
• 第二章 含甲型H1N1流感病毒血凝素单个抗原表位核酸疫苗的构建及其免疫小鼠后的保护效果比较研究
• 1. 引言
• 2. 材料,配方与方法
• 2.1 主要材料
• 2.2 主要配方
• 2.3 方法
• 3. 实验结果
• 3.1 成功构建含甲型H1N1流感病毒血凝素单个抗原表位的核酸疫苗
• 3.2 含甲型H1N1流感病毒血凝素单个抗原表位的核酸疫苗一次免疫小鼠后,对致死量病毒攻击的保护效果
• 3.3 含甲型H1N1流感病毒血凝素单个抗原表位的核酸疫苗两次免疫小鼠后,对致死量病毒攻击的保护效果
• 4. 分析讨论
• 第三章 含流感病毒血凝素多个抗原表位核酸疫苗的构建及其免疫小鼠后的交叉保护效果研究
• 1. 引言
• 2. 材料,配方与方法
• 3. 实验结果
• 3.1 成功构建含流感病毒血凝素多个表位的核酸疫苗
• 3.2 含流感病毒株血凝素多个表位的核酸疫苗能够提供对致死量甲型H1N1流感病毒攻击的完全保护效果
• 3.3 含流感病毒株血凝素多个抗原表位的核酸疫苗能够提供对致死量A/PR/8流感病毒攻击的完全保护效果
• 4. 分析讨论
• 结语和展望
• 参考文献
• 缩写表
• 读研期间文章发表和录用情况
• 致谢