论文摘要
胃癌细胞的侵袭转移是导致胃癌患者预后极差的主要原因,积极开展对肿瘤浸润转移的分子机制研究具有重要的现实意义。目前研究证实肿瘤细胞在增殖、转移过程中受到肿瘤微环境的影响,其侵袭力显著增强,即转移中的肿瘤“分子进化”过程。肿瘤微环境是由纤维细胞、渗透性免疫细胞、血液与淋巴管系统、细胞外基质共同构成,其中常见的细胞因子有白介素1、白介素8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等。TNF-α是作为微环境中炎症因子的典型代表,其作用受到日益关注。近年来在卵巢癌、人类黑色素瘤等肿瘤细胞上被证实具有促肿瘤浸润的作用,但其促进肿瘤细胞侵袭的分子机制还不十分清楚。本实验采用体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,构建侵袭小室,并选择核转录因子（NF-kB）和蛋白水解酶之一的尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）做为检测指标,探讨TNF-α促进胃癌细胞侵袭的相关机制。目的:探讨肿瘤坏死因子（TNF-α）诱导胃癌细胞侵袭力的相关机制。方法:体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,采用免疫组化方法检测其在TNF-α不同浓度、时间诱导下的NF-kB活性、uPA蛋白表达强度;采用噻唑蓝（MTT）比色法检测SGC-7901细胞在不同浓度的TNF-α、PDTC（吡咯烷二硫代氨基甲酸盐,NF-kB特异性抑制剂）孵育下的细胞增殖情况;构建侵袭小室,检测不同浓度TNF-α对SGC-7901细胞侵袭力影响,并用PDTC预先处理细胞后,检测其对细胞侵袭力的改变。结果:单因变量方差分析表明:影响SGC-7901 NF-kB p65、uPA表达的两因素:TNF-α诱导“不同时间”和“不同浓度”无交互效应（修正模型SS=处理组间SS+配伍组间SS）,随着TNF-α浓度的增加和时间延长,SGC-7901细胞NF-kB活性明显增强,90min为高峰;TNF-α明显上调SGC-7901细胞中的uPA蛋白表达水平;一定范围浓度的TNF-α、PDTC对SGC-7901细胞增殖无明显影响;随着TNF-α浓度增加SGC-7901细胞侵袭数也随之增加,具有明显浓度依赖性（TNF-α5、10、20ng/ml vs 0ng/ml: 84.33±3.786、108.33±6.110、121.330±4.163 vs 63.330±4.933,F=126.282,P<0.001）,PDTC明显抑制TNF-α诱导的SGC-7901细胞侵袭力（42.330±4.041 vs 63.330±4.933,F=126.282,P<0.05）。结论:TNF-α能够增强胃癌细胞的侵袭力,其增强的侵袭力可能是通过NF-kB信号转导路径,激活uPA等蛋白水解酶而实现的。
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