论文摘要
卤虫(Artemia)隶属于甲壳纲(Crustacea)、无甲目(Anostacea)、卤虫属(Artemia)。卤虫广泛分布于内陆盐湖和海岸盐田中,是一个广温广布种。我国对于卤虫的研究起步较晚,从80年代初至今在形态学、发育生物学、生态学、资源生物学、遗传学等学科的卤虫研究已有报道。但关于中国卤虫(Artemia)早期发育过程中基因表达的研究很少,还有待于进一步深入细致的研究和分析。mRNA差异显示法是由Liang和Pardee于1992年建立起来的,是用于显示不同组织和细胞之间mRNA差异的方法。因此,本文利用mRNA差异显示方法对中国山西运城两性生殖卤虫胚胎发育相关基因进行了较深入的研究。以三种单碱基锚定引物对发育0hr, 5hr, 10hr, 15hr, 22hr和10d的两性生殖卤虫的RNA进行反转录和26种随机引物进行PCR反应,经非变性的10%聚丙稀酰胺凝胶电泳后,用硝酸银染色得到区分度较好的差异表达图谱, 共回收211条DNA片段,然后从中挑取片段长度260~800bp左右的20条条带进行克隆、测序,作为ESTs进行同源序列比较,得到了4个与卤虫早期胚胎发育相关的表达片段,将其命名为ed1-ed4。经序列结果与GeneBank数据库比对后认为,ed1可能是富甘氨酸蛋白的基因片段,它是一盐胁迫应答相关基因,这与卤虫生活的高盐度环境相适应;ed2很可能是某种反转录酶的基因片段;ed3可能通过改变DNA结构或通过与特异性蛋白质结合而发挥基因调控作用; ed4也很可能是过氧化氢酶的基因片段,它可能在卤虫发育过程中清除自由基和保护机体免受损伤方面起着重要作用。
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