外源性瘦素在急性胰腺炎时对一氧化氮、一氧化氮合酶表达的影响

论文摘要

目的在急性胰腺炎（Acute Pancreatitis,AP）的发病机制中,细胞因子和炎症反应失衡理论已经得到大家的一致公认,一些细胞因子在AP中介导产生的炎症递质可增加血管内皮细胞表面粘附分子的表达,引起中性粒细胞在局部的粘附、聚集,激活的中性粒细胞产生的细胞因子和炎症递质产生局部的细胞毒性作用,并造成血管通透性的改变,引起血小板聚集、血栓形成,致胰腺微循环障碍,加重胰腺损伤,这样的恶性循环导致胰腺及胰周组织发生自身消化,局部炎症反应产生的细胞因子进入血液循环,继续通过瀑式反应生成大量细胞因子,产生全身效应,局部的炎症反应进展成全身炎症反应（SIRS）。瘦素（Leptin）作为肥胖基因编码的蛋白质产物,具有多种生理功能,在体内可能参与多种代谢的调节,一些学者发现Leptin可以通过多种途径激活免疫细胞,尤其是CD4+T细胞,提高细胞免疫功能,并可通过抗炎性及促炎性细胞因子表达的增高或降低反应出来,同时,在人体中,饥饿和炎性感染时血清瘦素水平大幅上升,据此推测其可能在宿主炎性反应中起重要保护作用。内源性一氧化氮（NO）是以L一精氨酸（L—Arg）为底物,在一氧化氮合酶（NOS）介导下,由还原型辅酶Ⅱ（NADPH）提供电子,黄素核苷酸（FMN）、黄素腺嘌呤二核苷酸（FAN）、四氢生物喋呤（BH4）及铁原子（Fe）传递电子,与分子氧结合而成。已发现的NOS结构体有三型:内皮型（ecNOS）脑型（bcNOS）,分别从内皮细胞和脑中分离出二者统称为原生酶（cNOS）,主要存在于内皮细胞、神经细胞、平滑肌细胞和血小板中。生理情况下cNOS基因就有表达,在内源性血管活性物质刺激下胞浆内钙离子浓度增加,激活cNOS合成少量NO,主要发挥传递介质和调节介质作用。第三型为巨噬细胞型又称诱生酶（iNOS） ,主要存在于巨噬细胞、肥大细胞、中性粒细胞、成纤维细胞、肝细胞、胃肠粘膜细胞和胰岛细胞等细胞中,某些含有原生酶的细胞如内皮细胞,平滑肌细胞和神经细胞等也有该酶存在。生理情况下iNOS基因不表达,只有在内毒素和某些细胞因子如TNF、γ-干扰素、IL-1等刺激下才能进行转录和翻译,催化L—Arg生成大量NO,参与体内非特异性免疫杀伤肿瘤组织和入侵微生物,且NO释放的同时伴有超氧阴离子产生,后者与N0共同作用可引起组织细胞氧化损伤和坏死。瘦素可以刺激各种组织释放一氧化氮,NO对AP的作用有两面性,即NO既有保护作用,又有细胞毒性及促炎作用。究竟何种作用占主导地位,取决于NO产生部位、数量及作用持续时间。发挥保护作用的NO大多是由钙离子依赖型cN0S合成释放的,而引起损害作用的NO主要与非钙离子依赖型iNOS有关。本实验探讨外源性瘦素（Leptin）在急性胰腺炎（AP）中对一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）表达的影响及其对胰腺损伤的保护作用。方法1.利用同位素标记法测定cNOS及iNOS活性。2.硝酸还原酶法测定胰腺组织中NO2-/NO3-含量测定。3.胰腺组织形态学检查及镜下胰腺组织损伤定量评估。结果1.胰腺炎组大鼠胰腺组织中NO、iNOS含量及病理定量评分均明显高于假手术组,而cNOS活性则明显下降。2.通过胰腺炎组与Leptin治疗组的对比,显示:Leptin治疗组大鼠胰腺组织中cNOS活性增加,而iNOS活性明显下降,NO含量也相应下降但仍高于假手术组,其病理定量评分明显低于胰腺炎组。结论本实验结果提示,急性胰腺炎时,iNOS的活性增高,而cNOS活性下调,NO生成量显著增加。在给予Leptin后,iNOS大幅度降低,而NO含量并没有随iNOS而大幅度降低,其可能是给予Leptin后其引起的cNOS相应的增加造成的,而胰腺组织的损伤也显著减轻,从而认为,Leptin通过:（1）降低iNOS催化产生过量的NO,减轻其产生细胞毒性作用.（2）增加cNOS及其催化生成的NO,发挥内源性NO的生理及保护功能,改善胰腺组织的微循环血流量。通过上述途径Leptin发挥其对胰腺的保护作用,从而加速急性胰腺炎的恢复,从而证明Leptin在急性胰腺炎中为胰腺组织的重要保护因子之一,为其的临床应用提供理论基础。

论文目录

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