丁少青:东北七鳃鳗TRAF6基因克隆、表达分析及亚细胞定位研究论文

丁少青:东北七鳃鳗TRAF6基因克隆、表达分析及亚细胞定位研究论文

本文主要研究内容

作者丁少青,周泽斌,王雅倩,罗鑫,何缘圆,任建峰,李伟明,张庆华(2019)在《东北七鳃鳗TRAF6基因克隆、表达分析及亚细胞定位研究》一文中研究指出:为研究TRAF6在TLR信号介导的先天免疫中的调控作用,研究通过克隆技术获得了东北七鳃鳗(Lethenteron morii)TRAF6基因的cDNA全长,命名为LmTRAF6。利用实时荧光定量方法(qPCR)分析了LmTRAF6在幼鱼和成鱼中各组织的表达情况以及在铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)感染后脂肪体、鳃、肠和肾组织在不同时间点的表达量变化。利用双酶切技术构建pEGFP-TRAF6重组质粒并转染HEK293T细胞, 48h后进行荧光观察并拍照。结果表明, LmTRAF6的cDNA全长为2751 bp,开放阅读框(ORF)为1785 bp,编码594个氨基酸。其蛋白结构域高度保守,具有RING结构、两个锌指结构、环-环(Coiledcoil)α螺旋结构域和MATH结构域。通过系统进化树分析,发现LmTRAF6与哺乳类以及鱼类TRAF6的亲缘关系较近,与果蝇、中国对虾TRAF6的亲缘关系较远。qPCR结果显示, LmTRAF6在各组织中均有表达,在幼鱼的心脏、皮肤、鳃、肝中的表达量相对较高,而在肠中表达量相对较低。在成鱼的肾、鳃、肌肉中的表达量相对较高,而在心脏中表达量相对较低。成鱼LmTRAF6在铜绿假单胞菌感染后,鳃、肠和肾的表达量在24h达到峰值。细胞定位显示, LmTRAF6在HEK293T的细胞质和细胞核中均有表达。以上结果为进一步探究七鳃鳗中TRAF6在TLR信号通路中的作用奠定了理论基础。

Abstract

wei yan jiu TRAF6zai TLRxin hao jie dao de xian tian mian yi zhong de diao kong zuo yong ,yan jiu tong guo ke long ji shu huo de le dong bei qi sai man (Lethenteron morii)TRAF6ji yin de cDNAquan chang ,ming ming wei LmTRAF6。li yong shi shi ying guang ding liang fang fa (qPCR)fen xi le LmTRAF6zai you yu he cheng yu zhong ge zu zhi de biao da qing kuang yi ji zai tong lu jia chan bao jun (Pseudomonas aeruginosa)gan ran hou zhi fang ti 、sai 、chang he shen zu zhi zai bu tong shi jian dian de biao da liang bian hua 。li yong shuang mei qie ji shu gou jian pEGFP-TRAF6chong zu zhi li bing zhuai ran HEK293Txi bao , 48hhou jin hang ying guang guan cha bing pai zhao 。jie guo biao ming , LmTRAF6de cDNAquan chang wei 2751 bp,kai fang yue dou kuang (ORF)wei 1785 bp,bian ma 594ge an ji suan 。ji dan bai jie gou yu gao du bao shou ,ju you RINGjie gou 、liang ge xin zhi jie gou 、huan -huan (Coiledcoil)αluo xuan jie gou yu he MATHjie gou yu 。tong guo ji tong jin hua shu fen xi ,fa xian LmTRAF6yu bu ru lei yi ji yu lei TRAF6de qin yuan guan ji jiao jin ,yu guo ying 、zhong guo dui ha TRAF6de qin yuan guan ji jiao yuan 。qPCRjie guo xian shi , LmTRAF6zai ge zu zhi zhong jun you biao da ,zai you yu de xin zang 、pi fu 、sai 、gan zhong de biao da liang xiang dui jiao gao ,er zai chang zhong biao da liang xiang dui jiao di 。zai cheng yu de shen 、sai 、ji rou zhong de biao da liang xiang dui jiao gao ,er zai xin zang zhong biao da liang xiang dui jiao di 。cheng yu LmTRAF6zai tong lu jia chan bao jun gan ran hou ,sai 、chang he shen de biao da liang zai 24hda dao feng zhi 。xi bao ding wei xian shi , LmTRAF6zai HEK293Tde xi bao zhi he xi bao he zhong jun you biao da 。yi shang jie guo wei jin yi bu tan jiu qi sai man zhong TRAF6zai TLRxin hao tong lu zhong de zuo yong dian ding le li lun ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自水生生物学报的丁少青,周泽斌,王雅倩,罗鑫,何缘圆,任建峰,李伟明,张庆华,发表于刊物水生生物学报2019年01期论文,是一篇关于东北七鳃鳗论文,基因论文,铜绿假单胞菌论文,基因克隆论文,表达论文,细胞定位论文,水生生物学报2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自水生生物学报2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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