论文摘要
目的随着急性脑梗塞溶栓治疗的开展，脑缺血再灌注损伤的问题日益受到广大学者的重视，托吡酯(又称妥泰TPM)是一种结构独特的新型抗癫痫药物，其抗癫痫机制已弄清，为阻断钠离子通道，拮抗KA／AMPA受体及增强GABA的活性。国外相关研究表明，托吡酯不仅具有抗癫痫作用，在局灶性脑缺血损伤模型中能够发挥神经保护作用，本实验中，我们应用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型后，通过检测托吡酯对于缺血再灌注大鼠脑组织神经功能恢复、细胞凋亡、神经元烯醇化酶表达的影响，从而进一步探讨托吡酯在脑缺血过程中的神经保护作用机制，为临床引用提供实验依据。方法健康成年Wistar大鼠40只(雌雄各半)，随机分为正常对照组、假手术组、脑缺血再灌注组、脑缺血再灌注后托吡酯100mg／kg剂量治疗组(治疗组1)及脑缺血再灌注后托吡酯50mg／kg剂量治疗组(治疗组2)。每组各8只。使用颈内动脉线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，并进行神经功能评分造模成功2h后轻轻拉出栓线约1cm，造成再灌注。治疗1组和治疗2组动物术后分别在插线和再灌注时及术后3天腹腔注射相应剂量新鲜托吡酯混悬液，对照组给予等量生理盐水腹腔注射处理。缺血再灌注72小时后，断头取脑处死动物，处死前对大鼠神经功能进行评分，TTC染色观察梗死灶。并石蜡包埋切片行TUNEL及NSE免疫组化染色。结果缺血再灌注非治疗组神经元细胞数量明显减少，部分神经元细胞出现胞体萎缩，形状不规则，细胞核固缩，核碎裂，胞浆深染，光镜下具有凋亡细胞的特征。治疗组仅见少量神经元细胞出现上述凋亡小体特征。1．神经功能评分统计分析：治疗组1与缺血再灌注非治疗组比较，P＜0.01；治疗组2与缺血再灌注非治疗组比较，P＜0.01；治疗组2与治疗组1比较，P＜0.05。提示均有统计学意义。2．细胞凋亡染色结果：利用TUNEL染色对细胞凋亡进行观察，结果示，假手术组脑组织中可见个别散在凋亡细胞，表现细胞核固缩，核碎裂，胞浆棕色或棕褐色深染；缺血再灌注非治疗组的脑组织海马区CA1区可见较多的散在凋亡细胞，TUNEL染色阳性；治疗组有散在少量神经细胞发生染色阳性改变。凋亡神经元细胞数统计分析结果：治疗组缺血再灌注组相比较，P＜0.01；治疗组1与治疗组2相比较，P＜0.01。提示均有统计学意义。3．脑组织NSE免疫组化染色结果NSE免疫组化染色阳性信号呈棕黄色，主要分布在细胞浆内，正常脑组织中有基础水平表达。对照组缺血侧皮层区神经细胞NSE表达，阳性细胞着色明显加深，细胞形态结构基本正常。纹状体区NSE表达与皮层区基本相似。应用托吡酯治疗组NSE表达增强，阳性细胞数目较对照组相应时间点有显著差异。统计分析结果：治疗组缺血再灌注组相比较，P＜0.01；治疗组1与治疗组2相比较，P＜0.05。提示均有统计学意义。结论1．托吡酯对大鼠的脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用。2．托吡酯神经保护作用机制可能是抑制缺血组织神经元细胞凋亡。3．托吡酯神经保护作用机制可能是增加缺血侧脑组织中NSE蛋白水平表达4．托吡酯的神经保护作用与其作用剂量正相关。
论文目录
相关论文文献
标签：脑缺血再灌注论文; 托吡酯论文; 神经保护论文; 细胞凋亡论文; 神经元特异性烯醇化酶论文;