论文摘要
核酸适体是经由指数富集配体系统进化技术（SELEX）体外筛选出的能够对靶分子特异性识别的寡核苷酸序列,具有对靶分子亲和力强、特异性高、靶分子广泛、易合成、易储存等特点,已经广泛的用于生物传感器的构建及各类生物分子及重金属离子的检测。本论文基于核酸适体探针的特点,构建了荧光适体传感器及电化学适体传感器用于Hg2+ 及腺苷的检测,具体完成了以下研究工作：第二章：以富T核酸单链为识别分子,SYBR Green 1 （SG）为报告基团,建立了一种简单、灵敏的荧光增强法检测Hg2+ 的方法。富T结构的DNA链（T36）在常温下以单链形式存在,当加入Hg2+ 后,由于T-Hg-T键的形成,T36 单链自我折叠或者两两配对形成双链DNA结构,溶液中的SG嵌入DNA双链中,SG荧光强度增强。实验结果表明,SG荧光强度随着Hg2+ 浓度的增加而增强,在优化的实验条件下,Hg2+浓度在500nM～2.5μM范围内,SG的荧光强度与Hg2+ 的浓度呈线性关系I=0.4455C（nM）-86.96; R=0.9999;检出限373.6 nM。第三章：本章报道了一个无标记的信号恢复荧光传感器用于汞离子的检测,汞离子能与胸腺嘧啶（thymine, T）-胸腺嘧啶（thymine, T）碱基对特异性的结合,形成稳定的T-Hg2+-T结构。这就使得汞离子特异性单链DNA形成双链DNA。SG作为报告基团可以识别T-Hg2+-T结构。氧化石墨烯（GO）作为淬灭剂可以将背景信号将为零。在优化的实验条件下,Hg2+ 浓度在200 nM～2μM范围内,SG的荧光强度与Hg2+的浓度呈线性关系。线性回归方程是I=0.6444C（nM）-56.00,相关系数是R=0.9980,检出限为252.8 nM。第四章：报道了一种基于酶级联扩增的电化学核酸适体检测腺苷的新方法。当腺苷存在时,滚环扩增的引物通过E.coli DNA连接酶的作用与通过巯基组装在金电极上的固定探针连接。在phi 29 DNA聚合酶的作用下,滚环扩增反应进行并产生一条与环形探针完全互补的长的单链,然后将大量金纳米粒子标记的核酸探针与滚环扩增的产物杂交。该传感界面电化学行为的结果表明,通过酶级联扩增的方法提高了检测腺苷的阻抗响应灵敏度,且选择性和重现性良好。用于腺苷的检测时,其线性范围为2.0 μM-100μM,最低检测浓度为2.0μM,表明该传感界面的设计可作为一种通用方法而有望用于其它目标物的检测。