首页> 正文

PMSG的纯化及其对幼鼠和幼蓝狐卵巢和子宫的影响

2020-12-06阅读(722)

PMSG的纯化及其对幼鼠和幼蓝狐卵巢和子宫的影响

论文摘要

孕马血清促性腺激素（pregnant mare serum gonadotropin,PMSG）是由马属动物胎盘的尿囊绒毛膜细胞分泌的,具有促进卵泡发育、排卵和黄体形成功能的一种糖蛋白激素。本研究采用偏磷酸—乙醇逐级沉淀法,从孕马血清中提取PMSG粗蛋白。并利用小鼠检测粗提蛋白的生物活性及其对雌性生殖器官发育的影响;与此同时,利用粗提的PMSG结合E2、PGF2a和hCG,处理6～7月龄的雌性蓝狐,探讨不同激素组合处理对雌性蓝狐诱发发情、卵巢发育和卵泡发育的影响。其结果与结论如下:（1）从来自不同孕马的血清（9000ml）中提取116.15g（湿重）有活性的PMSG粗提蛋白,其比活在104.57～222.04 IU/mg之间,平均为153IU/mg。结果表明偏磷酸-乙醇逐级沉淀法适用于从孕马血清中提取PMSG;（2）利用DEAE-Sephadex A50批量层析和SP-Sepharose HP柱层析的方法纯化粗提蛋白,经1步和2步纯化分别获得比活为173.08 IU/mg和926.41 IU/mg的PMSG精制蛋白,最终比活提高倍数为8.64倍。表明离子交换层析是有效精制纯化PMSG的方法:（3）用2IU、4IU、8IU三种不同浓度的PMSG处理出生21d雌性小鼠,发现4IU即可有效促进卵巢正常发育。表明,PMSG对卵巢的正常发育存在有最适阈值浓度;（4）用PMSG处理不同日龄小鼠（5d、10d、15d和21d）后,PMSG不仅促进15d和21d小鼠有腔卵泡的发育,而且对出生21d的小鼠卵巢中次级卵泡阶段的卵泡发育同样具有促进作用。同时PMSG对出生后15～21d小鼠子宫不同结构的发育也具有明显的促进作用,但并不能影响出生不足10d的小鼠子宫的发育。（5）采用EPP和EPPh处理6～7月龄雌性蓝狐,其结果（20%和30%出现发情症状）表明蓝狐进入初情期存在个体间的差异,而且,EPP和EPPh处理法可能具有诱发雌性蓝狐发情的功效;（6）用EPP和EPPh法处理非发情季节雌性蓝狐（6～7月龄）,不仅能够提高蓝狐卵巢重量和增加有腔卵泡数量,而且能够促进其子宫不同结构的显著发育。但是激素处理后会引起卵巢内异常卵泡数目的增加。表明此方法可以显著促进未进入初情期蓝狐生殖器官的发育本研究结果为进一步开展PMSG对毛皮动物发情或非发情时期生殖器官的作用机制、建立PMSG应用程序、开发PMSG精品及其PMSG抗血清制品等奠定基础。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 绪论
  • 1.1 孕马血清促性腺激素
  • 1.1.1 PMSG的生物结构
  • 1.1.2 PMSG的生物学作用
  • 1.1.3 PMSG的纯化应用
  • 1.2 糖蛋白激素色谱分离方法
  • 1.2.1 离子交换色谱
  • 1.2.2 凝胶过滤色谱
  • 1.2.3 羟基磷灰石色谱
  • 1.2.4 亲和色谱
  • 1.2.5 疏水作用色谱与反相色谱
  • 1.3 PMSG的应用研究进展
  • 1.3.1 PMSG在诱发发情中的应用
  • 1.3.2 PMSG在超数排卵中的应用
  • 1.3.3 PMSG在提高狐狸繁殖效率中的应用
  • 1.4 研究目的及意义
  • 2 孕马血清PMSG的粗提及纯化
  • 2.1 实验材料
  • 2.1.1 实验药品
  • 2.1.2 实验仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 PMSG的粗提步骤
  • 2.2.2 粗提PMSG生物活性测定
  • 2.2.3 阴离子交换层析条件优化
  • 2.2.4 阴离子交换批量层析
  • 2.2.5 阳离子交换柱层析
  • 2.2.6 PMSG蛋白含量测定
  • 2.2.7 ELISA法检测PMSG生物活性
  • 2.3 实验结果
  • 2.3.1 偏磷酸-乙醇沉淀法提取PMSG及其生物活性测定
  • 2.3.2 阴离子交换剂对PMSG吸附的pH及盐浓度依赖性
  • 2.3.3 粗提PMSG蛋白的连续两步层析纯化
  • 2.4 讨论
  • 2.5 本章小结
  • 3 PMSG对幼龄小鼠雌性生殖器官的影响
  • 3.1 实验材料
  • 3.1.1 实验动物
  • 3.1.2 实验药品
  • 3.1.3 固定液和染色液配制
  • 3.1.4 实验仪器
  • 3.2 实验方法
  • 3.2.1 PMSG处理剂量的筛选
  • 3.2.2 幼鼠的PMSG处理
  • 3.2.3 卵巢和子宫组织切片制作及染色
  • 3.2.4 观察及测量
  • 3.2.5 理数据处理
  • 3.3 实验结果
  • 3.3.1 PMSG处理浓度的筛选
  • 3.3.2 PMSG处理对不同日龄幼鼠卵巢增重的影响
  • 3.3.3 PMSG处理对不同日龄幼鼠卵泡发育的影响
  • 3.3.4 PMSG处理对幼龄雌鼠子宫增重的影响
  • 3.3.5 PMSG处理对幼龄雌鼠子宫结构的影响
  • 3.4 讨论
  • 3.5 本章小结
  • 4 PMSG诱导未进入初情期雌性蓝狐生殖器官的发育
  • 4.1 实验材料
  • 4.1.1 实验动物及其实验实施时间
  • 4.1.2 实验药品
  • 4.2 实验方法
  • 4.2.1 雌性蓝狐的激素处理
  • 4.2.2 发情观察与交配
  • 4.2.3 卵巢和子宫组织切片制作
  • 4.2.4 卵巢和子宫的组织观察
  • 4.2.5 数据处理
  • 4.3 实验结果
  • 4.3.1 不同激素处理对诱发雌性蓝狐发情的影响
  • 4.3.2 不同激素处理对蓝狐卵泡发育的影响
  • 4.3.3 不同激素处理对蓝狐卵巢组织结构变化的影响
  • 4.3.4 不同激素处理对蓝狐子宫结构的影响
  • 4.4 讨论
  • 4.5 本章小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 攻读学位期间发表的学术论文
  • 致谢

    • 相关论文文献

    • [1].Optimal Estimation and Tracking Control for Variable-speed Wind Turbine with PMSG[J]. Journal of Modern Power Systems and Clean Energy 2020(01)
    • [2].不平衡电网电压下PMSG并网逆变器全阶滑模控制[J]. 太阳能学报 2017(01)
    • [3].Effect of PMSG/hCG Superovulation on Mouse Embryonic Development[J]. Journal of Integrative Agriculture 2013(06)
    • [4].PMSG免疫学检测方法的建立[J]. 黑龙江畜牧兽医 2019(17)
    • [5].不同来源PMSG对肉山羊同期发情及排卵效果比较[J]. 云南畜牧兽医 2015(06)
    • [6].基于直驱型PMSG风力发电系统的变桨自抗扰控制[J]. 现代电子技术 2011(20)
    • [7].不同剂量PMSG对夏季波杂山羊诱导发情效果的影响[J]. 动物医学进展 2008(06)
    • [8].Small Signal Stability Analysis with Penetration of Grid-connected Wind Farm of PMSG Type[J]. 电力系统自动化 2012(08)
    • [9].PMSG对甘肃高山细毛羊同期发情和繁殖率的影响[J]. 草业科学 2015(11)
    • [10].直驱风电系统PMSG有无速度传感器控制的比较[J]. 高电压技术 2009(12)
    • [11].PMSG的生物学特性及在生命科学研究领域中的应用[J]. 实验动物科学 2009(04)
    • [12].Research on DCC Strategy for Grid-Connected Inverter of D-PMSG under Unbalanced Network Voltage Conditions[J]. Electricity 2012(Z1)
    • [13].使用无速度传感器的PMSG单位功率因数控制[J]. 高电压技术 2010(02)
    • [14].基于自适应反推控制的无传感器PMSG闭环I/f控制[J]. 系统仿真学报 2019(03)
    • [15].基于反馈线性化PMSG风力发电系统控制[J]. 系统仿真学报 2010(06)
    • [16].PRID+PMSG对哺乳期空怀母羊的发情处理[J]. 当代畜禽养殖业 2018(07)
    • [17].孕马血清促性腺激素提取与纯化的研究[J]. 黑龙江畜牧兽医 2015(07)
    • [18].Validation of DFIG and PMSG Wind Turbines' LVRT Capabilities Through Real Field Tests[J]. Electricity 2012(Z1)
    • [19].不同剂量PMSG对獭兔超数排卵效果的影响[J]. 黑龙江畜牧兽医 2013(07)
    • [20].不同剂量的PMSG对獭兔超数排卵效果的影响[J]. 中国养兔 2013(01)
    • [21].PMSG风力发电系统转速估计算法的研究[J]. 电力系统保护与控制 2016(05)
    • [22].PMSG在肉牛生产中的应用[J]. 中国奶牛 2012(02)
    • [23].混合风电场中PMSG协助感应发电机低电压穿越[J]. 电力自动化设备 2015(02)
    • [24].由孕马胎盘提取PMSG工艺的研究[J]. 中国草食动物 2008(01)
    • [25].孕马胎盘PMSG提取工艺的研究[J]. 中国奶牛 2008(04)
    • [26].基于EUKF模型的PMSG系统无速度传感器控制[J]. 电气传动 2019(08)
    • [27].PMSG、hCG复制昆明小鼠超数排卵模型实验研究[J]. 心理月刊 2019(15)
    • [28].PMSG和hCG诱导长爪沙鼠超数排卵方案的优化[J]. 中国比较医学杂志 2015(07)
    • [29].血促性素(PMSG)在绵羊超数排卵中的应用效果观察[J]. 当代畜牧 2014(12)
    • [30].海上风电场PMSG和VSC-HVDC综合调频概率评估[J]. 电力系统及其自动化学报 2018(07)

    标签：;  ;  ;  ;  

    PMSG的纯化及其对幼鼠和幼蓝狐卵巢和子宫的影响
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5