论文题目: 小儿先天性胆管扩张症胆汁和血清胆汁酸代谢的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 外科学
作者: 印其友
导师: 肖现民,李昊,余琛,周以明,吕志葆
关键词: 先天性胆管扩张症,胆汁酸谱,定量,高效液相色谱串联质谱,胆汁,血清
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 研究背景和目的:先天性胆管扩张症是小儿外科常见的一种先天性的胆道发育畸形,好发于东方人群,大部分合并胰胆合流异常,压力较高的胰液通过共同管返流入总胆管,大量的胰酶被激活,产生自身消化作用,导致胆道扩张,并对肝脏产生广泛的病理损害。部分研究显示胆管扩张症存在胆汁酸代谢异常,并认为囊肿内致癌性胆酸的增加是囊肿癌变的主要因素。由于胆汁酸检测方法的复杂性和常规方法的局限性,既往文献中有关先天性胆管扩张症胆汁酸代谢异常仅涉及到四种初级胆酸。本研究拟建立稳定、有效、专属性强的胆汁酸检测方法,对胆汁和血清进行全部15种胆汁酸的定性和定量研究,探究胆汁酸代谢异常的病理机制和对机体的影响,进一步为先天性胆管扩张症的治疗提供理论依据。 方法: 一、先天性胆管扩张症囊肿内胆汁酸分析 方法学研究:建立15种胆汁酸HPLC-ELSD检测方法,并对检测体系的灵敏度、精密度、回收率、线性范围等性能指标进行评价。临床研究:利用建立的胆汁酸HPLC-ELSD检测方法对我院收治的19例先天性胆管扩张症囊肿内胆汁和8例对照胆汁进行胆汁酸的定性和定量分析,探究囊肿内胆汁酸改变与胆汁淀粉酶的浓度、肝脏损害程度、胆管扩张类型、是否合并黄疸的相关性,胆汁酸异常的产生机制,胆汁酸谱改变对胆系癌变、胆结石形成的潜在影响。 二、先天性胆管扩张症血清胆汁酸代谢的分析 方法学研究:建立血清胆汁酸LC-MS/MS检测方法,并对检测方法灵敏度、精密度、回收率、线性范围等性能指标进行评价;利用建立的血清胆汁酸LC-MS/MS检测方法对15例先天性胆管扩张症术前及术后1周、10例术后1年的空腹血清进行全部15种胆汁酸定性和定量分析,探讨血清胆汁酸异常与胆汁淀粉酶浓度、肝脏损害程度、是否合并黄疸、胆管扩张类型的相关性,血清胆汁酸谱的改变对机体胆汁酸合成的可能影响作用,胰胆分流手术对血清胆汁酸代谢恢复的作用。 结果: 一、先天性胆管扩张症囊肿内胆汁酸分析 方法学研究:在建立的HPLC-ELSD检测体系中,15种胆汁酸一次即能有效分离,同种胆汁酸测定值日内变异为1.51%～9.42%,日间变异为1.77%～6.82%,最低检测限为5～7.5ug/ml,
论文目录:
中文摘要
英文摘要
英语缩写索引
前言
第一部分 先天性胆管扩张症囊肿内胆汁酸的分析
第一节 胆汁酸HPLC-ELSD分析的方法学建立
前言
材料与方法
一、主要实验仪器与试剂
二、HPLC-ELSD检测原理
三、胆汁酸HPLC分析的色谱条件
四、胆汁酸HPLC-ELSD分析方法建立步骤
结果
一、15种胆汁酸标准品出峰顺序、保留时间的确定
二、检测体系精密度检验
三、HPLC—ELSD的检测极限测定
四、直线方程的建立和线性范围的确定
五、胆汁酸提取的绝对回收率的测定
六、胆汁酸标准品相对回收率测定
七、HPLC—ELSD在胆汁样本胆汁酸分析中的使用
讨论
一、胆汁酸谱检测的临床意义
二、HPLC在胆汁酸检测方面的应用现状
三、本研究对检测条件的改良提高了检测效能
四、本研究方法的可靠性的检验
第二节 小儿先天性胆管扩张症囊肿内胆汁酸的分析
材料与方法
一、临床资料及分组
二、标本处理
三、胆汁淀粉酶的测定
四、先天性胆管扩张症肝纤维化观察
五、胆汁样本总胆汁酸的测定
六、胆汁样品的胆汁酸HPLC—ELSD分析
七、统计学处理
结果
一、胆汁淀粉酶的测定
二、先天性胆管扩张症肝纤维化情况
三、胆汁样本总胆汁酸的测定和比较
四、胆汁中胆汁酸谱的HPLC-ELSD分析
讨论
一、先天性胆管扩张症胆汁中胆汁酸的研究现状
二、先天性胆管扩张症囊肿内胆汁酸谱总体变化
三、先天性胆管扩张症囊肿内胆汁酸浓度下降相关因素探讨
四、先天性胆管扩张症囊内次级胆酸的变化对机体的影响
五、先天性胆管扩张症囊肿内胆汁酸谱的变化在胆结石形成中的作用
第一部分 总结
参考文献
第二部分 小儿先天性胆管扩张症血清胆汁酸代谢的分析
前言
第一节 血清胆汁酸LC-MS／MS检测方法学建立
材料与方法
一、主要仪器与设备
二、主要试剂和缓冲液
三、LC-MS／MS的检测原理
四、胆汁酸LC-MS／MS分析的质谱条件和数据分析系统
五、胆汁酸LC-MS／MS分析的色谱条件
六、血清胆汁酸LC-MS／MS方法学建立步骤
七、LC—MS／MS在未知血清样品的检测中的应用
结果
一、LC-MS／MS胆汁酸分析参数的确定
二、最低检测限和最低检测浓度
三、标准曲线和线性范围
四、胆汁酸提取回收率的测定
五、胆汁酸检测的精确度
六、胆汁酸的LC-MS／MS分析在血清样品检测中的应用
讨论
一、血清胆汁酸的来源和特征
二、LC-MS／MS在胆汁酸检测中的应用情况
三、本研究建立的血清胆汁酸LC-MS／MS检测方法的优越性
第二节 小儿先天性胆管扩张症血清中胆汁酸谱的分析
材料与方法
一、临床资料及分组
二、血清总胆汁酸的测定
三、先天性胆管扩张症并发肝纤维化的观察
四、血清样品胆汁酸的LC-MS／MS检测
五、统计学处理
结果
一、血清总胆汁酸测定
二、血清样品胆汁酸的LC-MS／MS分析
讨论
一、小儿先天性胆管扩张症血清胆汁酸研究现状
二、小儿先天性胆管扩张症胆汁酸血清学的变化
三、小儿先天性胆管扩张症血清胆汁酸异常的相关因素探讨
四、先天性胆管扩张症继发性肝脏损伤导致胆汁酸代谢障碍的机制
五、先天性胆管扩张症血清胆汁酸异常对机体的影响
六、胰胆分流后血清胆汁酸谱的变化
第二部分 总结
参考文献
附录
综述：人体胆汁酸转运及其异常的的分子生物学机制
小儿胆道穿孔的诊治经验
致谢
论文独创性声明
论文使用授权声明
发布时间: 2005-09-19
参考文献
- [1].肠道胆汁酸缺乏对肝脏再生的影响及其机制研究[D]. 董秀山.山西医科大学2010
相关论文
- [1].胆总管胚胎发育、胰胆管合流异常合并胆管扩张影像改变及其分子机制的研究[D]. 郭万亮.苏州大学2012
- [2].尿硫酸化胆汁酸代谢轮廓分析用于妊娠肝内胆汁淤积症的诊断和分度[D]. 陈建波.重庆医科大学2012
- [3].胆汁酸经典合成途径的基因调节研究[D]. 邱冬妮.复旦大学2008
- [4].胰胆合流异常的病理和胆汁酶学研究[D]. 龚振华.复旦大学2003
- [5].维甲酸诱导大鼠肛门直肠畸形模型演变规律、RAR及Hox基因表达的研究[D]. 郭俊斌.中国医科大学2005
- [6].腹腔镜及二氧化碳气腹对腹内感染影响的研究[D]. 王刚.山东大学2005
- [7].先天性巨结肠神经肌肉连接（NMJ）的免疫组织化学研究[D]. 崔新海.山东大学2005
- [8].基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在小儿胆道畸形组织中的表达及意义[D]. 毛永忠.华中科技大学2005
- [9].先天性巨结肠肠壁微环境的改变及其与RET基因相关性的研究[D]. 李爱武.山东大学2007
- [10].几种中药与复方中胆汁酸的药代动力学研究[D]. 赵艳红.中国人民解放军军事医学科学院2007
标签：先天性胆管扩张症论文; 胆汁酸谱论文; 定量论文; 高效液相色谱串联质谱论文; 胆汁论文; 血清论文;