论文摘要
第一部分SUM0-4基因A／G163多态性与1型糖尿病的关联目的：探讨泛素样蛋白4（SUM0-4）基因A／G163多态性与中国汉族人1型糖尿病的关系。设计：横断面、病例对照研究。方法：采用多聚酶链式反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测174例经典T1DM患者、176例LADA患者、165例特发性T1DM患者和264例健康对照者SUM0-4基因的163位点基因型。根据起病年龄是否大于20岁，将经典T1DM患者分为青少年急性起病T1DM（J0型）和成人急性起病T1DM（A0型），根据GAD-Ab滴度是否大于0.3将LADA患者分为高滴度的LADA1和低滴度的LADA2两组，根据BMI值是否大于25将特发性T1DM患者分为非肥胖特发性T1DM和肥胖型特发性T1DM。分析SUM0-4基因A／G163多态性与青少年急性起病T1DM、成人急性起病T1DM、LADA1、LADA2、非肥胖特发性T1DM、肥胖特发性T1DM的关联。结果：1．SUM0-4基因A／G163多态性在未经进一步分型总的T1DM患者与正常对照组比较等位基因及基因型频率均无显著性差异。2．SUM0-4基因A／G163多态性在经典T1DM组、LADA组与正常对照组比较等位基因及基因型频率均无显著性差异；特发性T1DM组等位基因G163频率明显高于正常对照组（P＜0.01），特发性T1DM组基因型GG频率明显高于正常对照组（P＜0.05），基因型AA频率明显低于正常对照组（P＜0.05）。3．J0型T1DM组等位基因G163频率明显高于正常对照组（P＜0.05），基因型AA频率明显低于正常对照组（P＜0.05），A0型T1DM组与正常对照组比较等位基因及基因型频率均无显著性差异；LADA1组和LADA2组等位基因和基因型频率与正常对照组比较均无显著性差异；非肥胖特发性T1DM组等位基因G163频率明显高于正常对照组（P＜0.01），基因型AA频率明显低于正常对照组（P＜0.01），肥胖特发性T1DM组与正常对照组比较等位基因及基因型频率均无显著性差异。4．SUM0-4基因A／G163各基因型在性别组成、起病年龄、BMI相比较无统计学差异。5．GAD-Ab阳性的经典T1DM患者等位基因G163频率明显高于GAD-Ab阴性的患者（P＜0.05）。IA2-Ab阳性的经典T1DM患者等位基因G163频率与IA2-Ab阴性的患者比较无显著性差异。结论：1．在中国汉族人群中，SUM0-4基因A／G163多态性与T1DM的关系具有遗传异质性。等位基因G163与J0型T1DM、非肥胖特发性T1DM易感性相关联，与A0型T1DM、肥胖特发性T1DM、LADA无关联。2．经典T1DM患者GAD-Ab阳性率与等位基因G163有关联。第二部分CTLA-4基因外显子1A／G49多态性与1型糖尿病的关联目的：探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）基因外显子1A／G49多态性与中国汉族人1型糖尿病的关系。设计：横断面、病例对照研究。方法：采用PCR-RFLP技术检测176例经典T1DM患者、181例LADA患者、179例特发性T1DM患者和290例健康对照者CTLA-4基因外显子1的49位点基因型。根据起病年龄是否大于20岁，将经典T1DM患者分为青少年急性起病T1DM（J0型）和成人急性起病T1DM（A0型），根据GAD-Ab滴度是否大于0.3将LADA患者分为高滴度的LADA1和低滴度的LADA2两组，根据BMI值是否大于25将特发性T1DM患者分为非肥胖特发性T1DM和肥胖型特发性T1DM。分析CTLA-4基因外显子1A／G49多态性与青少年急性起病T1DM、成人急性起病T1DM、LADA1、LADA2、非肥胖特发性T1DM、肥胖特发性T1DM的相关性。结果：1．未经进一步分型总的T1DM患者CTLA-4等位基因G49频率明显高于正常对照（P＜0.01），基因型GG明显高于正常对照组（P＜0.01），基因型AA明显低于正常对照组（P＜0.01）。2．在经典T1DM组、LADA组、特发性T1DM组，等位基因G49频率均明显高于正常对照（P＜0.01），基因型GG均明显高于正常对照组（P＜0.01），基因型AA均明显低于正常对照组（P＜0.01）。3．J0型、A0型T1DM患者等位基因G49频率均明显高于正常对照组（P＜0.01），基因型GG频率均明显高于正常对照组（P＜0.01），基因型AA频率均明显低于正常对照组（P＜0.05）；LADA1患者等位基因G49频率明显高于正常对照组（P＜0.01），基因型GG频率明显高于正常对照组（P＜0.01），LADA2患者等位基因G49频率明显高于正常对照组（P＜0.01）；非肥胖特发性T1DM患者等位基因G49频率明显高于正常对照组（p＜0.01），基因型GG频率明显高于正常对照组（p＜0.01），肥胖特发性T1DM患者等位基因及基因型频率与正常对照组比较均无显著性差异。4．未经进一步分型总的T1DM女性患者基因型GG的比例明显高于男性（P＜0.05），经典T1DM男性患者基因型AA的比例明显高于女性（P＜0.01），各基因型在起病年龄、BMI相比较无统计学差异。5．等位基因G49与GAD-Ab、IA2-Ab无关。结论：1．在中国汉族人中，除肥胖特发性T1DM外，CTLA-4外显子1等位基因G49与T1DM易感性相关联。2．CTLA-4基因与T1DM的关联与性别有关联，在女性易感性更高，与起病年龄、BMI无关联。3．等位基因G49与GAD-Ab IA2-Ab无关联。第三部分PTPN22基因C／T1858和INS-VNTR多态性与1型糖尿病的关联目的：探讨PTPN22基因C／T1858和INS-VNTR多态性与中国汉族人1型糖尿病的关系设计：横断面、病例对照研究。方法：采用PCR-RFLP技术检测PTPN22基因C／T1858和INS-VNTR多态性。结果：1．在正常对照组和T1DM组中均未发现PTPN22基因有C1858T的突变，全部为基因型CC。2．经典T1DM、LADA、特发性T1DM患者与正常对照组比较，INS-VNTR的Ⅰ／Ⅰ、Ⅰ／Ⅲ、Ⅲ／Ⅲ类等位基因及基因型频率比较均无显著性差异。结论：1．在中国汉族人中，PTPN22没有C1858T的多态性。2．在中国汉族人中，INS-VNTR多态性与T1DM无关联。第四部分HLA-DQ与SUM0-4、CTLA-4在1型糖尿病中的相互作用目的：探讨HLA-DQ与SUM0-4、CTLA-4在中国汉族人1型糖尿病中的相互作用。设计：横断面、病例对照研究。方法：采用PCR-直接测序法检测HLA-DQ基因多态性，采用PCR-RFLP技术检测SUM0-4基因A／G163、CTLA-4基因外显子1A／G49多态性。结果：1．HLA-DQA1*03和HLA-DQB1*0303等位基因在J0型、J0型、经典T1DM中的频率均明显高于正常对照（P＜0.01）。2．在J0型T1DM中，HLA-DQA1*03+患者、HLA-DQA1*03-患者、HLA-DQB1*0303+患者、HLA-DQB1*0303-患者的SUM0-4基因A／G163基因型分布与正常对照组比较均无显著性差异。经典T1DM患者中，HLA-DQA1*03-且CTLA-4基因型GG的患者和HLA-DQB1*0303-且CTLA-4基因型GG的患者比例均明显高于正常对照组（P＜0.01），HLA-DQA1*03-且CTLA-4基因型AA的患者和HLA-DQB1*0303-且CTLA-4基因型AA的患者比例均明显低于正常对照组（P＜0.05），HLA-DQA1*03+患者、HLA-DQB1*0303+患者CTLA-4基因型与正常对照组比较均无显著性差异。3．J0型TIDM组（8.8％）和非肥胖特发性T1DM组（6.1％）同时具有SUM0-4基因型GG和CTLA-4基因型GG的比例明显高于正常对照组（1.1％），具有统计学差异（P＜0.01），而J0型T1DM组（8.8％）和非肥胖特发性T1DM组（6.1％）之间无统计学差异；J0型T1DM组（33.7％）同时具有SUM04基因型AG和CTLA-4基因型GG比例明显高于正常对照组（14.7％），具有统计学意义（P＜0.01）。结论：1．在中国汉族人中，HLA-DQA1*03和HLA-DQB1*0303是J0型T1DM、A0型T1DM和经典T1DM的易感等位基因。2．HLA-DQ和SUM0-4基因与J0型T1DM的易感作用是相互独立的，没有协同作用；在经典T1DM患者中，HLA-DQA1*03-、HLA-DQB1*0303-与CTLA-4基因呈现出协同作用。3．中国汉族人中，SUM0-4基因和CTLA-4基因与J0型T1DM、非肥胖特发性T1DM的关联性具有协同作用。